Фотометрия

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный машиностроительный университет (МАМИ)»

Факультет химико-технологического оборудования

Кафедра «Биотехнология»

КУРСОВАЯ РАБОТА

по дисциплине «Общая биофизика»

на тему:  «Фотометрия»

Научный руководитель темы:                                                          Мальцевская Н. В.  Исполнитель темы:                                студентка группы 141-622    Шмойлова А. А.

МОСКВА 2016

СОДЕРЖАНИЕ

  1. Введение

 Фотометрия (от греч. photós - свет и греч. metréo - измеряю) – это раздел общей физики, занимающийся измерением света. Фотометрия широко применяется как вид молекулярно-абсорбционного анализа, основанного на пропорциональной зависимости между концентрацией однородных систем (например, растворов) и их светопоглощением в видимой, ИК и УФ областях спектра.

 Фотометрические и спектрометрические методы анализа применяются для определения многих (более 50) элементов Периодической системы, главным образом металлов, анализируются руды, минералы, объекты окружающей среды, продукты переработки обогатительных и гидрометаллургических предприятий. Эффективно эти методы используется в металлургической, электронной областях промышленности, в медицине, биологии, криминалистике и т.д. Большое значение они имеют в аналитическом контроле окружающей среды и решении экологических проблем. Значительно расширились области практического применения методов абсорбционной спектроскопии благодаря более широкому использованию инфракрасной области спектра и приборов на базе ЭВМ. Это позволило разработать методы анализа сложных многокомпонентных систем без их химического разделения. Простые, быстрые и точные методы анализа имеют огромное значение для исследования различных реакций, установления состава и исследования различных химических соединений. Успехи химии координационных соединений, достижения микроэлектроники, приборостроения дают все основания ожидать дальнейшего повышения точности и чувствительности этих методов.

 В производственных  условиях при анализе сплавов, концентратов, руд, солей, удобрений, шлаков  требуется определять элементы  при их высоком содержании. Обычно  такие определения выполняют  продолжительными гравиметрическими  и титриметрическими методами, часто  требующими отделения определяемого  компонента от большинства сопутствующих  элементов. Более быстрые фотометрические  методы неприменимы из-за высоких  оптических плотностей (выше 0,8). Для  уменьшения оптической плотности  раствор разбавляют, что вызывает  при больших разбавлениях ошибки, связанные с изменениями объемов. Более разбавленный раствор можно  приготовить также уменьшением  навески; точность в таком случае  обуславливается только погрешностью  взвешивания.

 Основными метрологическими  характеристиками фотометрии являются: чувствительность, воспроизводимость, правильность, предел обнаружения и точность.

 Чувствительность метода  определяется углом наклона графика  в координатах: абсорбционность – концентрация. Тангенс угла наклона равен молярному коэффициенту абсорбции. Чем больше значение молярного коэффициента, тем чувствительнее определение концентрации данным методом. Значение чувствительности 1*10-6– 1*10-7.

 Воспроизводимость метода обуславливается двумя типами случайных погрешностей: аналитическими (методическими и химическими) и инструментальными. Для повышения воспроизводимости метода желательно измерять абсорбционность в максимуме поглощения. Значение воспроизводимости 2-5%.

 Правильность фотометрического  метода характеризуется близостью, полученных практически, истинному  содержанию определяемого компонента. Значение правильности 99%.

 Предел обнаружения  рассчитывают, исходя из значения  молярного коэффициента абсорбции  и толщины поглощающего слоя. Значение предела обнаружения 10-8 – 10-10%.

 Точность фотометрических  методов зависит от индивидуальных  областей используемых химических  реакций, характеристик применяемого  прибора и других факторов, изменяется  довольно в широких пределах. Значение точности 1-2%.

 Погрешности могут  возникать в связи с отклонением  от основного закона фотометрии. Значения погрешности 0,2-0,5%. [1]

   2. Теоретическая часть

  2.1. Фотометрические методы анализа

Методы анализа, основанные на поглощении электромагнитного излучения анализируемыми веществами, составляют обширную группу абсорбционных оптических методов. При поглощении света атомы и молекулы анализируемых веществ переходят в новое возбужденное состояние. В зависимости от вида поглощающих частиц и способа трансформирования поглощенной энергии различают:

 1. Атомно-абсорбционный анализ, основанный на поглощении световой энергии атомами анализируемых веществ.

 2. Молекулярный абсорбционный анализ, т.е. анализ поглощения света молекулами анализируемого вещества в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях спектра (спетрофотометрия, фотоколориметрия, ИК-спектроскопия).

 3. Анализ поглощения и рассеяния световой энергии взвешенными частицами анализируемого вещества (турбидиметрия, нефелометрия).

 4. Люминесцентный (флуорометрический) анализ, основанный на измерении излучения, возникающего в результате выделения энергии возбужденными молекулами анализируемого вещества.

 Все эти методы иногда объединяют в одну группу спектрохимических или спектроскопических методов анализа, хотя они и имеют существенные различия. Фотоколориметрия и спектрофотометрия основаны на взаимодействии излучения с однородными системами, и их обычно объединяют в одну группу фотометрических методов анализа.

 В фотометрических методах используют избирательное поглощение света молекулами анализируемого вещества. Согласно квантовой механике свет представляет собой поток частиц, называемых квантами или фотонами. Энергия каждого кванта определяется длиной волны излучения. В результате поглощения излучения молекула поглощающего вещества переходит из основного состояния с минимальной энергией E1 в более высокое энергетическое состояние Е2. Электронные пере- ходы, вызванные поглощением строго определенных квантов световой энергии, характеризуются наличием строго определенных полос поглощения в электронных спектрах поглощающих молекул. Причем поглощение света происходит только в том случае, когда энергия поглощаемого кванта совпадает с разностью энергий ∆Е между квантовыми энергетическими уровнями в конечном (E2) и начальном (E1) состояниях поглощающей молекулы:

 hv = ∆Е = Е2 – E1

 Здесь h – постоянная Планка (h = 6,625×10–34 Дж•с); v – частота поглощаемого излучения, которая определяется энергией поглощенного кванта и выражается отношением скорости распространения излучения с (скорости световой волны в вакууме с = 3×1010 см/с) к длине волны λ; v = с/λ. Частота излучения v измеряется в обратных секундах (с –1), герцах (Гц). 1 Гц = 1 с –1.

 Длина волны λ измеряется в ангстремах (1 Å = 1×10–8 см), микрометрах или микронах (1 мкм = 1 мк = 1×10–6 м), нанометрах или миллимикронах (1 нм = 1 ммк = 10 Å = 1×10–9 м).    

Энергия излучения характеризуется электромагнитным спектром, охватывающим область от километровых радиоволн до десятых долей ангстрема γ- излучения и космических лучей. Для характеристики участка спектра часто используют также волновое число θ, которое показывает, какое число длин волн приходится на 1см пути излучения в вакууме, и определяется соотношением: θ = 1/λ.

 Природа полос поглощения в ультрафиолетовой (10–400нм) и видимой (400– 760нм) областях спектра одинакова и связана главным образом с числом и расположением электронов в поглощающих молекулах и ионах. В инфракрасной области (0,8–1000 мкм) она в большей степени связана с колебаниями атомов в молекулах поглощающего вещества.

 В зависимости от используемой аппаратуры в фотометрическом анализе различают спектрофотометрический метод – анализ по поглощению монохроматического света и фотоколориметрический – анализ по поглощению полихроматического (немонохроматического) света в видимой области спектра. Оба метода основаны на пропорциональной зависимости между светопоглощением и концентрацией поглощающего вещества.

 Фотометрические методы подразделяют на прямые и косвенные. В прямых методах определяемый ион М с помощью реагента R переводят в светопоглощающее соединение MR, а затем измеряют интенсивность светопоглощения раствора этого соединения. При косвенных определениях используют вспомогательные со- единения, которые при взаимодействии с определяемым веществом либо разрушаются сами, либо образуют новые светопоглощающие соединения. [2]

    2.2. Основные закономерности светопоглощения

При прохождении через слой вещества (раствора) светового потока с интенсивностью I0 его интенсивность в результате поглощения в слое, отражения и рас- сеяния уменьшается до значения I. Интенсивности падающего светового потока I0 и светового потока I, прошедшего через раствор, можно определить экспериментально. При относительных измерениях поглощения света истинными растворами потерями излучения вследствие отражения и рассеяния обычно пренебрегают.

 Связь между интенсивностями световых потоков I0 и I устанавливается законом Бугера-Ламберта, согласно которому однородные слои одного и того же вещества одинаковой толщины поглощают одну и ту же долю падающей на них свето- вой энергии (при постоянной концентрации растворенного вещества).

 Математически этот закон выражается уравнением экспоненциальной зависимости:

 I = I0e al (1), где е – основание натуральных логарифмов; а – коэффициент поглощения; l – толщина поглощающего слоя.

 Отношение: T = I/I0 называют пропусканием; его значения могут изменяться от 0 до 1. Часто эту величину выражают в процентах. Если величина Т отнесена к толщине слоя в 1 см, то ее называют коэффициентом пропускания. Поглощение излучения характеризуют оптической плотностью: A = lg(I0/I) = –lgT.

 Связь между концентрацией поглощающего раствора и его оптической плотностью lg(I0/I) выражается законом Бера, согласно которому оптическая плотность раствора прямо пропорциональна концентрации растворенного вещества при постоянной толщине слоя: Lg(I0/I) = k1C (2),

 где k1 – коэффициент пропорциональности;   С – концентрация растворенного вещества. Зависимость интенсивности монохроматического светового потока, прошедшего через слой окрашенного раствора, от интенсивности падающего потока света, концентрации окрашенного вещества и толщины слоя раствора определяется объединенным законом Бугера-Ламберта-Бера, который является основным законом светопоглощения и лежит в основе большинства фотометрических методов анализа: I = I0×10–kCl (3) где k – коэффициент светопоглощения, зависящий от природы растворенного вещества, температуры, растворителя и длины волны света.

 Если концентрация С выражена в молях на литр, а l – в сантиметрах, то k представляет собой молярный коэффициент светопоглощения при длине λ и обозначается ελ. В таком случае уравнение примет вид: Cl I I λ −ε = 0 ×10 (4).

 При соблюдении основного закона светопоглощения оптическая плотность раствора прямо пропорциональна молярному коэффициенту светопоглощения, концентрации поглощающего вещества и толщине слоя раствора: А = ελСl (5).

 При графическом изображении зависимости оптической плотности от концентрации (при постоянном значении l) получается прямая линия. Эта прямая проходит через начало координат при отсутствии поглощения света растворителем и систематических погрешностей.

 Уравнения 4 и 5 выведены для монохроматического света, т.е. света определенной длины волны, который может быть выделен при помощи специального оптического устройства – монохроматора. В фотоколориметре измерение интенсивности световых потоков производят не в монохроматическом, а в полихроматическом свете, т.е. на довольно широком участке спектра – в интервале длин волн 20–100 нм. В этом случае в уравнении 5 вместо молярного коэффициента светового поглощения ελ. можно использовать значение среднего молярного коэффициента светопоглощения (εср), зависящие от ширины полосы пропускания светофильтра (εcp < ελ). [3]

    2.3. Спектры поглощения

Спектр поглощения, или, более корректно, абсолютный спектр поглощения вещества представляет собой зависимость количества поглощенного света от длины волны. Такие спектры для красителей в видимой области (400–700 нм) имеют иногда несколько максимумов. Спектры поглощения в ультрафиолетовой (200–400 нм) и видимых областях отражают переходы связанных и несвязанных электронов в молекуле. Это обычно делокализованные π-электроны двойных С=С связей и неподеленные пары азота и кислорода. Поскольку, как правило, все электроны в молекуле при комнатной температуре находятся на нижнем энергетическом уровне, спектры в этой области дают информацию об основном и первом возбужденном электронных состояниях молекулы. Ввиду того, что длина волны поглощенного света соответствует определенному переходу, пики на спектрах поглощения вещества обусловлены присутствием в нем известных структур. Длина волны, при которой 4 наблюдается максимальное поглощение света, обозначается через λмакс. Положение максимума спектра поглощения является важной оптической характеристикой вещества, а характер и вид спектра поглощения характеризуют его качественную индивидуальность. Группа в молекуле, которая дает вклад в спектр ее поглощения, называется хромофором. Такой группой является, например, карбонильная группа >С=О, существующая у всех аминокислот. Другим хромофором является пептидная группа полипептидных цепей. К основным хромофорам белка относятся остатки ароматических кислот: триптофан и в меньшей степени тирозин и фенилаланин. Спектр поглощения триптофана, обусловленный его индольным кольцом с системой сопряженных связей, обладает двумя полосами поглощения с максимумами при 220 и 280 нм. В нуклеиновых кислотах основными хромофорами являются пуриновые и пиримидиновые азотистые основания нуклеотидов. При образовании сопряженных связей в молекуле энергия возбужденного состояния электронов уменьшается, и, следовательно, хромофор начинает поглощать свет большей длины волны. Такой сдвиг в спектрах поглощения называется батохромным. Наоборот, сдвиг спектра в коротковолновую область именуется гипсохромным. Гиперхромный и гипохромный эффекты – это соответственно увеличение и уменьшение экстинкции. Обнаружить очень близко расположенные линии колебательных и вращательных переходов на спектрах молекул удается лишь при высоком разрешении (разрешением называется способность прибора различать две близко расположенные линии). [4]

     2.4. Фотометрические методы определения концентрации вещества в растворе

Фотометрические методы определения концентрации растворов основаны на сравнении поглощения при пропускании света стандартными и исследуемыми растворами. Степень поглощения света фотометрируемым раствором измеряют с помощью фотоколориметров и спектрофотометров. Измерение оптической плотности стандартного и исследуемого окрашенных растворов всегда производят по отношению к раствору сравнения (нулевому (контрольному) раствору). В качестве раствора сравнения можно использовать аликвотную часть исследуемого раствора, содержащего все добавленные компоненты, кроме реагента, образующего с определяемым веществом окрашенное соединение. Если добавляемый реагент и все остальные компоненты раствора сравнения бесцветны и, следовательно, не поглощают лучей в видимой области спектра, то в качестве раствора сравнения можно использовать дистиллированную воду. [5]

     2.5. Метод градуировочного графика

 Для определения содержания  вещества методом градуировочного (калибровочного) графика готовят серию из 5–8 стандартных растворов разных концентраций (не менее 3 параллельных растворов для каждой точки).

 При выборе интервала  концентраций стандартных растворов  руководствуются следующими положениями:

 а) он должен охватывать  область возможных изменений  концентрации исследуемого раствора; желательно, чтобы оптическая плотность  исследуемого раствора соответствовала  примерно середине градуировочной кривой;

 б) желательно, чтобы в  этом интервале концентраций  при выбранных тол-щине кюветы l и аналитической длине волны λ, (в большинстве случаев λ = λмакс светопоглощающего соединения) соблюдался основной закон светопоглощения, т.е. график А = f(C) был линейным;

 в) интервал рабочих  значений λ, соответствующий интервалу  стандартных растворов, должен обеспечивать  максимальную воспроизводимость результатов измерений.

 При совокупности перечисленных  условий измеряют оптические  плотности стандартных растворов  относительно растворителя и  строят график зависимости А = f(C). Полученная кривая называется  градуировочной или калибровочной и имеет вид прямой выходящей из начала координат. Экстраполировать калибровочную прямую к значениям оптических плотностей, лежащим выше последней экспериментально полученной точки, не рекомендуется. Периодически (раз в неделю или реже) калибровочную кривую проверяют по 2–3 свежеприготовленным стандартным растворам. Калибровочные графики, построенные с реактивами разных партий, как правило, не совпадают. Поэтому при смене реактивов график необходимо построить заново. График, построенный при работе на одном приборе, нельзя использовать для расчетов результатов, полученных на другом.

 Определив оптическую  плотность опытного раствора  Ах, находят ее значение на оси ординат, а затем на оси абсцисс – соответствующее ей значение концентрации Сх.

 Этот метод применяют  при выполнении серийных фотометрических  анализов. Он дает хорошие результаты  при соблюдении основного закона  светопоглощения.

 В отличие от других  фотометрических методов, метод  градуировочного графика позволяет определить концентрацию окрашенных растворов даже в тех случаях, когда основной закон светопоглощения не соблюдается. Для построения градуировочной кривой в этих случаях приготавливают значительно большее число стандартных растворов, отличающихся друг от друга по концентрации не более чем на 10%. Такой градуировочный график, имеющий на пологом участке угол наклона не менее 15°, все же позволяет проводить фотометрические измерения, несмотря на то, что между концентрацией раствора и его оптической плотностью нет линейной зависимости. Воспроизводимость определений в этом случае ниже, чем в случае линейной зависимости А = f(C). [6]

2.6. Метод сравнения оптических  плотностей стандартного и исследуемого  растворов

 Для определения концентрации  вещества берут аликвотную часть  исследуемого раствора, приготавливают  из нее окрашенный раствор  для фотометрирования и измеряют его оптическую плотность. Затем аналогично приготавливают 2–3 стандартных окрашенных раствора определяемого вещества известной концентрации и измеряют их оптические плотности при той же толщине слоя (в тех же кюветах).

 Значение оптической  плотности исследуемого раствора  равно: Ах = ελCxlx

 Значение оптической  плотности стандартного раствора  равно: Aст = ελСстlст.

 Разделив одно выражение  на другое получим: Ах/Аст = ελCxlx/(ελCстlст).

 Так как lх = lст, ελ = const, то Сх = CстАх/Aст.

 Метод сравнения применяют  при однократных определениях; он  требует обязательного соблюдения  основного закона светопоглощения.

 Существует и другой  более точный способ определения  неизвестной концентрации Сх, называемый методом ограничивающих растворов. Приготавливают два стандартных раствора с концентрациями C1 и С2 так, чтобы оптическая плотность первого из них A1 была бы меньше оптической плотности Ах исследуемого раствора, а оптическая плотность А2 второго стандартного раствора была бы, наоборот, больше, чем Ах.

 Неизвестную концентрацию  исследуемого вещества рассчитывают  по фор- муле:

 Cx = C1 + (C2 – C1)(Ax – A1)/(A2 – A1). [7]

    3. Устройство и принцип действия фотометрических приборов

 Фотометрические исследования  проводят с помощью фотоколориметров  и спектрофотометров. Измерение  оптической плотности стандартного  и исследуемого окрашенных растворов  всегда производят по отношению  к раствору сравнения (нулевому  раствору). В качестве раствора  сравнения можно использовать  часть исследуемого раствора, содержащего  все добавляемые компоненты, кроме  реагента, образующего с определенным  веществом окрашенное соединение. Если раствор сравнения при  этом остается бесцветным и, следовательно, не поглощает лучей в видимой  области спектра, то в качестве  раствора сравнения можно использовать  дистиллированную воду.

 Устройство и принцип  действия фотометрических приборов  рассмотрим на примере колориметра  фотоэлектрического концентрационного  КФК-2 и КФК-3

 Однолучевой фотометр  КФК-2 предназначен для измерения  пропускания, оптической плотности  и концентрации окрашенных растворов, рассеивающих взвесей, эмульсий  и коллоидных растворов в области спектра 315-980 нм. Пределы измерения пропускания 100-5% (D = 0-1,3). Основная абсолютная погрешность измерения пропускания 1%.

Принципиальная оптическая схема фотоколориметра КФК-2 представлена на схеме 1.

Схема 1: Принципиальная оптическая схема фотоколориметра КФК-2.

1 - источник света; 2 - теплозащитный  светофильтр; 3 – нейтральный светофильтр; 4 – цветной светофильтр; 5 – кювета  с исследуемым раствором или  раствором сравнения; 6 – пластинка, которая делит световой поток  на два потока; 7 – фотодиод; 8 –  фотоэлемент.

 Свет от галогенной  малогабаритной лампы (1) проходит  последовательно через систему  линз, теплозащитный (2), нейтральный (3), выбранный цветной (4) светофильтры, кювету с раствором (5), попадает  на пластину (6), которая делит  световой поток на два: 10% света  направляется на фотодиод при  измерениях в области спектра 590-540 нм) и 90% — на фотоэлемент (при измерениях в области спектра 315-540 нм).

Характеристики светофильтров представлены в таблице 1:

Таблица 1: Спектральные характеристики светофильтров к фотоколориметру КФК-2.

Фотометр фотоэлектрический КФК-3 предназначен для измерения коэффициентов пропускания и оптической плотности прозрачных жидкостных растворов и прозрачных твердых образцов, а также для измерения скорости изменения оптической плотности вещества и определения концентрации вещества в растворах после предварительной градуировки фотометра. Принципиальная оптическая схема фотометра КФК-3 представлена на схеме 2.

 Нить лампы (1) изображается  конденсором (2) в плоскости диафрагмы  Д1 (0,8 х 4,0), заполняя светом щель  диафрагмы. Далее диафрагма Д1 изображается  вогнутой дифракционной решеткой (4) и вогнутым зеркалом (5) в плоскости  такой же щелевой диафрагмы  Д2 (0,8 х 4,0). Дифракционная решетка (6) и зеркало создают в плоскости  диафрагмы Д2 растянутую картину  спектра. Поворачивая дифракционную  решетку вокруг оси параллельной  штрихам решетки, выделяют щелью  диафрагмы Д2 излучение любой  длины волны от 315 до 990 нм. Объектив (7, 8) создает в кюветном отделении слабо светящийся пучок света и формирует увеличенное изображение щели Д2 перед линзой (10). Линза (10) сводит пучок света на приемнике (11) в виде равномерно освещенного светового кружка. Для уменьшения влияния рассеянного света в ультрафиолетовой области спектра за диафрагмой Д1 установлен световой фильтр (3), который работает в схеме при измерениях в спектральной области 315—400 нм, а затем автоматически выводится. В кюветное отделение (между объективом 7, 8 и линзой 10) устанавливаются прямоугольные кюветы (9).

 Фотометр предназначен  для применения в сельском  хозяйстве, медицине, на предприятиях  водоснабжения, в металлургической, химической, пищевой промышленности  и других областях. Пределы измерения  коэффициента пропускания — 0,1-100%, оптической плотности — 0—3%. [8]

Схема 2: Принципиальная оптическая схема фотометра КФК-3.

1 – нить лампы; 2 – конденсор; 3 – световой фильтр; 4 – вогнутая  дифракционная решетка; 5 – вогнутое  зеркало; 6 – дифракционная решетка; 7, 8 – объектив; 9 – кюветы; 10 – линзы; 11 – приемник.

   4. Применение фотометрии для контроля технологических процессов

 Использование фотометрии в нефтепереработке и нефтехимической промышленности имеет исключительную важность для контроля технологических процессов. Определение изменений прозрачности и цвета в потоке предупреждает технический персонал завода о текущих нарушениях технологического процесса, которые могут повлиять на качество конечного продукта.

 До недавнего времени контроль цвета нефтепродуктов проводился лишь в лаборатории методом отбора проб и/или основывался на человеческом восприятии при сравнении образцов с цветовыми эталонами ASTM, Saybolt и др. Сегодня эти измерения производятся при помощи точных и надежных фотометров. Помимо анализа цвета, поточные фотометры позволяют измерять и такие параметры как содержание углеводородов в воде, а также измерение концентрации аммиака, брома, хлора, хромата, кобальта, меди, фтора, перекиси водорода, йода, железа, никеля, озона, фенола, воды и многих других веществ. [9]

 5. Преимущества и недостатки фотометра

Фотометр имеет значительную практическую важность, как средство для суждения о достоинствах различных источников освещения, и ввиду этого подвергалась, особенно в последнее время, внимательной разработке. Несмотря на это,   фотометры не достиглатой степени точности, до которой дошли многие другие отделы     техники измерений, и причина этого лежит взначительной мере в том, что окончательным инструментом фотометра является глаз со всеми его особенностями и недостатками. [10]

6. Вывод

 Исходя из всего  выше сказанного можно сделать  вывод, что фотометрия - как отдел научных измерений, трактующий о сравнении осветительнойспособности различых источников света и о сравнении степени освещения различных освещенных поверхностей – это один важнейших разделов науки.

 7. Список используемой литературы

1. Алесковский В.Б., Бардин В.В., Бойчинова Е.С. и др. Физико-химические методы

анализа. Л.: Химия, 1988.

2. Уильямс Б., Уилсон К. Методы практической биохимии. М.: Мир, 1978.

3. Мецлер Д. Биохимия. М.: Мир, 1980.

4. Рубин А.Б. Биофизика. М.: Высшая школа, 1987.

5. Практикум по биохимии. Под редакцией С.Е. Северина, Г.А. Соловьевой. М.:

Московский университет, 1989.

6. Барковский В.Ф., Городенцева Т.Б., Топорова Н.Б. Основы физико-химических методов анализа: Учебник для техникумов/Под ред. В.Ф. Барковского – М.: Высш. школа, 1983. – 247 с., ил.

7. Булатов М.И., Калинин  И.П. Практическое руководство по  фотометрическим методам анализа. – 5-е изд., перераб. – Л.: Химия, 1986. - 432с.

8. Модуль I. Общая характеристика  физико-химических методов анализа. Спектроскопические методы анализа. «http://kurs.ido.tpu.ru/»

9. Степанова Р.Ф. Использование  компьютерных технологий в практике  количественного анализа. Потенциометрический  и фотометрический методы: Учебное  пособие. Самара: Изд-во «Самарский  университет», 2003. - 53с.

10. Товароведенье. Методы  и техническое обеспечение контроля  качества товаров «http://www.znaytovar.ru/»