Ирина Эланс

Автор который поможет с любыми образовательными и учебными заданиями

Микробиология. 4

Московская государственная академия ветеринарной

медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина ______________________________________________________

Кафедра микробиологии и иммунологии

Контрольная работа по микробиологии

Фроловой О.А., студентки

3-его курса, 2-ой группы,

факультета ветеринарной

медицины, заочной формы

обучения.

Шифр: 0256

Проверил: ________________________________________

Москва, 2003

СОДЕРЖАНИЕ

Понятие об антителах. Физико-химические,

антигенные, функциональные различия иммуноглобулинов…………………3

Характеристика возбудителей микоплазмозов

рогатого скота ……………………………………………………………………8

Виды диагностических препаратов.

Принцип изготовления и контроль аллергенов………………………………11

Ознакомьтесь и опишите работу ветеринарной лаборатории,

обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной

диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно

порядок этого исследования и его результаты………………………………..12

Список использованной литературы…………………………………………..14

Понятие об антителах. Физико-химические, антигенные, функциональные различия иммуноглобулинов.

Антитела (иммуноглобулины) – продукты гуморального иммунного ответа, это глобулины, специфически реагирующие с антигеном, вызвавшим их образование.

Антитела являются важным специфическим фактором защиты организма против возбудителей болезней и генетически чужеродных веществ. Они образуются в организме в результате естественного инфицирования, вакцинации живыми или убитыми вакцинами, контакта лимфоидной системы с чужеродными клетками или тканями (трансплантаты) либо с собственными аутоантигенами.

По функциональным свойствам различают:

нейтрализующие - антитоксины, антиферменты и вируснейтрализующие антитела;
лизирующие – бактериолизины, гемолизины и цитолизины;
коагулирующие – агглютинины и преципитины.

Также выделяют комплементсвязывающие антитела.

Антитела подразделяют на тепловые, которые хорошо вступают в реакцию взаимодействия при температуре 37 ⁰С, и холодовые (криофильные), вступающие в реакцию при 4 ⁰С.

По физическим свойствам, в частности, по подвижности в электрическом поле белки сыворотки крови разделяются на альбумины и три глобулиновые фракции – альфа, бета и гамма. При помощи электрофореза было установлено, что антитела имеются только в бета- и гамма-глобулиновых фракциях.

В результате центрифугирования антитела были разделены на две основные группы: 7S, небольшие молекулы антител, и 19S, большие молекулы антител. После электрофореза антитела 7S в основном обнаруживаются в гамма-глобулиновой фракции, а 19S – в бета-глобулиновой.

Также было установлено, что антитела имеют различное количество активных центров в молекуле, что определяет их валентность. В этой связи они были разделены на полные и неполные. Полные (двух или пятивалентные) антитела при взаимодействии с антигеном, на который они выработаны, дают визуально видимые реакции (агглютинации, лизиса, преципитации). Неполные (моновалентные, блокирующие) антитела при специфическом взаимодействии с гомологичным антигеном не дают видимого проявления серологической реакции, т.е. не могут агрегировать частицы в крупные конгломераты, а лишь блокируют их. Неполные антитела образуются независимо от полных антител и выполняют те же функции. Представлены они различными классами иммуноглобулинов. Для обнаружения неполных антител существуют специальные реакции – Кумбса, блокирующая проба.

В соответствии с Международной классификацией сывороточные белки, несущие «антительную» активность и называвшиеся ранее гамма-глобулинами, получили название иммуноглобулинов и символ Ig. Иммуноглобулины подразделяют на пять классов IgG, IgМ, IgА, IgD, IgЕ, в пределах каждого класса делятся на подклассы.

Иммуноглобулины - это сложные белковые образования, мономеры или полимеры. Молекулы иммуноглобулинов состоят из двух параллельных цепочек: 2H (две ''тяжелые'' цепочки) и 2L (две ''легкие'' цепочки), связанных между собой дисульфидными мостиками. Легкие цепи являются общими для всех классов и подклассов. Тяжелые цепи имеют характерные особенности строения у каждого класса (подкласса). Легкие цепи подразделены на два типа: κ (каппа) и λ (лямбда). Тяжелые цепи обозначаются: γ (гамма), μ (мю), α (альфа), δ (дельта) и ε (эпсилон). В молекуле иммуноглобулина различают два вида межцепьевых дисульфидных связей: между одноименными тяжелыми цепями и между легкими и тяжелыми цепями. В одной молекуле иммуноглобулина никогда не может быть два одинаковых типа цепей.

В структуре иммуноглобулина можно выделить: константные области, в них постоянная последовательность аминокислот; вариабельные части; гипервариабельные участки; шарнирные области - необходимы для изменения конформации, в них есть участки связывания белков системы комплемента. При обработке молекулы иммуноглобулина папаином он распадается на три фрагмента – два из них Fab-фрагменты (Fragment antigen - binding) и один Fc-фрагмент. Fab-Фрагмент обладает способностью связываться с антигеном, но не вызывает агглютинацию и преципитацию. С- концевой участок H- цепей служит для прикрепления к клеточному Fc- рецептору. Fc- фрагмент способен активировать систему комплемента, обеспечивает способность иммуноглобулина G проходить через биомемрану (проходит через фетоплацентарный барьер), определяет цитофильность, оказывает опсонизирующее действие на объекты фагоцитоза.

При всей специфичности антитела, образовавшиеся при иммунном ответе организма, неоднородны и отличаются друг от друга, т.е. они гетерогенны. Главной основой гетерогенности (разнообразия специфичностей) антител является уникальность их активных центров. Антитела гетерогенны по принадлежности к различным классам и подклассам, а также по физико-химическим и биологическим свойствам.

Благодаря наличию у антител активного центра они способны реагировать с антигеном. Активный центр – полость или щель, соответствующая пространственной конфигурации детерминантной группы антигена. Последняя же определяется последовательностью аминокислот вариабельных участков легких и тяжелых цепей антител. Активный центр, куда входит определенной формы и жесткости детерминантная группа, должен быть ей комплементарен, без чего не наступит феномен серологической специфичности. Молекула антитела связывается с детерминантой антигена не целиком, а лишь определенной частью, называемой активным центром. Предполагается, что антиген и антитела соединяют следующие силы: гидрофобное взаимодействие, водородные связи, кулоновы силы между группами ионов с противоположным зарядом, вандерваальсовы силы, которые действуют на очень близком расстоянии.

Активность связывания антител с антигеном оценивается такими понятиями, как аффинитет и авидность. Аффинитет характеризует уровень сродства антитела к испытуемому антигену, степени совпадения (комплементарности) конфигураций активного центра антитела и антигенной детерминанты. Под авидностью понимают количество (валентность) и расположение активных центров, характеризующие «жадность» связывания с антигеном всей молекулы антитела. Чем выше авидность иммунной сыворотки, тем слабее склонность агрегатов к диссоциации. Отмечено, что на один и тот же антиген могут образовываться антитела с различным уровнем аффинитета и авидности. Высокоаффинные антитела образуют более прочные комплексы с антигеном, чем низкоаффинные. Авидность зависит как от аффинности, так и от валентности, приходящейся в среднем на одну молекулу антител. При равной аффинности авидность IgM больше, чем авидность IgG, поскольку IgM функционально пятивалентен, а IgG двухвалентен.

Иммуноглобулины содержат три вида антигенных детерминант: изотипические, аллотипические и идиотипические. У каждого биологического вида тяжелые (5 классов) и легкие (2 типа) цепи иммуноглобулинов имеют определенные антигенные особенности. Одинаковые антигенные детерминанты для каждого представителя данного вида называют изотипическими. Вместе с тем имеются внутривидовые различия названных цепей иммуноглобулинов – аллотипы. Их признаки генетически детерминированы. Существуют различия между разными антителами, даже если они относятся к одному классу, подклассу и аллотипу. Эти различия названы идиотипами. Они характеризуют «индивидуальность» данного иммуноглобулина. Фактически идиотипы – антигенные детерминанты, которые отличают один V–домен от всех других.

У лошадей установлены IgМ, IgG и IgА, у крупного рогатого скота – IgG (два подкласса: G1 иG2), IgМ и IgА, у свиней, овец и коз – IgМ, IgG и IgА, у домашних птиц – IgМ, IgG и IgА.

Субклассы

Время полужизни

Характеристика

G

G1, G2, G3, G4

18-23 дня

Мол. масса 160000, константа седиментации 7S. В сыворотке крови содержится в самой высокой концентрации (в среднем 12 г/л) и составляет 70-85 % всех Ig, есть также в тканевых жидкостях, двухвалентен, образует с поливалентными антигенами сетевую структуру, вызывает преципитацию растворимых антигенов. Принимает участие в реакции агглютинации и опсонизации корпускулярных антигенов. Для лизиса антигена необходимо связывание молекулой IgG комплемента. IgG играет ведущую роль в защите от многих вирусных и бактериальных инфекций (оспа, бешенство, столбняк), обладает выраженными свойствами нейтрализации токсинов, выдерживает нагревание при 75 ⁰С 30 минут, проходит через фетоплацентарный барьер.

М

М1, М2, М3

5-6,5 дней

Мол. масса 950000, константа седиментации 19S, около 6% всех Ig. Находится преимущественно в плазме крови, средняя концентрация в сыворотке крови человека 1,0 г/л, при инфекционных заболеваниях количество его значительно повышается. Функционально пятивалентен, первым появляется после заражения или вакцинации животного. Обладает выраженной способностью агглютинировать, преципитировать или лизировать антигены, а также связывать комплемент. Не участвует в аллергических реакциях, не переходит через плаценту.

А

сывороточный

5 дней

Мол. масса 170000, константа седиментации 7S, мономер, концентрация в сыворотки крови 15-20 % общего количества Ig, не обладает способностью преципитировать растворимые антигены, не связывает комплемент по классическому пути, принимает участие в реакции нейтрализации токсинов, термоустойчив, синтезируется в селезенке, лимфатических узлах и в слизистых оболочках и поступает в секреты – слюну, слезную жидкость, бронхиальный секрет, молозиво.

секреторный (SIgA)

Мол. масса 380000, константа седиментации 11S и 15S, полимер, чаще димер. Наличие добавочного структурного компонента, отсутствующего в сывороточном; синтезируется в слизистых оболочках. Мастная защита слизистых оболочек. В кишечном тракте подавляет бактериальную адгезию, нейтрализует вирусы. SIgA образуется в результате ассоциации димерной формы IgA с особым белком, названным секреторным компонентом, находящимся в собственном слое слизистой оболочки, проходит базальную мембрану и проникает в эпителиальную клетку, где соединяется с секреторным компонентом, после чего происходит выход синтезированного SigA на поверхность эпителиального покрова кишечника.

D

2,8 дня

Мол. масса 160000, константа седиментации 7S, концентрация в сыворотке крови человека не превышает 1 % от общего количества Ig. Является одним из основных Ig, входящих в состав рецепторов В-лимфоцитов, термостабилен, может активировать комплемент по альтернативному пути, обладает антивирусной активностью, не связывается с тканями. Биологическая функция еще не совсем ясна.

2,4 дня

Мол. масса 190000, константа седиментации 8,5S, концентрация в сыворотке крови в среднем 0,25 мг/л, мономер. Термолабилен, инактивируется нагреванием при 56 ⁰С в течение 1 ч, не связывает комплемента, быстро и прочно связывается с клетками тканей, с тканевыми базофилами, принимает участие в реакции гиперчувствительности немедленного типа. При аллергических заболеваниях концентрация IgЕ в сыворотке крови значительно увеличивается. Считают, что IgЕ играет защитную роль при гельминтозных и протозойных заболеваниях, в частности способствует усилению фагоцитарной активности макрофагов и эозинофилов.

Характеристика возбудителей микоплазмозов рогатого скота.

Микоплазмы – мельчайшие свободноживущие прокариоты без ригидной клеточной стенки. Функцию клеточной стенки у них выполняет цитоплазматическая мембрана.

Микоплазмы обладают полиморфизмом клеток, состоящих из ветвистых, шаровидных, разной оптической плотности особей и мельчайших репродуцирующих элементов размером 100-450 нм; имеют наружную трехслойную цитоплазматическую мембрану, в которой сосредоточено большинство биосинтетических и регуляторных функций; геном представлен одной молекулой ДНК, формирующей кольцевую хромосому, реплицирующуюся полуконсервативным путем; нуклеотидный состав ДНК характеризуется низким содержанием гуанина и цитозина; имеют множественный путь репродукции: почкование, сегментацию ветвистых и цепочных форм, элементарные тельца, простое деление; нуждаются для роста в стеролах (за исключением ахолеплазм) и нативном белке; на плотных средах формируют колонии с приподнятым центром, напоминающие яичницу-глазунью; нечувствительны к пенициллинам и другим антибиотикам, угнетающим синтез пептидогликанов клеточной стенки бактерий; вызывают гемадсорбцию, гемагглютинацию и лизис эритроцитов различного происхождения; имеют четко выраженные антигенные различия.

Микоплазмы отнесены к отделу Tenericutes, классу Mollicutes, порядку Mycoplasmatales, который состоит из трех семейств: микоплазм (Mycoplasmataceae), ахолеплазм (Acholeplasmataceae) и спироплазм (Spiroplasmataceae).

Семейство микоплазм подразделяется на два рода: микоплазм (Mycoplasma) и уреаплазм (Ureaplasma).

Микоплазмы исключительно полиморфные микроорганизмы.

В мазках из пораженных органов и из культур они имеют форму подковообразных, сферических, нитевидных, овоидных палочковидных или напоминающих кольца образований.

Микоплазмы грамотрицательны, хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе, для витальной окраски применяют специальный метод Динеса.

Клетки микоплазм снаружи имеют трехслойную мембрану толщиной 7,5-10 нм; внутри содержится цитоплазма и дифференцированный нуклеоид, представленный замкнутой в кольцо молекулой ДНК, формирующей одну хромосому. В цитоплазме находятся рибосомы, их размер соответствует величине рибосом бактерий. У микоплазм также обнаружены внутрицитоплазматические мембранные структуры, выполняющие функцию субстрата синтеза энергии, и отсутствуют типичные мезосомы.

Липиды входят в состав липопротеинового комплекса трехслойной клеточной мембраны. Главный липидный компонент паразитических микоплазм – холестерин. Он обладает свойством стабилизировать мембраны и придавать им эластичность, а также обеспечивает структурную целостность клеток, способствует проникновению жирных кислот и их утилизации, оказывает детоксирующее действие на жирные кислоты, лизирующие микоплазмы, и, наконец, служит энергетическим материалом. Белки микоплазм входят в состав цитоплазмы и мембран и состоят из 17 аминокислот. Гидрофобные компоненты мембранных белков микоплазм обладают выраженной антигенностью.

Микоплазмы размножаются в бесклеточных питательных средах, содержащих полноценный белок, холестерин, нуклеиновые кислоты, углеводы, витамины и минеральные соли.

Основа сред – триптический перевар бычьего сердца, перевар Хоттингера, пептон Мартена, отвар сердечной мышцы.

Микоплазмы можно культивировать в мартеновском МПБ и на МПА с добавлением 15-20 % сыворотки крови лошади или крупного рогатого скота и 1 % глюкозы (рН 7,4-8,0). Широко используют среду Эдварда, основу которой составляет отвар сердца крупного рогатого скота с добавлением 1 % пептона, 20 % сыворотки лошади и 10 % дрожжевого экстракта, а также полужидкий и плотный агар Эдварда. Большое практическое значение получила среда: основа – перевар Хоттингера, 0,3 % поваренной соли, 0,5 % пептона, 0,5 % двузамещенного фосфорнокислого натрия, 0,5 % глюкозы и 20 % стерильной сыворотки лошади.

Рост в первичных высевах наблюдается на 3-7-е сут, адаптированные к среде штаммы растут значительно быстрее. Для первичного выделения микоплазм можно использовать 5-7-суточные куриные эмбрионы, их заражают в желточный мешок. Гибель эмбрионов отмечается с 3-5-го пассажа. Получены также положительные результаты при заражении микоплазмами клеточных культур.

По характеру метаболизма микоплазмы делятся на:

ферментативно активные стеролозависимые (истинные микоплазмы) – нуждаются для роста в холестерине и ферментируют с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, маннозу, фруктозу, крахмал и гликоген;
ферментативно активные стеролонезависимые (ахолеплазмы) – также расщепляют с образованием кислоты приведенные выше углеводы, некоторые штаммы разлагают сахарозу и галактозу;
ферментативно неактивные – восстанавливают тетразолевые соединения, окисляют лактат и глутанат, но не ферментируют углеводы.

Уреаплазмы синтезируют уреазу и расщепляют мочевину.

Функцию антигенов у микоплазм выполняют липидные, полисахаридные и белковые компоненты, избирательная активность которых зависит от вида и серовара микоплазм.

M. mycoides subsp. ьycoides и M. mycoides subsp. сapri продуцируют эндотоксические субстанции, которые известны под названием галактана и глюкана.

Род и вид	Хозяин	Заболевание; место выделения
M. mycoides subsp. mycoides	КРС	Контагиозная перипневмония
M. mycoides subsp. capri	Козы	Плевропневмония
M. bovigenitalium	КРС	Маститы, воспаление гениталий
M. bovis	КРС	Маститы, воспаление гениталий, пневмоартрит
M. bovirhinis	КРС	Бронхопневмония телят
M. dispar	КРС	Бронхопневмония, артриты
M. bovoculi	КРС	Конъюнктивиты
M. alcalescens	КРС	Маститы
M. agalactiae	Овцы, козы	Агалактия овец и коз
M. ovipneumoniae	Овцы, козы	При пневмонии из легких
U. urealyticum	КРС, овцы, козы	Хронические воспали-тельные процессы уроге-нитальных органов. Па-тология плода. Пиело-нефриты. Выделяются из семенной жидкости бы-ков
A. laidlawii	КРС	Выделяется при респира-торных заболеваниях, урогенитальной патоло-гии, маститах

Виды диагностических препаратов. Принцип изготовления и контроль аллергенов.

Диагностические сыворотки в условиях лабораторий применяют для постановки серологических реакций с целью идентификации выделенных микроорганизмов и обнаружения растворимых белков микробного происхождения. Готовят их путем гипериммунизации кроликов или других животных микробными или вирусными антигенами, иногда клетками организма животных (эритроцитами). Используют агглютинирующие сыворотки (сальмонеллезные, колибактериозные, листериозные и др.), преципитирующие (сибиреязвенная), гемолитические в РСК. Диагностические иммунные сыворотки часто метят флюорохромами и применяют для экспресс-диагностики инфекционных болезней (флюоресцирующая сальмонеллезная сыворотка, листериозная и др.). Из диагностических сывороток готовят иммуноглобулины (антирабический флюоресцирующий иммуноглобулин для диагностики бешенства).

Диагностические сыворотки должны обладать строгой специфичностью и высокой чувствительностью.

Диагностические антигены используют для постановки серологических реакций, когда по известному антигену определяют наличие специфических антител в сыворотке крови больного животного. Биофабрики для лабораторий готовят единый бруцеллезный антиген для РСК, РА и РДСК, комплексный туберкулезный антиген для РСК, вибриозный антиген для РА, паратифозные антигены для РА, антигены для диагностики лептоспироза, типоспецифические ящурные антигены, сухой антиген из риккетсий Бернета для РСК и др. Биофабрики также готовят аллергены для аллергической диагностики больных животных (альттуберкулин для птиц, туберкулин сухой очищенный (ППД), маллеин, бруцеллин ВИЭВ, комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ) и др.). Выпускают также диагностические фаги (сибиреязвенный бактериофаг К-ВИЭВ, сибиреязвенный бактериофаг «Гама-МВА», стафилококковые фаги для типирования штаммов и др.), а также лечебно-профилактические фаги (бактериофаг против паратифа и колибактериоза телят, бактериофаг против пуллороза-тифа птиц и др.).

Ознакомьтесь и опишите работу ветеринарной лаборатории, обслуживающей ваш участок. Примите участие в лабораторной диагностике инфекционного заболевания. Опишите подробно порядок этого исследования и его результаты.

Основные задачи ветеринарной лаборатории: разработка и организация мероприятий по предупреждению и ликвидации заболеваний в зоне деятельности лаборатории; проведение диагностических исследований и исследований кормов, воды, мяса, молока и других продуктов.

Кроме того, лаборатория проводит вирусологические, радиологические исследования, осуществляет методическое руководство работой лабораторий ветеринарно-санитарной экспертизы рынков, а также оказывает помощь ветеринарным органам и учреждениям в разработке, организации и проведении необходимых ветеринарных мероприятий. На базе отделов ветеринарной лаборатории ежегодно проводят семинары, стажировки, проходят апробацию и широкие производственные испытания новых диагностикумов для диагностики бруцеллеза животных (РИД, РНГА), а также проходит контроль новых вакцин, рекомендованных Департаментом ветеринарии Минсельхозпрода РФ для профилактики бруцеллеза и бешенства сельскохозяйственных животных.

За счет внедрения новейших методов исследований и своевременной диагностики оперативно проводятся противоэпизоотические и организационно-хозяйственные мероприятия в животноводстве, что позволило сократить заболеваемость и очаговость при хронических болезнях. Благодаря освоению биохимического метода исследований на трихинеллез повысилась выявляемость этой инвазии.

При проведении диагностики туберкулеза крупного рогатого скота используется питательная среда ФАСТ-ЗЛ, благодаря этому значительно повысился уровень выявления болезней и в связи с этим сократилось количество неблагополучных пунктов.

Все исследования проводятся по определенным ГОСТам или методическим указаниям.

В ветеринарной лаборатории действует 14 отделов: бактериологический, серологический, вирусологический, паразитологический, патоморфологический, химико-токсикологический, биохимический, радиологический, противобруцел-лезная экспедиция, отдел по оценке эпизоотического состояния, отдел по диагностике и экспертизе, лептоспирозный, ихтиопатологический, отдел стандартизации и метрологии.

Специалисты отделов лаборатории осуществляют диагностику инфекционных и паразитарных болезней животных, птиц, пушных зверей, рыб и пчел, выявляют нарушения обмена веществ в их организме, помогая тем самым специалистам хозяйств, фермерам, перерабатывающим предприятиям успешно осуществлять лечебно-профилактические мероприятия. В том числе, лаборатория проводит исследования кормов, что особенно актуально весной.

Ежегодно проводится вакцинация животных от самых распространенных и опасных болезней согласно разработанным планам.

ВИД ИССЛЕДОВАНИЯ	ПОСУДА	КОЛИЧЕСТВО И ХАРАКТЕРИСТИКА МАТЕРИАЛА	УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ТРАНСПОРТИРОВКИ	СРОК ИСПОЛНЕНИЯ
Кала на дисбактериоз с определением чувствительности патогенной микрофлоры к антибиотикам и фагам	стерильная банка-15 мин. Обработка кипячением	1ст. ложка кала из несоприкасающейся с землей части каловых масс	холодильник- 30 часов; комнатная температура-3 часа	7 ДНЕЙ
Слизи на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам и фагам	стерильная пробирка с транспортной средой и ватным тамп.	из предполагаемых мест поражений стерильным ватным тампоном	холодильник- до 4-х суток	7 ДНЕЙ
Хламидии Микоплазма Уреоплазма	стерильная пробирка с ватным тамп.	собрать выделения стерильным ватным тампоном	комнатная температура до 48 часов	7 ДНЕЙ
Химическое исследование мочи (Общий анализ)	чистая банка	моча 40-50 мл.	Холодильник до 24 часов	1 ДЕНЬ
Определение в моче диастазы	чистая банка	моча 2-4 мл.	Холодильник до 24 часов	2 ДНЯ
Микроскопия кала	чистая банка	1ст. ложка кала из несоприкасающейся с землей части каловых масс	холодильник до 24 часов	1 ДЕНЬ
Исслед. кала на обн. стеркобилина,биллиру-бина, скрытой крови.	чистая банка	1ст. ложка кала из несоприкасающейся с землей части каловых масс	холодильник- до 20 часов	2 ДНЯ
На вирус чумы	стерильная пробирка с ватным тамп. и 2 мл. NaCl	Сухим тампоном собрать конъюнктивальные истечения или экссудат из носовой полости, опустить в пробирку добавить 2 мл NaCl и тщательно взболтать	комнатная температура-4 часа морозильная камера до 4 дней	1 ДЕНЬ
Овогельминтология кала	банка	1ст. ложка кала из несоприкасающейся с землей части каловых масс	холодильник до 24 часов	1 ДЕНЬ
Соскобы: на демодекоз, саркоптоз, нотоедроз.	два предметных стеклышка	глубокий соскоб с кровью с периферии пораженных участков	комнатная температура до 24 часов	1 ДЕНЬ
На отодектоз	два предметных стеклышка	собрать ватным тампоном выделения из глубины ушных раковин	комнатная температура до 24 часов	1 ДЕНЬ
На дерматофиты	Одноразовая пробирка	шерсть с пораженных участков кожи	комнатная температура до 24 часов	2 ДНЯ
Определение концентрации гормонов (Т3; Т4, кортизол)	Чистая пробирка	2-5 мл. сыворотки	холодильник до 24 часов	7 ДНЕЙ
Цитология	обезжиренное предметное стекло	мазок на предметное стекло с предполагаемого места поражения	холодильник до 24 часов	7 ДНЕЙ
Гистология	банка с формалином	орган, кусочек органа или ткани. Опухоль или кусочек опухоли.	холодильник до 3х дней	14 дней
Клинический анализ крови	проб. с ЕДТА	1 мл.	холодильник до 24 часов	2 ДНЯ

Список использованной литературы

Ветеринарная микробиология и иммунология / Н. А. Радчук, Г.В. Дунаев, Н.М. Колычев – М.: Агропромиздат, 1991.

Микробиология / Н.Р. Асанов – М.: Агропромиздат, 1989.

Ветеринарная микробиология / П.А. Емельяненко – М.: Колос, 1982.

Ветеринарная иммунология / У.Д. Герберт – М.: Колос, 1974.

Инфекционные болезни животных / Д.Ф. Осидзе – М.: Агропромиздат, 1987.

Структура и функции антител. – М.: Мир, 1983.

Справочник по микозам и микотоксикозам сельскохозяйственных животных. – Киев: Урожай, 1982.

Микробиология с вирусологией и иммунологией / К.Д. Пяткин – М.: Мир, 1972.

Выполнила _____________________________ 30.09.2003