Ирина Эланс

Автор который поможет с любыми образовательными и учебными заданиями

Молекулярно-генетическая экспертиза

ВВЕДЕНИЕ

Целью использования новых методов в судебно-медицинской экспертизе вещественных доказательств является повышение идентификационных возможностей. Значительная перспектива в этом направлении появилась, прежде всего, за счет использования достижений молекулярной генетики.

ПОНЯТИЕ, ОБЪЕКТ, ПРЕДМЕТ, ЗАДАЧИ МОЛЕКУЛЯРНО ГЕНЕТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Медицинская молекулярно-генетическая экспертиза вещественных доказательств исследует объекты биологического происхождения. Экспертные исследования проводятся в специализированных экспертных учреждениях.

Объектами молекулярно-генетического исследования являются:

кровь человека;
вещественные доказательства с пятнами крови, спермы;
костные останки.

Непосредственным объектом экспертного исследования является дезоксирибонуклеиновая кислота (далее - ДНК), выделенная из клеток организма человека (крови, спермы, костей)

Иными объектами молекулярно-генетического исследования могут быть:

контрольные образцы крови, изъятые у заведомо известных лиц;
материалы уголовного дела, относящиеся к предмету экспертизы: протоколы осмотра места происшествия, протоколы изъятия вещественных доказательств и контрольных образцов; заключение судебно-медицинского исследования трупа, освидетельствования живого лица; заключение судебно-медицинской биологической экспертизы.

Задачами данного вида экспертного исследования являются определение генотипа человека (идентификация личности), установление кровного родства (материнства, отцовства).

В зависимости от задач на разрешение судебной молекулярно-генетической экспертизы могут быть поставлены следующие вопросы:

кому из перечисленных лиц принадлежит кровь (сперма), обнаруженная на вещественных доказательствах;
принадлежат ли останки трупа конкретному лицу;
принадлежат ли части человеческого тела одному трупу или нескольким; является ли гражданин N. биологическим отцом ребенка Д.

Вещественные доказательства со следами биологического происхождения (кровь, сперма) изымаются на месте происшествия, упаковываются и транспортируются в соответствии с требованиями, предъявляемыми к вещественным доказательствам, направляемым на судебно-медицинское исследование. Ввиду того, что ДНК сильно подвержена разрушающему действию ферментов, чувствительна к факторам окружающей среды (температура, влажность), наличию бактерий и загрязнениям чужеродной ДНК, к обращению с вещественными доказательствами, по которым возможно будет назначаться молекулярно-генетическая экспертиза, должно быть уделено повышенное внимание.

Предметом судебно-медицинской молекулярно-генетической экспертизы являются следы и иные вещественные доказательства по делу (объекты биологического происхождения от живых лиц и трупов), а также образцы для разрешения вопроса спорного происхождения детей.

На исследование предоставляется следующий материал:

образцы крови проходящих по делу лиц (обязательно предоставление крови пострадавшего и всех подозреваемых), в жидком виде или высушенные на марле. Хранить и транспортировать образцы жидкой крови с добавленными консервантами необходимо при температуре от 0 до +5о С не более 5 суток с момента забора (для транспортировки пробирок можно использовать термос со льдом). Объем жидкой крови должен составлять не менее 5 мл;
вещественные доказательства должны быть с пятнами крови размером не менее 1х1 см, пропитывающими ткань;
вместе с постановлением о назначении экспертизы необходимо предоставить: копию протокола осмотра места происшествия; копию заключения судебно-медицинского исследования трупа, освидетельствования живого лица; копию заключения судебно-медицинского биологического исследования; копии протоколов изъятия образцов.

По делам, связанным с половыми преступлениями, убийствами, нанесением тяжких телесных повреждений, для проведения молекулярно-генетической идентификационной экспертизы в работу принимается материал после проведения судебно-медицинского биологического исследования. Судебно-медицинской экспертизой решаются вопросы о наличии и природе пятен биологического происхождения (кровь, сперма) на представленных вещественных доказательствах, их видовой (человек или животное) и групповой принадлежности.

В случае идентификационной экспертизы неопознанных и расчлененных трупов (гнилостно измененных) направляют только образцы костей в измельченном виде весом не менее 3 гр. Поэтому, чтобы избежать эксгумации, возможность молекулярно-генетического исследования должна быть предусмотрена заранее. Образцы костных тканей после медико-криминалистического исследования не пригодны для ДНК-анализа из-за глубоких деструктивных изменений в результате вываривания. Идентификационная экспертиза проводится при наличии живых предполагаемых родителей.

ПРАВИЛА ИЗЪЯТИЯ, ОСМОТРА, УПАКОВКИ МАТЕРИАЛА

Во избежание загрязнения вещественных доказательств, которые могут содержать ДНК, и разрушения ДНК при их изъятии, осмотре, упаковке необходимо соблюдать следующие правила:

1) все процедуры при осмотре, изъятии, упаковке вещественных доказательств, предположительно содержащих ДНК, следует проводить в перчатках, по возможности при осмотре разных объектов их менять;

2) использовать только чистые инструменты или перед работой с новыми объектами каждый раз тщательно их промывать и стерилизовать спиртом;

3) не прикасаться руками к местам, где возможно содержится ДНК;

4) при работе с вещественными доказательствами избегать разговоров, чиханья, кашлянья над объектами;

5) при отборе и упаковке образцов не трогать части своего тела (лицо, нос, рот);

6) вещественные доказательства, находящиеся во влажном состоянии перед упаковкой необходимо как можно быстрее высушить в чистом помещении при комнатной температуре, избегая попадания прямых солнечных лучей и близости отопительных приборов;

7) отобранные вещественные доказательства необходимо упаковать в чистые новые (не бывшие ранее в употреблении) бумажные конверты. Заклеить, нанести соответствующие маркировочные данные согласно требованиям, предъявляемым к упаковке вещественных доказательств.

По делам, связанным с установлением спорного отцовства, материнства и подмены детей, предъявляются следующие требования:

1) Забор крови должен производиться у предполагаемого отца, матери и ребенка одновременно, в специализированном медицинском учреждении с обязательным составлением протокола забора крови. В случае невозможности предоставления в молекулярно-генетическую лабораторию жидких образцов крови возможна пересылка по почте высушенных на марлевых тампонах образцов крови.

2) Все образцы должны быть упакованы в пакеты, содержащие полные реквизиты: иметь четкую маркировку, определяющую содержимое пакетов, фамилию и подпись лица, производившего забор и упаковку образцов, подписи матери и предполагаемого отца ребенка, опечатаны оттисками печати медицинского учреждения.

3) Изымать образцы крови необходимо на стерильную марлю в 5 слоев. Пятно крови диаметром не менее 3 см должно пропитывать все слои марли.

4) Сушить образцы крови необходимо при комнатной температуре в сухом помещении вдали от солнца и источников тепла. Хранить желательно в холодильнике.

5) Пересылать в адрес молекулярно-генетической лаборатории не позднее 7 суток с момента забора вместе с протоколом изъятия (где, кем и у кого изымались образцы крови).

6) В случае направления жидкой крови для исследования необходимо забирать 5 мл с добавлением 1 мл цитратного антикоагулянта.

7) Хранить и транспортировать образцы жидкой крови с добавленными консервантами необходимо при температуре от 0 до +5о С не более 5 суток с момента забора (для транспортировки пробирок можно использовать термос со льдом).

По возможности вещественные доказательства, на которых предполагается наличие следов биологического происхождения, изымаются целиком. В тех случаях, когда изъять предмет целиком не представляется возможным (например, вследствие его больших размеров), следы изымают вместе с частью их носителя. Допустимо делать соскобы, однако категорически запрещается смывать следы на марлевые или ватные тампоны, смоченные водой или изотоническим раствором хлорида натрия (физиологическим раствором). Следы биологического происхождения, располагающиеся на почве, изымают вместе с ней. Со снега биологические следы изымают на марлевые тампоны, которые затем высушивают.

Упакованное вещественное доказательство биологического происхождения опечатывается, на поверхности упаковки делают поясняющую надпись: указывают наименование вещественного доказательства, дату и место его изъятия. Эти сведения заверяют подписями следователя, специалиста, проводившего изъятие, понятых

ЭКСПЕРТНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПО ПОВОДУ ПРОИСХОЖДЕНИЯ ДЕТЕЙ

Молекулярно-генетическое экспертное исследование по поводу спорного происхождения детей отвечает на вопросы:

- исключается или не исключается отцовство, материнство данного индивидуума

отношении данного ребенка (плода);

- если отцовство, материнство не исключается, то какова вероятность того, что полученный результат не является следствием случайного совпадения индивидуализирующих признаков неродственных лиц.

В стандартных экспертных исследованиях изучают образцы жидкой или высушенной крови обследуемых лиц. При необходимости вместо образцов крови анализу могут подвергаться и другие объекты: слюна, мазки (соскобы) со слизистой оболочки ротовой полости, абортивный материал, объекты от трупов родителей и ребенка, отдельные кости и их фрагменты, мягкие ткани и др.

Допускается проведение сравнительного анализа объектов, используя препараты ДНК, которые были выделены из биологических образцов разного тканевого происхождения.

Идентификационный тест, направленный на разрешение случаев оспариваемого отцовства, материнства, предусматривает сравнительный анализ на основе закономерностей наследования индивидуальных аллельных состояний (генотипов) ребенка, матери и предполагаемого отца. В случае оспариваемого отцовства, материнства (при условии бесспорной истинности другого родителя) присутствие у ребенка аллелей, не свойственных ни одному из родителей, служит основанием для исключения указанного родства. В свою очередь, полное комплементарное соответствие геномного профиля ребенка таковым предполагаемых родителей означает неисключение предполагаемого родства.

Для обоснованного вывода о безусловном исключении отцовства, материнства аллели ребенка, не свойственные ни одному из указанных родителей, должны быть зарегистрированы, как минимум, в двух несцепленных локусах.

Совпадение условно отцовских (нематеринских) аллелей в генотипе ребенка с аллелями, присутствующими в геноме предполагаемого отца, не означает доказанного отцовства. Вероятностная оценка неисключенного родства строго обязательна. Искомое условное значение вероятности отцовства соответствует байесовой постериорной вероятности при 50%-ной априорной вероятности отцовства.

Уровень доказательности экспертного исследования в случае неисключения отцовства, материнства должен составлять следующие значения.

Для полного трио (мать - ребенок - предполагаемый отец) при условии, что истинность другого родителя считается бесспорной:

- не ниже 99,90% (расчитываемый как Байесова вероятность отцовства/материнства);

- не ниже 1000 (расчитываемый как индекс отцовства PI).

Для дуэта (ребенок - предполагаемый отец) в отсутствие другого родителя:
- не ниже 99,75% (расчитываемый как Байесова вероятность отцовства/материнства);
- не ниже 400 (расчитываемый как индекс отцовства PI).

При количественном анализе результата для расчета вероятности отцовства (материнства) следует учитывать этническую принадлежность обследуемых лиц.

В лаборатории должны быть выделены территориально-автономные операционные зоны, каждая из которых предназначена для выполнения строго определенного круга операций. Каждая зона должна быть укомплектована спецодеждой, лабораторным и офисным оборудованием, лабораторной посудой, которые предназначены для использования только в границах данной зоны. Таких зон должно быть минимум три:

- лабораторная зона общего назначения: помещения для хранения и подготовки вещественных доказательств, забора крови, выделений и очистки ДНК, мойки и стерилизации посуды; к этой же зоне относятся кабинеты экспертов, комнаты для лаборантов и санитаров, компьютерный зал для обработки данных и оформления документов, аппаратные;

- чистая зона полимеразной цепной реакции (ПЦР): стерильные, оборудованные УФ-облучателями боксированные помещения с приточно-нагнетательной вентиляцией - для приготовления реагентов, компонентов реакционных смесей, для пробоподготовки и постановки ПЦР;

- зона для анализа продуктов амплификации: оборудованные УФ-облучателями и моечной арматурой боксированные помещения с вытяжной вентиляцией - для проведения электрофореза ДНК, окрашивания гелей и документирования электрофореграмм.

При использовании технологии типирования полиморфизма нуклеотидных последовательностей митохондральной ДНК третья зона должна иметь выделенный компартмент или отдельную зону для постановки секвенирующих реакций, очистки продуктов данных реакций и пробоподготовки для секвенирующего электрофореза.

На первом этапе осуществляют выделение из исследуемых объектов геномной ДНК, ее очистку, определение концентрации и хранение. Для этого необходимо иметь стандартное лабораторное оборудование для молекулярной биологии (постановка полимеразной цепной реакции требует наличия специального стерильного шкафа-бокса с ультрафиолетовым облучателем).

Анализ результатов исследования требует наличия компьютерной системы видеодокументирования и обработки экспертных данных.

Базовыми технологиями геномного идентификационного анализа, применяемыми в судебно-медицинской экспертной практике, являются:

- анализ полиморфизма длины амплифицированных фрагментов (ПДАФ) ДНК;

- анализ полиморфизма нуклеотидных последовательностей ДНК.

Для выполнения молекулярно-генетических экспертных исследований, обработки и интерпретации получаемых данных, в ходе проведения экспертных исследований допускается использование тест-систем, расчетных алгоритмов и методик анализа, прошедших апробацию и рекомендованных к применению.

Для получения препаратов ДНК при проведении судебно-медицинского экспертного исследования следов, содержащих сперму, для разделения присутствующих в смеси генетического материала мужчины - донора спермы и ДНК из других возможных источников (например, эпителиальных клеток и клеток крови потерпевших при изнасиловании) следует применять такие методики, которые включают поэтапный дифференциальный лизис клеток.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ЭКСПЕРТИЗА ДНК

Молекулярно-генетическая экспертиза ДНК – достаточно новый, но очень перспективный вид экспертной деятельности. Соответственно, весьма перспективным является обучение по направлению «молекулярно-генетическая экспертиза ДНК».

Высшая школа судебных экспертиз готовит судебных экспертов по этому направлению, а также многим другим. В каких случаях требуется осуществление молекулярно-генетической экспертизы ДНК?

Зачастую это дела об установлении отцовства и других степеней родства. Еще одно важное направление - половые и другие насильственные преступления. По уголовным и гражданским делам такого рода молекулярно-генетическая экспертиза ДНК бывает просто незаменима!

Молекулярно-генетическая экспертиза ДНК строится на сравнении фрагментов ДНК предполагаемых родственников. Надо помнить, что выводы такой экспертизы никогда не делаются со 100%-ной вероятностью – максимум может быть 99,999% вероятности – это указывают в экспертном заключении эксперты-биологи. Но в таком случае отцовство и другое родство считается практически доказанным.

На точность исследования ДНК влияет количество анализируемых генетических локусов, поэтому эксперты стремятся проанализировать большое количество таких локусов. В этом случае процент вероятности выводов повышается.

Для проведения молекулярно-генетической экспертизы ДНК эксперты отбирают биологический материал, как правило, клетки эпителия со внутренней поверхности щеки. Этот способ считается наиболее легким и безболезненным. Судебная экспертиза отцовства проводится с составлением необходимых протоколов по поводу забора образцов для исследования.

Также молекулярно-генетическая экспертиза ДНК помогает выявить предрасположенность к различным заболеваниям. Проводя соответствующие исследования, эксперт-биолог определяет, насколько велик риск возникновения того или иного заболевания у подэкспертного лица.

Среди таких заболеваний - инфаркт миокарда, бронхолегочные заболевания, гипертония, тромбоз, заболевания желудочно-кишечного тракта и т.д. Очень важно проведение молекулярно-генетической экспертизы ДНК для определения предрасположенности к сахарному диабету, заболеваниям щитовидной железы.

Также такая экспертиза проводится для выявления инфекционных возбудителей. Экспертиза ДНК позволяет обнаружить таких возбудителей на ранних стадиях. Таким образом, молекулярно-генетическая экспертиза ДНК стоит на страже здоровья граждан.

Популярное направление – создание генетического паспорта личности. И здесь на помощь придут эксперты-биологи, которые проведут экспертизу ДНК. Генетический паспорт личности позволяет сберечь здоровье и избежать многих проблем. Как видим, молекулярно-генетическая экспертиза ДНК проводится в самых разнообразных случаях.

Также эксперты анализируют вещественные доказательства, найденные на месте преступления. Молекулярно-генетическая экспертиза ДНК позволяет с высокой точностью установить виновных в тяжких преступления против личности, в том числе, убийствах.

ПРОБЛЕМЫ И ПЕРСПЕКТИВЫ МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИХ СУДЕБНО-ЭКСПЕРТНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

В нашей стране, в отличие от зарубежного опыта, с самого начала отсутствовала целевая государственная программа внедрения молекулярно-генетических технологий в судебно-медицинскую экспертную практику. Вместо этого, поскольку значимость указанных технологий стала очевидна, их проникновение в новую сферу приложения начало осуществляться в инициативном порядке. На фоне ограниченного финансирования учреждений судебно-медицинской экспертизы это спровоцировало неблагоприятное развитие ситуации. К настоящему времени имеется множество примеров, когда самодеятельность в области молекулярно-генетических экспертиз оказалась весьма вредной по результатам. Совершенно ясно, что стихийный подход к организации и функционированию генетических лабораторий недопустим. Это должен быть управляемый процесс, подкрепленный наличием адекватной системы подготовки кадров и профессионального контроля. Для того чтобы использование молекулярно-генетических методов в судебной медицине действительно отвечало потребностям экспертной практики, его необходимо осуществлять на основании системного подхода. И первым элементом системы должен стать Российский центр судебно-медицинской экспертизы (РЦСМЭ) как головной и контролирующий орган в системе учреждений здравоохранения, осуществляющих судебно-экспертную медицинскую деятельность в РФ. Настоятельно необходимо укрепление материально-технической базы РЦСМЭ, чтобы его деятельность могла стать основой для осуществляемых в системе Росздрава эффективного мониторинга судебно-экспертных молекулярно-генетических исследований, а также подготовки квалифицированных экспертных кадров.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, объектами молекулярно-генетической экспертизы являются: кровь человека, вещественные доказательства с пятнами крови и спермы, костные останки. Непосредственным объектом изучения является дезоксирибонуклеиновая кислота.

Я считаю, что данный вид экспертизы очень важен. Во-первых, при помощи него можно определить материнство либо отцовство. И, во-вторых, что, на мой взгляд, самое важное, данное исследование просто незаменимо в расследовании половых и других насильственных преступлений.

Но, к сожалению, в нашей стране, молекулярно-генетическое исследование не на высоком уровне. Причиной этому, по моему мнению, является отсутствие должного финансирования со стороны государства и отсутствие квалифицированных профессиональных кадров.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Федеральный закон от 31 мая 2001 г. № 73-ФЗ "О государственной судебно-экспертной деятельности в Российской Федерации".
Методические указания Минздрава РФ № 4/2001 от 26.01.2001 "Применение молекулярно-генетической индивидуализирующей системы на основе полиморфизма нуклеотидных последовательностей митохондриальной ДНК в судебно-медицинской экспертизе идентификации личности и установления биологического родства". — М.,.
Исаенко М. В. // Суд.-мед. эксперт. — 2000. — № 6.

4. Иванов П. Л., Шилов И. А., Карягина А. С. // Перспективы развития и совершенствования судебно-медицинской науки и практики: Материалы 6-го Всероссийского съезда судебных медиков 2001

5. П. Л. Иванов ФГУ "Российский центр судебно-медицинской экспертизы Росздрава", Институт молекулярной биологии им. В. А. Энгельгардта РАН, Москва

6. Иванов П. Л., Туракулов Р. И., Земскова Е. Ю., Ефремов И. А. II Суд.-мед. эксперт. - 2005. - № 2.

7. Ефремов И. А., Чистяков Д. А., Носиков В. В. и др. // Суд.-мед. эксперт. — 2001. - Т. 44. - № 1.

Молекулярно-генетическая экспертиза 📙 Реферат → 🆔 155285