Меры борьбы с инфекционным гепатитом собак

ФГОУ ВПО  “Санкт-Петербургская Государственная  Академия Ветеринарной Медицины”

 

 

Кафедра эпизоотологии  и инфекционных болезней сельскохозяйственных животных им. Урбана В. П.

 

 

 

 

 

 

 

Курсовая работа

 

Тема: Меры борьбы с инфекционным гепатитом собак

 

 

 

 

 

Выполнил:

Проверил:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Санкт-Петербург

2008

^План:

 

 

^{1.  Введение                                                                                             3 стр}

^{2.  Этиология                                                                                            4 стр}                                                                                                                                                        

^{3.  Эпизоотологические данные                                                             7 стр}

^{4.  Заражение                                                                                           9 стр}                                                                                                                                                               

^{5.  Патогенез                                                                                          10 стр}

^{6.  Симптомы                                                                                          11 стр}

  ^{7.  Диагностика                                                                                       13 стр}

^{8.  Патологоанатомические изменения                                                16 стр}

^{9.  Дифференциальный диагноз                                                           19 стр}

^{10. Лечение                                                                                              20 стр}

^{11. Профилактика                                                                                    22 стр}

^{12. Меры борьбы                                                                                     23 стр}

^{13. Собственные исследования                                                             24 стр}

^{14. Список литературы                                                                           28 стр}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Введение}

 

 

_И

^{нфекционный гепатит (Hepatitis infectiosa) — острая контагиозная вирусная болезнь проявляющаяся лихорадкой, фолликулярным конъюнктивитом, катаральным воспалением слизистых оболочек дыхательных путей и желудочно-кишечного тракта, а также выраженными поражениями печени и центральной нервной системы.}

^{Инфекционный  гепатит собак (Hepatitis infectiosa canum, болезнь Рубарта, вирусный гепатит) - острая контагиозная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, воспалительными процессами дыхательных путей и пищеварительного канала, поражением печени и желчного пузыря, иногда сопровождающаяся нарушением деятельности центральной нервной системы.}

^{Впервые вирус энцефалита у серебристо-черных лисиц выделил Green (1928) в США. В СССР эту болезнь у лисиц и песцов описали А. П. Киур-Муратов (1933), И. Г. Левенберг (1937), И. А. Бузинов и Т. Я. Ванновский (1938). Инфекционный гепатит собак был выделен в самостоятельную нозологическую единицу после описания его Rubarth (1947) в Швеции. Автор подробно изучил патологоанатомические и патологогистологические изменения при этой болезни, экспериментально доказал, что возбудителем ее является вирус и выдвинул гипотезу об идентичности вирусов инфекционного гепатита собак и энцефалита лисиц. Chaddok (1947) и Siedentopf, Carlson (1949) доказали, что возбудителем инфекционного гепатита собак и энцефалита лисиц является один и тот же вирус. В СССР первое описание патологоанатомических изменений при инфекционном гепатите собак было сделано В. 3. Черняком и соавторами (1955).}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Этиология}

 

_З

^{аболевание  имеет инфекционную этиологию, возбудителем является ДНК-содержащий вирус из семейства  аденовирусов рода Mastadenovirus. Различные штаммы имеют неодинаковую вирулентность, но по антигенному строению и иммуногенным свойствам очень однородны. Аденовирусная инфекция проявляется у собак в двух формах: инфекционный гепатит, вызываемый аденовирусом тип 1 (CAV-1); аденовироз, вызываемый аденовирусом тип 2 (CAV-2).}

^{Предположение о вирусной природе  болезни впервые  высказал в 30-х годах  Каудри, а Рубарт подтвердил это экспериментально.}

^{Вирус проходит через фильтры  Зейтца ЕК, свечи  Беркефельда и  Шамберлана Ла и Лз и задерживается  коллоидными мембранами. Размеры его, по данным электронной микроскопии, 55-96 нм. По морфологическим антигенным и физико-химическим свойствам вирус инфекционного гепатита собак отнесен к обширной группе аденовирусов. Генетическую информацию в нем несет ДНК, вирусная капсула имеет кубическую симметрию и состоит из 252 капсомеров, каждый капсомер - из 5-6 и более мелких субстанций. Вирусные частицы в культуре ткани клеток часто имеют форму кристаллических скоплений, В составе вируса не установлено липидов. Вирус содержит преципитирующий, гемагглютинирующий и комплементфиксирующий антигены. Биологические свойства его подвержены большим изменениям. В частности, в процессе лабораторных пассажей вирус способен изменять патогенность для собак. Доказана однородность штаммов вируса инфекционного гепатита, выделенных от естественно заразившихся гепатитом животных различных видов. Вирус, выделенный от собак, может вызвать болезнь у песцов, лисиц, енотов, и наоборот, вирус, выделенный от зверей, вызывает гепатит у собак с характерными изменениями в печени и расстройством ее функций.}

^{Встречающиеся в природе выделенные штаммы гепатита собак  по культуральным, серологическим, биохимическим, физическим, вирулентным и  антигенным свойствам  идентичны вирусу гепатита песцов и  лисиц.}

^{Возбудитель долго сохраняется  при низких температурах в выделениях, органах и тканях больных животных.}

^{Устойчивость  к дезсредствам. Вирус  относится ко 2-й  группе устойчивости возбудителей инфекционных болезней. По данным А. В. Селиванова и В. И. Уласова (1989) в выделениях больных собак (фекалии, моча, слизь) вирус может сохранять свою жизнеспособность во внешней среде до 1,5 лет. На волосяном покрове собак жизнеспособность возбудителя колеблется в широких пределах в зависимости от температуры окружающего воздуха. При температуре 17°С он инактивируется за 22 - 30 дней, при температуре 0 - 2°С - за 168 -184 дня и при температуре 1-8°С - за 246-263 дня (Сюрин В.Н. и др., 1998). При замораживании, высушивании и консервировании в 50%-ном растворе глицерина не теряет своих свойств 3-5 лет. Высокая температура губительно действует на вирус, он теряет вирулентность при 55°С в течение 40 -50 минут, при нагревании до 100°С - за 1 минуту (Сонин П. Ф., 1966; Henderson, 1959; Cabasso, 1962). Однако по данным Т. И. Истоминой и Л. И. 10 Мындру (1964) вирус выдерживает кипячение 5 минут, а при стерилизации сухим жаром (140°С) инактивируется за 30 минут; автоклавирование (110°С) разрушает вирус за 30 минут. 1 - 3 % - ные растворы формалина, щелочи, лизола, фенола инактивируют вирус в течение 30 минут (Митин Н. И., 1966). Возбудитель проявляет выраженную устойчивость к эфиру, хлороформу, метанолу, антибиотикам. Ультрафиолетовые лучи инактивируют вирус после 2-часового облучения (Cabasso, 1962), однако скорость инактивации определяется составом среды (Fastier, 1958).}

^{Структура вириона включает преципитирующии, гемагглютинирующий и комплементсвязывающий  антигены (Coffin, Coons, Cabasso, 1953, 1962). Преципитирующии антиген состоит из двух компонентов. Один связан с инфекционной вирусной частицей, а другой не связан с инфекционностью вируса. Преципитирующии антиген не устойчив к нагреванию: при температуре 56°С разрушается за 30 минут, при 70°С - за 3 - 5 минут. Гемагглютинирующий антиген обнаружен у всех выделенных эпизоотических штаммов. Он связан с инфекционным компонентом вируса, его удаление методом адсорбции ведет к снижению инфекционности вируса. Гемагглютинин устойчив к нагреванию: при 56°С разрушается за 30 минут, при 70°С - за 3 - 5 минут. Формалин, щелочь, фенол, лизол быстро разрушают вирусный гемагглютинин.}

^{Комплементсвязывающий антиген почти  не обусловливает  инфекционность. Титр антигена достигает 1:16 и 1:32. Накапливается  в тканях животных со 2-го дня после  заражения и на 3 - 5-е  сутки достигает  максимума; в культуре ткани максимальное накопление его отмечают на 6 - 7-е сутки культивирования. Он быстро разрушается при температуре 60 - 70°С, но титр его снижается медленнее по сравнению с инфекционностью (Сюрин В. П. и др., 1998).}

^{Возбудитель индуцирует образование  вируснейтрализующих, комплементсвязывающих, преципитирующих и антигемагглютинирующих антител. Они появляются на 15-й день после заражения и на ЗО-й день достигают максимума. Вируснейтрализующие антитела сохраняются у переболевших животных пожизненно (Митин Н. И., 1966). Вирус агглютинирует эритроциты человека группы 0, крысы и морской свинки при рН 6,5 - 7,5 и при температуре 4 и 37°С, но не агглютинирует эритроциты овцы, кролика, лошади и собаки. Специфичность агглютинации подтверждается в РЗГА иммунными сыворотками (Дяченко Н. С. И др., 1988; Фомина Н. В., 1995).}

^{Штаммы  возбудителя могут  значительно различаться  по степени вирулентности (Селиванов  А. В., Уласов В. И., 1989). Возбудители инфекционного  гепатита собак (CAV-1) и аденовироза (CAV-2) четко различаются по патогенности. Аденовирус собак типа 2 выделяют из области горла и легких при поражении респираторного тракта и отсутствии признаков инфекционного гепатита. Аденовирус собак типа 1 успешно репродуцируется в культуре клеток почки щенков собак, песцов и лисиц, но не размножается в клетках человеческого, обезьяньего и бычьего происхождения. В зараженной культуре ткани почки собак вирус размножается с характерными цитопатическими изменениями. Они характеризуются появлением отдельных округлившихся, рефрактильных клеток, которые постепенно отторгаются от стекла. По мере развития инфекции число клеток, подвергшихся дегенерации, увеличивается и образуются большие пустоты в монослое. По краям сохранившихся островков пораженные клетки концентрируются, образуя большие конгломераты, напоминающие грозди винограда. В культуре клеток через 20 - 30 часов после заражения образуются характерные внутриядерные включения, которые хорошо обнаруживаются при окраске препаратов или методом иммунофлюоресценции. Число их увеличивается и достигает максимума через 36-40 часов, когда развиваются четко выраженные цитопатические изменения (Чижов В. А.. 1978; Лярски, 1980; Фомина Н. В., 1995).}

^{Возбудитель инфекционного гепатита собак устойчив к  физико-химическим факторам. При выделении  из секретов, органов  и тканей больных животных он сохраняет активность в течение нескольких месяцев (Сонин П. Ф., 1966; Rubarth, 1947; Cabasso, 1962).}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Эпизоотологические  данные}

 

_И

^{нфекционный гепатит собак - широко распространенная болезнь  и встречается  почти во всех странах.}

^{В естественных условиях к болезни восприимчивы собаки всех возрастов  и пород. Наибольшей восприимчивостью обладают щенки 1,5-6 месяцев, у  которых болезнь  протекает обычно остро или сверхостро и часто заканчивается  гибелью, и молодые  животные до 2-летнего возраста. В первые 3-6 месяцев жизни летальность составляет 10 - 20% (Чижов В. А., Ананьев В.А., 1973; Larin, 1958). Взрослые собаки старше 3 лет заболевают редко. Однако среди таких животных вирусный гепатит также довольно широко распространен; болезнь у них протекает преимущественно хронически или латентно (Щербатых П. Я., Сонин П. Ф., Сахаров С. Ф., 1975; Селиванов А. В., Уласов В. И., 1988). Инфекционный гепатит поражает более часто животных крупных пород (немецкая овчарка, дог, ротвейлер). Болезнь регистрируется также среди лисиц, песцов, волков, енотов и хорьков. У некоторых животных, связанных с собаками и лисицами, таких как шакал, древесный волк, койот, медведь наблюдается естественная инфекция, вызванная CAV-1. Мыши, обезьяны некоторых видов и человек могут быть скрытыми носителями вируса инфекционного гепатита собак (Митин Н. И., 1966).}

^{Экспериментальный инфекционный гепатит  воспроизводится  у морских свинок, кроликов и хомяков. Обычно наблюдается  легкое переболевание, но в ряде случаев  животные погибали. Описаны случаи летальной пневмонии у зараженных морских свинок. При гистологическом исследовании в эпителии бронхов были обнаружены базофильные тельца-включения (Сюрин В. Н. и др., 1998).}

^{Источником  возбудителя инфекции являются больные  животные, реконвалесценты и вирусоносители, которые выделяют вирус с носовой слизью, слюной, конъюнктивальным секретом, мочой и фекалиями. Заражение происходит через слизистые оболочки носовой и ротовой полостей, пищеварительного канала и половых органов. Здоровые собаки заражаются как при непосредственном контакте с больными, так и посредством эктопаразитов (вшей, блох). Установлены случаи распространения болезни при несоблюдении правил асептики во время хирургических операций, инъекций, диагностических исследований. Резервуаром вируса служат дикие звери и бродячие собаки (ЧижовВ. А., 1973; Larin, 1958; Cabasso, 1962).}

^{По  данным Н. И. Архипова и др. (1984) вирус  может передаваться внутриутробно и  через молоко.}

^{Инфекционный  гепатит собак  обычно проявляется  в виде спорадических случаев или эпизоотических вспышек. В свежих эпизоотических очагах болезнь иногда охватывает до 75% поголовья и сопровождается высокой летальностью (35% и более). Эпизоотии инфекционного гепатита собак носят сезонный характер, чаще наблюдаются весной и летом при появлении молодняка. Спорадически болезнь встречается в любое время года, что связано, в основном, с обострением латентного или хронического течения болезни под влиянием каких - либо неблагоприятных условий (Сюрин В. Н. и др., 1998; Ниманд, Сутер,1998).}

^{Проводимая  вакцинация значительно  сокращает количество случаев заболевания. Если вакцинация не проводится, то обычно большинство собак  местной популяции  контактирует с возбудителем в первые 2 года жизни  и переносит инфекцию в скрытой или  легкой форме с развитием фарингита и тонзиллита (Кудряшов А. А., 1999).}

^{При возникновении инфекционного  гепатита в собаководческих  питомниках в течение  эпизоотии наблюдается  определенная последовательность. В начале развития эпизоотии отмечают единичные случаи остропротекающей болезни. В дальнейшем, при отсутствии необходимых ветеринарно-санитарных мероприятий, инфекция распространяется, захватывая в первые 2-3 недели значительное количество животных и постепенно затухая к концу 2 - 3-го месяца. Такая динамика не является строго постоянной и зависит от эпизоотической обстановки, степени первичного охвата поголовья и длительности течения эпизоотии (Чижов В. А., 1978). Заболеваемость и летальность значительно колеблются и зависят от состояния сопротивляемости организма и условий содержания животных. Способствующими заболеванию факторами являются переохлаждение, перегревание и неполноценное кормление животных, а также секундарные инфекции (колибактериоз, сальмонеллез, чума плотоядных), гельминтозы и другие неблагоприятные воздействия. Эти факторы активизируют латентную форму инфекционного гепатита, приводя к клиническому проявлению болезни (Черкасский Е. С, 1971; Белов А. Д. и др., 1995). Характерной эпизоотологической особенностью инфекционного гепатита собак является длительное вирусоносительство. Выделение вируса у реконвалесцентов и вирусоносителей происходит на протяжении нескольких недель, месяцев и даже лет (Шубладзе А.К., Ананьев В.А., 1959; Сюрин В.Н. и др., 1998).}

^{По  данным В. А. Чижова (1978) вирусоносительство, продолжающееся у собак в течение ряда лет, подтверждается неоднократными случаями заноса инфекции в благополучные хозяйства при закупке племенных самцов и самок, в число которых попали хронически больные животные. Phillips (1989) указывает, что суки-вирусоносители могут в течение ряда лет заражать своих щенков, а также кобелей-производителей. В случаях заражения щенков переболевшими матерями нередко гибнет весь помет в первые 10-14 дней жизни (Щербатых П. Я., Сонин П. Ф., Сахаров С. Ф., 1975).}

 

 

^{Заражение}

 

_И

^{сточником возбудителя инфекции являются больные собаки и вирусоносители, выделяющие вирус с носовой и глазной слизью, мочой, калом. Для данной болезни характерно длительное вирусоносительство, часто в течение многих лет. Бродячие собаки и дикие плотоядные животные являются основным резервуаром инфекции.}

^{Для данной болезни наиболее типичны 2 пути заражения:}

^{- контактный}

^{- алиментарный (кормовой, водный).}

^{Инкубационный период составляет обычно 2—5 дней.}

^{В моем случае заражение  произошло в результате контакта с животным, которое являлось источником возбудителя болезни.}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Патогенез}

 

_П

^{атогенез  вирусного гепатита плотоядных окончательно не выяснен. Основной путь заражения алиментарный. Попадая в кишечник вирус, размножается в клетках эпителия слизистой оболочки, затем попадает в лимфатический аппарат кишечника регионарные лимфатические узлы, откуда с кровью разносится по всему организму, вызывая вирусемию. Она обуславливает изменения эндотелия сосудов микроциркуляторного русла различных органов и особенно печени, почек, костного мозга. Размножаясь в клетках, вирус вызывает их дистрофию, некроз и образование внутриядерных телец- включений Рубарта.}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Симптомы}

 

_И

^{нфекционный гепатит собак  может протекать в различных формах: сверх острой (молниеносной), острой, подострой и хронической, но наиболее часто болезнь проявляется в острой форме. Сверхострая и острая формы болезни проявляются в основном у молодых животных с ослабленной иммунной системой (первичные и вторичные иммунодефициты), особенно у не вакцинированных щенят в возрасте до 6 месяцев. При молниеносной форме болезнь развивается внезапно, стремительно, без характерных клинических признаков, и животные погибают в течение одних суток (в таких случаях нередко предполагают острое отравление).}

^{При острой форме болезни  у животных наблюдают  угнетенное состояние, отказ от корма, гипертермию  до 40-41°С, при этом температурная кривая может иметь две  вершины. Наиболее характерными клиническими признаками инфекционного гепатита являются: усиленная жажда, частая рвота с примесью желчи, острый гастроэнтерит, диарея (понос), кал беловатого цвета, желтушность слизистых оболочек, а также одно- или двусторонние кератиты (помутнение роговицы глаза) и острые вирусные тонзиллиты (воспаление небных миндалин). Последние при пальпации увеличены, болезненны и отечны. Кератиты наблюдаются примерно у 30% больных собак, они часто протекают без явных признаков гнойного конъюнктивита (в отличие от чумы плотоядных); белесые, голубоватые помутнения роговицы глаз - так называемый "голубой глаз" при благополучном течении болезни постепенно исчезают. Важным клиническим признаком инфекционного гепатита является выраженная болезненность печени при пальпации в области мечевидного отростка (непосредственно позади диафрагмы). Ввиду болезненности печени собаки часто сидят, широко расставив передние лапы.}

^{Кроме того, у больных  животных отмечают серьезные  расстройства сердечно-сосудистой и дыхательной  системы организма. Пульс, как правило, учащенный, свыше 100 ударов в минуту, нередко аритмичный; дыхание тяжелое, учащенное, свыше 40 в минуту - для крупных пород собак, у средних и мелких пород эти показатели соответственно выше. При тяжелом течении болезни могут наблюдаться судорожные движения, параличи конечностей и другие симптомы поражения центральной нервной системы. Продолжительность болезни при острой форме зависит от многих факторов: состояния иммунной системы, возраста, наличия смешанных инфекций, своевременности и эффективности лечения и др. Обычно при благополучном течении болезни примерно 40-50% собак выздоравливают через 5-10 дней. В других случаях (состояния иммунодефицита, смешанные инфекции) продолжительность болезни может составлять 2-3 недели. При под остром и хроническом течении болезни указанные выше симптомы в основном менее выражены, имеют большую продолжительность и характеризуются неспецифическими, неопределенными расстройствами различных систем организма животных. Например, у больных собак наблюдают кратковременное повышение температуры тела, снижение аппетита, быструю утомляемость при физических нагрузках, временные расстройства функций сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта (поносы, сменяющиеся запорами, и т.п.) и др.  Хронически больные беременные самки (суки) наиболее часто абортируют или рожают мертвых и (или) нежизнеспособных щенят.}

^{Гематологические  показатели при острой и подострой формах инфекционного гепатита собак имеют характерные  изменения. В начальной  стадии болезни, как  правило, наблюдают  резко выраженную лейкопению (2-3 тыс. лейкоцитов), относительное увеличение процента нейтрофилов, исчезновение эозинофилов и сдвиг лейкоцитарной формулы влево до юных форм, снижение процента лимфоцитов до 7-15, моноцитоз. В острый период болезни резко повышается СОЭ до 30 мм, иногда до 69-70 мм. В дальнейшем, примерно на 7-9-е сутки, количество лейкоцитов значительно увеличивается и может составлять 30-35 тыс., нормализуется количество эозинофилов - все это свидетельствует о выздоровлении животного (В.А. Чижов, 1978, Н.А. Масимов, А.И. Белых, 1996 г, и др.). Инфекционный гепатит собак может протекать в различных формах: сверхострой (молниеносной), острой, подострой и хронической.}

^{В начале заболевания  животное поступило  со следующими клиническими признаками: угнетенное состояние, температура тела 39,9°С, рвота с примесью желчи, жидкий стул, ахоличный кал, слабая иктеричность видимых слизистых покровов, заглоточные лимфатические узлы увеличены и болезненны при пальпации.}

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

^{Диагноз}

 

_Д

^{ля  установления (подтверждения) точного диагноза при подозрении на острое инфекционное заболевание необходимо срочно исследовать кровь больного животного для индикации (обнаружения) и идентификации (определение видовой и родовой принадлежности) возбудителя болезни. Окончательный диагноз ставят на основании анализа эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований (выделение возбудителя инфекционного гепатита собак и выявление характерных телец - включений Рубарта). Для лабораторной диагностики используют различные реакции: РДП, РГА, РИФ, РН и др. При дифференциальной диагностике инфекционный гепатит необходимо дифференцировать от чумы, лептоспироза, парво- и коронавирусного энтерита, сальмонеллеза и отравления.}

^{Инфекционный гепатит диагностируют на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных, а также вирусологических исследований и биопробы.}

^{В качестве исследуемого материала  у больных собак  в период острого  течения болезни  берут сыворотку  крови, а у павших животных - асцитную жидкость или печень. Суспензию из печени готовят общепринятым методом и заражают чувствительных животных или культуру ткани, приготовленную из почек щенков собак. Экспериментально гепатит можно воспроизвести у собак, лисиц и песцов, использовав для этой цели животных 4-6-месячного возраста, предварительно проверенных на инфекционный гепатит. Болезнь воспроизводится закономерно и в типичной форме при заражении в переднюю камеру глаза или в вену. У зараженных животных симптомы болезни проявляются на 6- 7-й день.}

^{В зараженной культуре ткани почек собак  вирус размножается с характерными цитопатическими  изменениями: появлением отдельных округлившихся  рефрактильных клеток, которые постепенно отторгаются от стекла. По мере развития инфекции число клеток, подвергшихся дегенерации, увеличивается, и образуются большие пустоты в монослое. По краям сохранившихся островков пораженные клетки концентрируются, образуя большие конгломераты, напоминающие грозди винограда. Специфичность цитопатических изменений подтверждается в реакции нейтрализации. В культуре клеток после заражения через 20-30 ч образуются характерные внутриядерные включения, которые хорошо обнаруживаются при окраске препаратов или методом флюоресцирующих антител. Реакция преципитации в геле}

^{Для диагностики инфекционного  гепатита широко используют реакцию преципитации в агаровом геле. Простота постановки реакции, ее высокая чувствительность и строгая специфичность позволяют поставить диагноз в течение 24-48 ч, а также установить антигенное родство различных штаммов. Реакция может быть применена для лабораторной диагностики в случаях остропротекающего заболевания, поскольку преципитирующий антиген обнаруживается у больных животных на 2-3-й день после заражения в различных органах и тканях, а также для выявления перенесенного ранее процесса, так как антитела у переболевших собак могут сохраняться несколько лет.}

^{Для постановки реакции  преципитации требуются  следующие компоненты: тестирующая система, состоящая из антигена вируса инфекционного  гепатита собак, специфической  гипериммунной сыворотки  против вирусного  гепатита, контрольного положительного антигена, контрольного отрицательного антигена.}

^{Механизм  реакции в геле заключается в  следующем: находящиеся  раздельно в геле антигены и антитела диффундируют друг к  другу, и на месте  их соприкосновения (встречи) образуется полоска  преципитата, что указывает на положительный результат.}

^{В качестве испытуемого  антигена используют 10%-ную  суспензию печени больных животных. Специфическую гипериммунную  сыворотку получают путем иммунизации  собак или используют иммунную сыворотку  реконвалесцентов. Реакция проходит при температуре 37°С в течение 48-72 ч. Сыворотку в лунки агара добавляют дробно, через каждые 12 ч. Реакция считается положительной, если между испытуемым антигеном и гипериммунной сывороткой в агаре появляется полоска молочного цвета, по интенсивности выявления равная заведомо известному антигену и гипериммунной контрольной сыворотке. Между нормальной сывороткой и антигеном полосок не должно быть.}

^{Нечетко выраженные (расплывчатые) полоски преципитата  расцениваются как  сомнительная реакция, а образование зон вокруг лунок является неспецифической реакцией.}

^{Иммунолюминесценция - этим методом, применяя непрямой метод люминесцирующих антител, можно выявить специфический антиген в срезах, мазках, отпечатках, в зараженной культуре ткани. С этой целью на фиксированный в охлажденном до 20°С ацетоне препарат наносят специфическую антисыворотку собаки либо гипериммунную сыворотку лошади в пяти разведениях от 1:10 до 1:160 и выдерживают во влажной камере при 20°С в течение 20 мин, далее дважды по 10 мин промывают физиологическим раствором и просушивают. При положительной люминесценции в зоне ядра видны светящиеся глыбки антигена в первые 24-48 ч. С развитием внутриядерных включений наблюдают флюоресцирующее свечение антигенных комплексов. Интенсивность свечения оценивается по четырехкрестовой системе. Специфическое изумрудно-зеленое свечение обычно отчетливо контрастирует на фоне слабой флюоресценции цитоплазмы клеток. Флюоресцирующие гранулы обычно концентрируются в крупные гранулярные образования, которые в дальнейшем можно видеть как однородную флюоресцирующую массу. Чаще всего флюоресцирующая масса концентрируется в центре ядра, отделяясь от ядерной оболочки нефлюоресцирующим ободком.}

^{Широко  в лабораторно-диагностической  работе при диагностике инфекционного гепатита собак применяется метод неспецифической флюоресценции. С этой целью на нативный препарат под покровное стекло наносят каплю акридина оранжевого. Препарат немедленно просматривают. Внутриядерные включения окрашиваются на фоне зелено-желтых ядер и оранжево-красной протоплазмы.}