Гель-проникающая хроматография (гель-хроматография). Принцип разделения компонентов смеси при гель-хроматографии. Структура и свойства носителей- сефадексов. (Решение → 29546)

Заказ №38763

Гель-проникающая хроматография (гель-хроматография). Принцип разделения компонентов смеси при гель-хроматографии. Структура и свойства носителей- сефадексов. Техника проведения процесса. Кривая выхода при гель-хроматографии и ее анализ.

Ответ:

Гель-фильтрация или эксклюзионная хроматография (ситовая, гельпроникающая, гель-фильтрационная хроматография) — разновидность хроматографии, в ходе которой молекулы веществ разделяются по размеру за счёт их разной способности проникать в поры неподвижной фазы. При этом первыми выходят из колонки наиболее крупные молекулы (бо́льшей молекулярной массы), способные проникать в минимальное число пор стационарной фазы. Последними выходят вещества с малыми размерами молекул, свободно проникающие в поры. В отличие от адсорбционной хроматографии, при гель-фильтрации стационарная фаза остается химически инертной и с разделяемыми веществами не взаимодействует. В колонку вносят раствор образца, объём которого является лимитирующим для качества хроматографии. Для аналитических разделений он не должен превышать 0,1 % от CV (общего объёма колонки), а для препаративной очистки он должен быть не выше 8-10 % от CV. Колонка упакована порошком, частицы или гранулы которого имеют поры определенного диаметра. Высокомолекулярные вещества, не входящие в поры, проходят между гранулами, поэтому их объём удержания равен объёму колонки за вычетом объёма стационарной фазы (так называемый, свободный объем). Они элюируются первыми. Молекулы средних размеров помещаются в поры сорбента, но не полностью.