Алеутская болезнь норок. 2

РЕФЕРАТ

По дисциплине: «Общая Вирусология»

На тему: «Алеутская болезнь норок»

Выполнил: студент 3 курса 8 группы

Факультета ветеринарной медицины

Родичев Денис Валерьевич

Проверила: Калмыкова Марина Станиславовна

Москва 2014 

Содержание:

• Введение……………………………………………3
• Этиология…………………………………………..5
• Восприимчивость………………………………….8
• Симптомы и течение…………………………..…10
• Патологоанатомические изменения…………..…12
• Диагностика заболевания………………………...13
• Лечение……………………………………………19
• Профилактика и меры борьбы ………………..…20
• Заключение………………………………..………21
• Список используемой литературы………………22

Введение:

Первое сообщение об алеутской болезни норок было опубликовано американскими исследователями Дж. Хартсафом и И. Горемом в 1956 году, несмотря на то, что они наблюдали эту болезнь еще в 1946 году.

В Северной Америке у норок алеутской мутации сразу же после их выведения. Гибель от этой болезни регистрировали в норководческих хозяйствах не только в Америке, но и в Скандинавских странах. Некоторое время предполагали, что эта болезнь специфична для алеутского гена, но сейчас известно, что болезнь поражает норок с разным окрасом.

Интенсивное разведение норок способствовало распространению инфекции среди этих животных в других странах — Англии, Дании, Канаде, Голландии, Германии, России. В  СССР алеутская болезнь впервые была зарегистрирована и описана в 1965— 1967 годах.

В настоящее время болезнь распространена в США, Канаде, Англии, Польше, Скандинавских странах. На территории России она встречается повсеместно, поражая в отдельных хозяйствах до 70 % поголовья.

Болезнь причиняет значительный экономический ущерб, складывающийся из потерь в результате гибели до 60 % поголовья, снижения плодовитости норок, повышения стерильности самцов, гибели щенков в первые дни жизни, ухудшения качества пушнины, а также затрат на ограничительные и ветеринарно-санитарные мероприятия.

(Мorbus aleutica lutreolarum – лат., Aleutian disease of mink – англ., Aleutenkrankheit der Nerze – нем., Maladie aleoutienne du vison – франц.).  Алеутская болезнь (АБ) норок, вирусный плазмоцитоз, гипергаммаглобулинемия – контагиозная иммунокомплексная болезнь, вызываемая парвовирусом. Характеризуется распространенной пролиферацией плазматических клеток (плазмоцитоз), высоким подъёмом уровня иммуноглобулина (гаммаглобулина), прогрессирующим исхуданием, жаждой, кровотечениями из носовой и ротовой полостей, гломерулонефритом, артериитом, гепатитом, а также резорбцией эмбрионов у самок. Отмечены и случаи менингоэнцефалита. У новорождённых щенков может протекать как острая интерстициальная пневмония с высокой летальностью. Кроме того, возникающая вследствие заражения вирусом АБ иммуносупрессия, способствует развитию и отягощает течение других инфекций, к которым здоровые норки часто бывают даже невосприимчивы.

В зависимости от свежести эпизоотического очага, способа заражения (горизонтальный или вертикальный) и штамма вируса инфекция принимает острое, хроническое или латентное (персистенция) течение.

Спонтанная и экспериментальная АБ по развитию и тяжести не различаются (Jackson M.K. et al., 1998).

Норки фактически являются единственным восприимчивым видом, хотя с большой натяжкой можно говорить о незначительной чувствительности хорьков. Другие виды животных и птицы не заболевают. Невосприимчив и человек, хотя характер гломерулонефрита и изменения ядер, фибриноидное изменение сосудов, лимфоплазмоклеточная реакция у норок имеют определенное сходство с таковыми у человека при системной красной волчанке (Ахназарова В.Д. соавт. , 1977; и др.) и NZB-линии мышей (Henson J. B. et al., 1968)

Этиология:

Этиологическим агентом алеутской болезни у норок является вирус алеутской болезни норок.

Вирус алеутской болезни норок относится к семейству Parvoviridae, подсемейство parvovirinae, род Parvovirus.

Помимо вируса алеутской болезни норок к роду Parvovirus относятся парвовирус собак(CPV), мелкий вирус мышей(MVM), вирус панлейкопении кошек(FPV), вирус энтерита норок(MEV) и др.

Вирионы размером 20-25 нм имеют икосаэдральную форму, состоят из 32 капсомеров. Каждый капсомер состоит из 60 асимметричных белковых субъединиц.

Липидов, углеводов и ферментов в составе вирионов не обнаружено. Молекулярная масса его генома (однонитчатая ДНК) равна 1,2 х 106 дальтон.

Рис.1 Компьютерная модель вируса алеутской болезни норок (Bloom,1999)

 Вирионы АБН стабильны при pH 3,0 - 9,0, прогревании при 56 С в течение часа, устойчивы к жирорастворителям, трипсину, инактивируются ультрафиолетовыми излучением, производными этиленимина, гидроксиламином, а также окисляющими агентами.

Вирус, содержащийся в гомогенате органов, инактивируется 0,3% формалином в течение 48 часов при 370С, но не инактивируется 0,4% формалином за 12 часов при 370С.

В организме норок вирус индуцирует чрезмерно высокую продукцию специфических антител, тем не менее не способных его нейтрализовать, вследствие чего сохраняется пожизненное одновременное присутствие вируса и антител в форме иммунного инфекционного комплекса.

Aнтигенные вариабельность и  родство возбудителя с другими  вирусами не установлено. Штаммы  вируса различаются по вирулентности для норок. Например, штамм Юта-1 (Utah-1), являясь наиболее вирулентным, вызывает тяжелую прогрессирующую болезнь у взрослых и щенков норок всех генотипов, тогда как адаптированный к клеточной культуре штамм ADV-G (кстати, используемый в производстве культурального антигена для серодиагностики АБ) стал почти неинфекционным для взрослых и значительно уменьшил вирулентность для щенков (Bloom M.E. et al.,1994; Oie K.L. et al., 1996). Штамм Pullman (Пульман) вирулентен для норок с геном алеутской окраски аа, тогда как у других пород вызывает вирусоносительство. Штамм П-1, выделенный в Московской области и изученный Слугиным В.С. и Чеботарёвым М.И. (1977), по своим генетическим и биологическим характеристикам очень близок к штамму Utah-1 (нуклеотидная последовательность фрагмента гена VP2 и предсказанная аминокислотная последовательность составили 94,7 и 95,3% соответственно), а по вирулентности, возможно, превосходит его, поскольку подвергался многочисленным пассажам на норках. Так, lg ИД50 7-го пассажа был 4,0 в 1 г селезенки, тогда как 40-го – уже 10,25. Косвенным подтверждением сходства этих штаммов является факт выделения его на ферме после завоза норок из США, хотя результаты ПЦР не позволяют считать их полностью идентичными (Обухов И.Л, 2003). При молекулярно-генетическом типировании 46 изолятов, выделенных от больных норок в трех зверохозяйствах России, были выявлены 2 новых изолята (обозначены как типы R и M), отличающиеся от известных ранее (Обухов И.Л, 2003). Эпизоотологические наблюдения показали, что ликвидация АБ при циркуляции в хозяйстве вируса типа R крайне затруднительна, если вообще возможна (Слугин В.С. и др., 2003). Ранее Рыжова Т.А. с соавт. (2002) также сообщали о выделении двух новых изолятов, отличающихся по нуклеотидным последовательностям от известных штаммов.

О существовании высоко вирулентных штаммов, патогенных для любой породы норок, и низко вирулентных, поражающих лишь норок с геном алеутской окраски, также сообщали Hyllseth B. еt al. (1992). Недавно сконструирован вирус Н534D, который способен вызывать диффузный гепатоцеллюлярный микровезикулярный стеатоз, излишнее накопление внутриклеточного жира, преходящую (продолжительность 30 дней) виремию, четкий антительный ответ, но не способен размножаться в организме норок в той степени, которая обеспечила бы развитие классической АБ (Fox et al., 1999).

С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в Дании идентифицировано (Gottschalk E.et al., 1996) 10 типов вируса АБ (табл.1-1). Некоторые типы были обнаружены только в определённых регионах страны, тогда как на отдельных фермах присутствовало несколько типов. Ранее (Bloom М.Е. et al.,1988; Gottschalk Е. et al.,1991, 1994) среди изолятов вируса в США и Дании выявлено как минимум 5 типов, имеющих до 12% различий последовательностей нуклеотидов ДНК. Предварительные попытки связать тяжесть вспышек на различных фермах с этими различиями в штаммах вируса были безуспешными.

Табл. 1-1. Типы вируса АБ в Дании (по результатам ПЦР)

 Вероятными причинами этого  является присутствие нескольких типов вируса на некоторых фермах, а также наличие вирулентных и невирулентных штаммов внутри одной и той же генетической группы.

В течение 1995-97 гг. Olofsson A. et al. (1999) исследовали 35 изолятов полевого вируса, полученных с 15 ферм Швеции и 3 ферм Финляндии, где АБ проявлялась клинически или обнаруживались серопозитивные по РИЭОФ норки. Была выявлена необычно высокая генетическая вариабильность вируса. При этом идентифицированы три филогенетические подгруппы вируса AБ. На одной ферме в одном случае изоляты вируса от двух животных имели полностью идентичные последовательности, тогда как на других фермах они были очень разными, отличаясь на 16% по нуклеотидной и на 26% по аминокислотной последовательностям. Различие обусловлено скорее всего не вирусной эволюцией, а занесением на ферму двух или более штаммов вируса AБ. С этим выводом согласуются данные, полученные в 1991г. Gottschalсk Е. с соавторами, обнаружившими в одной пробе два разных штамма. Таким образом, несмотря на выявленные различия, на сегодня оказалось невозможным соотнести тип или подтип вирусной ДНК с вирулентностью изолята, хотя можно предполагать, что тип 5 более агрессивен, чем другие. Логичнее всего считать, что генетическая идентификация изолята вируса АБ может оказаться полезной не столько для характеристики его вирулентности, а сколько для выяснения источника завоза (заноса) возбудителя.

In vivo вирус культивируют на норках, in vitro – в перевиваемой культуре  клеток почек или селезенки  котят. Он инактивируется при 80оС  через 30 мин., чувствителен к ультрафиолетовым лучам, щелочам, 0,5%-ной настойке йода, 2%-ным растворам глютарового альдегида и формалина; устойчив к воздействию эфира, фреона, кислой среды. При 6оС не теряет активности в течение 11 мес.

Репликация штамма ADV-G алеутской болезни на CrFK клетках схожа с другими парвовирусами. После адсорбции и проникновения внутрь клетки вирус АБН депротеинизируется, одноцепочная ДНК проникает в ядро, где, используя ДНК-полимеразу, энергетический потенциал и материал клетки-хозяина, переходит в двухцепочную форму. После образования димерной формы вируса начинается транскрипция и трансляция белка NS1. Со стороны 3'-конца по сайту (acca)n белок NS1 связывается с димерной формой ДНК вируса и на расстоянии 18нп от точки присоединения происходит никирование (разрыв) ДНК цепи. Это способствует образованию двойных димерных репликативных форм размером 9800нп. После этой стадии начинается накопление мономерных форм ДНК входящих в состав вириона. Количество двойных репликативных форм и одноцепочных вирионных молекул вирусной ДНК примерно 105 на инфицированную клетку.

В это время клетка стабилизируется в S1 фазе, избыточный белок NS1 блокирует геном клети, что приводит к ее гибели

Восприимчивость:

К АБ особенно чувствительны норки и в незначительной степени хорьки. У всех остальных животных и у человека вирус АБ не вызывает заболевания, хотя может продолжительное время (до 2-3 месяцев и дольше) персистировать в их организме (это доказывается биопробой и обнаружением специфических антител). Болеют норки всех генотипов (пород) независимо от пола и возраста. У зараженных хорьков и тхорзофреток (гибридных хорьков) иногда может отмечаться продолжительное (вплоть до 977 дней) пребывание вируса в организме (персистенция), но заболевание обычно не возникает (Слугин В.С., 1982). Bernard S.L. et al. (1984) также cклонны считать, что вирус сохраняется у инфицированных хорьков в течение нескольких лет.

Полагают, что норки и хорьки имеют разные штаммы вируса, но у экспериментально зараженных хорьков оба штамма воспроизводят лёгкую болезнь с ограниченным спектром патологических изменений. Но и это мнение слишком оптимистично. В специальных опытах выяснилось (Слугин В.С.,1982), что после 11 последовательных пассажей на тхорзофретках вирус П-1 утратил патогенность и для хорьков, и для норок - инокуляция норкам материала 11-го пассажа (из органов убитых хорьков) не привела ни к их заболеванию, ни к появлению специфических антител в РИЭОФ в течение 120 дней наблюдений. Напротив, в параллельных опытах при перемежающемся пассировании (норка-хорь) через 145 дней IX пассажа один хорь пал с признаками АБ и титром антител 1:2048, тогда как среди хорьков всех предыдущих пассажей (I, II, V, VI и VII) случаев заболевания и падежа не произошло, а титры антител, достигнув величин 1:16, 1:32 и 1:128, исчезли. Норки же, зараженные хорьковым патматериалом, давали положительную РИЭОФ до VIII пассажа, падеж произошёл на VII пассаже, но на Х пассаже норка оставалась серонегативной в течении 55 дней наблюдений. Таким образом, опыты показали, что даже неосуществимое в естественных условиях поступление хорькам массированных доз (10,25 lg норковых ИД50,) высоко вирулентного вируса АБ, полученного как с последовательных, так и с перемежающихся пассажей, закономерно завершается быстро проходящим появлением антител и утратой вирусом патогенности как для хорьков, так и для норок. Заболевание даже в этих условиях является не правилом, а исключением. Значит, не имеется веских оснований считать хорьков (по крайней мере, гибридных, которых разводят в зверохозяйствах) восприимчивыми к АБ. Они могут преимущественно служить лишь передатчиками возбудителя инфекции, если вирус внедрится в их организм (вирусоносительство или персистенция).Вирус так же поражает и других пушных зверей, при этом бессимптомно прибывая в организме у:

• лисиц
• песцов
• соболей
• кроликов
• диких зверей
• собак
• кошек

Источником возбудителя инфекции служат больные норки, хорьки и вирусоносители, которые выделяют вирус в окружающую среду, а так же могут передавать его здоровым животным:

• со слюной
• мочой
• калом
• молоком
• околоплодной жидкостью

Заражение вирусом может произойти следующим путём:

• алиментарно (через корм)
• аэрогенно (воздушно-капельным путём)
• внутриутробно
• через поврежденную кожу
• определенное значение имеет распространение вируса через предметы ухода, корма и блохами

Симптомы и течение:

Инкубационный период длится от 3 х недель до 7 ти месяцев. Течение болезни острое, хроническое и латентное.

Острое течение, без характерных симптомов болезни наблюдается у норок с геномом алеутской окраски и у сапфировых норок в возрасте 3 недель, которые не получили от матерей специфических антител (то есть самки были здоровы и не являлись носителями).

У таких щенков обнаруживают признаки пневмонии и они погибают через несколько часов от асфиксии. Летальность составляет 50%.

Хроническое течение сопровождается поносом. При этом испражнения имеют черный дегтеобразный цвет (связано с кровотечениями в кишечнике). Зверьки испытывают жажду, что является признаком хронического воспаления почек. В дальнейшем у норок наблюдают кровотечения из носовой и ротовой полостей, отмечают формирование на слизистой оболочке губ, рта и твердого неба мелких язв, появляется кровоточивость десен. При этом вода в поилках приобретает розовый цвет. В результате постоянных кровопотерь у зверьков наступает анемия, видимые слизистые оболочки и подушечки лап становятся бледно-розового цвета, иногда с желтушным оттенком.

У отдельных норок нарушается координация движений, отмечают парезы и параличи конечностей. Смерть наступает от почечной недостаточности или в результате наслоения условно-патогенных инфекций: сальмонеллеза, колибактериоза, псевдомоноза и др. Летальность достигает 20%.

При латентном течении наблюдается ежегодное снижение плодовитости самок, появляются аборты, прохолосты (пропустование) или утрата репродуктивных качеств (характерный признак алеутской болезни).

Следует иметь в виду, что не у всех больных норок клинические признаки болезни наблюдаются в полном объеме. По Берестову В. А.и Самсонову В. А. (1969), кровотечения из ротовой полости были у 20% больных, тогда как полидипсия и дегтеобразные фекалии – постоянно. Кахексия и кишечные кровотечения тоже относятся к постоянным симптомам. При стрессе животные могут умирать внезапно.

У отдельных заражённых норок, несмотря на положительную серологическую реакцию (которая иногда выпадает на определенный срок), клинические признаки болезни не выявляются на протяжении нескольких месяцев или лет (в одном известном случае – до 5, в другом - до 8 лет), что расценивается как вирусоносительство, или персистенция, или непрогрессирующая форма болезни, но показатели щенения самок в этих случаях бывают в среднем на 0,5-2,5 щенка ниже, чем у здоровых.

Для АБ характерны стационарность и очаговость поражения ферм, бригад и даже отделений, наличие прямой зависимости между уровнем реагирующих на диагностический тест и частотой резорбции эмбрионов у самок (пропустование), абортов, мертворождаемости, ранней гибели молодняка.

У хорьков АБ проявляется парезом задних конечностей, потерей координации движения (Stewart J.D., Rozengurt N., 1995)

Патологоанатомические изменения:

Звери, павшие в результате подострого и хронического течения болезни, как правило, истощены. На деснах, твердом и мягком небе примерно у 20%, норок находят множественные мелкие кровоточащие язвочки с коричневатым дном (Неlboldt С.F. и Jungher E.L., 1958). В острых случаях болезни почки увеличены, поверхность их слегка зернистая. На общем серо-желтом фоне коркового слоя хорошо выделяются точечные кровоизлияния и мелкие серо-белые очажки, гистологически соответствующие очагам клеточной пролиферации. Всё это придает почке своеобразную крапчатость

По мере развития процесса этиочаги увеличиваются в размерах и приобретают вид целых полей, проникающих в мозговой слой. Граница слоев несколько стёрта. При хроническом течении болезни почки нередко даже уменьшены в объёме, серо-жёлтого цвета, сморщены, приобретают вид тутовых ягод. Капсула, так же как и при остром течении, снимается легко. Таким образом, в почках развивается нефрозо-нефрит.

Печень, по данным ряда авторов, увеличена в 2 раза по сравнению с нормальной и имеет цвет либо красного дерева, либо мускатного ореха. Макроскопические изменения печени непостоянны. Дистрофия же часто является вторичным явлением. Желчный пузырь пустой, воспалён. Стенка его утолщена, шероховатая, оливкового цвета, инфильтрирована желчью. Селезенка, как правило, увеличена в 2-5 раз, иногда пятнистая, с напряженной капсулой (рис. 1-3). Лимфатические узлы туловища и внутренних органов часто набухшие, сочные, светло-серого цвета.

Таким образом, в картине вскрытия наиболее характерными являются изменения почек (“конопатая почка”). Изменения печени, селезенки, лимфатических узлов, хотя и не являются патогномоничными, но с учетом поражений почек дают типичную патологоанатомическую картину болезни.

У хорьков тоже находят спленомегалию и лимфаденопатию, но не так сильно выраженную, как у норок. Однако тимус гипертрофирован очень резко. Артериит у хорьков не обнаруживается, поражения поченчных клубочков малочисленны (Ohshima K. et al., 1978).

У экспериментально заражённых норок отмечался также увеит (иридоциклохориоидит), характеризующийся инфильтрацией лимфоцитами и плазматическими клетками сосудистой оболочки глазного яблока и сопровождавшийся гломерулонефритом.

Диагностика:

Установить клинический диагноз на АБ у норок иногда трудно, особенно при вертикальном заражении, когда АБ проявляется слабой продукцией антител (слабой гипергаммаглобулинемией) и атипичными признаками (Coe J.R., Race R.E., 1978; Слугин В.С., 1982).

Рис. 1-3. Гиперплазия селезенки при АБ: справа – нормальная селезенка (по Gorham J.R.).

Только систематические наблюдения и тщательный анализ собранных данных позволяют выявить истинную причину неблагополучия на ферме.

Для постановки предварительного диагноза необходимо учитывать эпизоотологические данные, клинические признаки болезни и патологоанатомические изменения. Окончательный диагноз устанавливают только по результатам серологических исследований – РИЭОФ, или как называют за рубежом, CIEP, или агарового теста. РИЭОФ выявляет зараженных вирусом АБ норок по наличию гуморальных специфических антител. Она может быть эффективной не только при исследовании крови у зверей, но и молока у самок. Для посмертной диагностики методом РИЭОФ пригодны свернувшаяся кровь, кровянистый экссудат, плевральная и перитонеальная жидкость, содержимое молочных желез павших самок норок. Абортированные плоды, мертворождённые и павшие в первые дни жизни щенки также служат объектом для исследований, поскольку осуществима трансплацентарная передача материнских антител. Патогистологическая же диагностика теперь потеряла всякий смысл, т.к. микроскопические изменения выявляются лишь после сероконверсии (Uttenthal A., Hansen M., 1992), а чувствительность метода значительно уступает РИЭОФ (Слугин В.С., 1982). Кроме того, не будучи специфической, патогистологическая диагностика во многих случаях может дать ложный положительный или отрицательный результат.

РИЭОФ выявляет не всех, а в среднем 97-98% инфицированных норок, причем не раньше, чем через 6-7 дней после заражения (обычно значительно позже). При этом следует подчеркнуть, что в свежем эпизоотическом очаге чувствительность РИЭОФ достигает 100%, а в стационарном – в среднем 85%. В свежем очаге количество реагирующих (их приравнивают к заболевшим) обозначают как инцидентность, в стационарном, где суммируют прежде заразившихся норок с новыми, - как превалентность.

На отдельных стадиях развития АБ уровень антител в крови падает настолько сильно (если не сказать об исчезновении антител), что РИЭОФ становится даже отрицательной (выпадение реакции), из-за чего данная стадия может быть названа недиагностируемой. В период осенних исследований в стационарном очаге недиагностируемая стадия регистрируется у 15-20% норок, а в послеотъёмный период ещё чаще – до 65% (Слугин В.С., 1982).

Выпадение реакции обусловлено в первую очередь частичной (непродолжительной) иммунологической толерантностью у щенков, создающейся при вертикальном заражении (в эмбриональный и подсосный периоды) и возможным тормозящим развитие болезни влиянием колостральных антител.

Недостаточную в этой ситуации чувствительность РИЭОФ удается успешно компенсировать организационными мерами. Поскольку подавляющее большинство ложных отрицательных результатов РИЭОФ (выпадение реакции) регистрируется у щенков, рожденных или вскормленных зараженными самками (серопозитивными по РИЭОФ), то щенков от этих самок выбраковывают из стада без исследований. Точно также выбраковывают и весь помет, если в нем обнаруживают хотя бы одного положительно реагирующего зверя. И, наконец, проводят повторные и вынужденные исследования, а также круглогодовое обследование подозрительных по заболеванию и подозреваемых в заражении норок - самок без приплода, больных и павших.

Для серологических исследований кровь берут в стеклянные капилляры. В качестве антигена используют убитый тканевой или культуральный вирус. Первый получают, экстрагируя вирус из органов заражённых норок, второй – в культуре клеток CRFK или в аналогичных.

Электронная микроскопия показала, что культуральный антиген подобно тканевому состоит из икосаэдральных вирусных частиц размером 23 нм, «пустых» вирусных частиц того же размера и кольцевидных структур величиной около 11 нм, идентичных ферритину (Brummersted E., 1976; Скалинский Е.И. и др., 1980). По диагностической ценности эти препараты принципиально не различаются, но культуральный антиген может иногда давать неспецифический (ложный) положительный результат. Munck Ch. (1990) сообщил о пяти случаях из 408 у норок, привитых вакциной, содержащей антиген вируса энтерита. Реакция исчезала через 7-14 дней. В среднем неспецифические положительные реакции отмечаются с частотой 1/1000. Uttenthal A., Hansen M. (1992) наблюдали их в Дании еще реже 1/63000. Hansen M. (1994) называет следущие причины таких реакций: ревакцинация норок против вирусного энтерита, туберкулёз птичьего типа, рожа, наличие в антигене компонентов культуры клеток CRFK (вакцина готовится в той же культуре клеток, что и антиген, поэтому она может индуцировать образование антител к антигенам клеток и белкам культуральной жидкости) и, наконец, ошибки в лабораторной работе. К сожалению, Hansen M. не расшифровал, что имеет в виду под ошибками в работе, и не выявил еще одну причину – сходство положительной реакции между ДНК антигенного препарата и антителами к ДНК, циркулирующими в крови даже здоровых норок, как это было впервые установлено в 1975 г. (Слугин В.С. и др.). Данная реакция становится видимой потому, что датская методика постановки РИЭОФ очень оптимизирована, вследствие чего обладает излишне высокой чувствительностью. Во-вторых, в методике отсутствует процедура отмывания неспецифических положительных реакций.

Неспецифические положительные реакции из числа перечисленных при использовании тканевого антигена не регистрируются по нескольким причинам. Во-первых, тканевой антиген не имеет общих с вакциной компонентов, во-вторых, методика постановки реакции упрощена до предела, что понижает ее чувствительность и, в-третьих, читка реакции осуществляется на второй день после отмывки неспецифических линий, полос, пятен и других помех (белков, липидов, гематина и т.п.) сначала в гипертоническом солевом растворе, затем в дистиллированной воде.

РИЭОФ, выявляя зараженных вирусом АБ норок, обеспечивает лучший контроль болезни на основе удаления реагирующих особей из стада. Если ее применяют старательно и настойчиво, как в Дании, оздоровившей более 95% ферм, то имеется надежда на ликвидацию АБ. Антиген для РИЭОФ продается в наборе с контрольной позитивной сывороткой, агаром (агарозой), буфером и наставлением по применению. В России РИЭОФ ставят, за редким исключением, ветеринарные специалисты непосредственно в хозяйствах. В Дании и Швеции эту работу проводят центральные лаборатории, в Канаде и ряде других стран – несколько лабораторий. Во Франции диагностикой алеутской болезни занимаются 80 региональных и 8 национальных лабораторий (Morand M., 1987).

Для исключения ложных результатов РИЭОФ испытан (Aasted B. et al., 1986; Uttenthal A., Hansen M., 1992) ракетный линейный электрофорез, но в виду большей сложности и низкой производительности использование его в практике маловероятно. Предлагались и другие методы – РНГА, реакция латексной агглютинации, но дальше лаборатории они не вышли.

Сообщалось о разработке в Канаде (Wright J.R. et al., 1980), России (Мирошниченко С.В. и др., 1982; М.Таранин А.В. и др., 1996) и Китае (Zhao Guang Ying et al., 1996) другого серологического метода - иммуноферментного анализа (ИФА, или ELISA), однако он в широкую практику не внедрен в первую очередь из-за возможности получения части ложных (табл. 1-3) положительных и отрицательных результатов (Wright J.R., Wilkie B.N., 1982; Gorham J.R. et al., 1981; Uttenthal A., Hansen M., 1992; Hansen M., 1994; и др.). Из табл. 1-3 следует, что антитела с помощью ИФА не удалось обнаружить при непрогрессирующей форме АБ (спонтанная АБ) ни в одном из 142 случаев, хотя РИЭОФ всегда была положительной. Более того, при прогрессирующей АБ (экспериментальное заражение) чувствительность у ИФА составила лишь 93%, тогда как у РИЭОФ – 97,8%. Кроме того, ИФА дал положительный результат у 6,85% здоровых норок и через 5-29 недель у экспериментально зараженных норок, ранее положительных по ИФА. РИЭОФ же была положительной в высоких титрах – 1:256 – 1:8192. Это свидетельствует о довольно частых случаях неспецифических реакций. По указанным причинам разработчики сделали заключение, что ИФА непригоден для массовой диагностики в качестве единственного и альтернативного РИЭОФ метода, хотя его можно использовать в качестве дополнительного, второго, параллельного метода, особенно на фермах с инцидентностью более 80% для дифференциации прогрессирующей и непрогрессирующей АБ при невозможности убить всех серопозитивных норок.