Возбудитель туберкулёза и паратуберкулёза
Министерство Сельского Хозяйства Российской Федерации
ФГБОУ ВПО «Алтайский Государственный Аграрный Университет»
Факультет ветеринарной медицины
Кафедра микробиологии, вирусологии, паразитологии, эпизоотологии и ВСЭ
Тема: «Возбудитель туберкулёза и паратуберкулёза»
Проверила: Резниченко З.М.
Барнаул 2013 г.
Содержание
Возбудитель туберкулёза
- Историческая справка……………………………………………………………
………….…..3 - Характеристика заболевания…………………………………………………
………….….3 - Морфология возбудителя…………………………………………………
…………………..4 - Данные по Алтайскому краю…………………………………………………………………4
- Культуральные и биохимические свойства………………………………………….5
- Антигенная структура и токсинообразование………………………………
………6 - Устойчивость возбудителя к факторам внешней среды………………………6
- Патогенность и патогенез………………………………………………………
……….…….6 - Диагностика (материалы, направляемые в лабораторию)………………....8
- Иммунитет………………………………………………………
……………………………………..8 - Специфическая профилактика………………………………………………
……………...9 - Биопроба…………………………………………………………
……………………………………..9 - Биопрепараты………………………………………………
……………………………………...10
Возбудитель паратуберкулёза
- Историческая справка…………………………
…………………………………………..…..11 - Характеристика заболевания…………………………………………………
……..…….11 - Морфология возбудителя…………………………………………………
………………...11 - Культуральные и биохимические свойства………………………………………..12
- Устойчивость возбудителя к факторам внешней среды……………….……12
- Патогенность и патогенез………………………………………………………
…………...13 - Диагностика (материалы, направляемые в лабораторию)………………..13
- Иммунитет………………………………………………………
…………………………………...15 - Специфическая профилактика……………..……………………………
………………..15
Список используемой
литературы……………………………………………………
Возбудитель туберкулёза
Историческая справка
Туберкулез известен с глубокой древности. Признаки болезни у человека описаны Гиппократом в IV веке до н.э. Термин «туберкулез» впервые употребил французский врач Ленек (1819), заразность болезни доказал Ж.А. Виллемен (1865). Возбудитель туберкулеза был открыт Р. Кохом (1882), он же впервые изготовил (1890) аллерген - туберкулин. В 1924 г. А. Кальметт и С. Герен изготовили вакцину БЦЖ (BCG - Bacterium Calmett - Guerin, бактерия Кальметта - Герена) для специфической профилактики туберкулеза у человека.
Туберкулез животных распространен во многих регионах мира, лишь в развитых странах Европы и Северной Америки он почти ликвидирован. Степень опасности туберкулеза для человека возрастает: в конце XX - начале XXI в. мировая эпидемическая ситуация по туберкулезу значительно ухудшилась.
Болезнь причиняет животноводству
серьезный экономический ущерб,
что связано со снижением продуктивности,
преждевременной выбраковкой и
сдачей животных на убой, длительными
и дорогостоящими противоэпизоотическими
мероприятиями и другими
Характеристика заболевания
Туберкулёз – хроническое
Заболевание туберкулезом вызывают 3 патогенных вида:
1) Mycobacterium tuberculosis (человеческий вид) вызывает заболевание у человека. К нему восприимчивы также свиньи, кошки, собаки, рогатый скот, пушные звери, а птицы (кроме попугаев) не восприимчивы;
2) Mycobacterium bovis (бычий вид) вызывает заболевание у всех видов сельскохозяйственных, диких животных, в том числе пушных зверей, а также человека. Птицы не восприимчивы;
3) Mycobacterium avium (птичий вид) вызывает заболевание домашних и диких птиц, восприимчивы также свиньи; животные других видов и человек заражаются редко.
Морфология возбудителя
Возбудитель туберкулёза относится
к группе кислото-спирто-
Метод Циля-Нильсена: на фиксированный
мазок накладывают небольшой листок фильтровальной
бумаги, на него наносят раствор карболового
фуксина, снизу препарат подогревают над
пламенем спиртовки до появления паров
и оставляют на «мостике» 5-7 минут. Затем
краску с бумажкой сливают, и, не промывая
водой, обрабатывают 3-5% раствором серной
кислоты 5-7с, хорошо промывают водой и
дополнительно окрашивают раствором метиленовой
сини 4-5 минут. В заключение препарат высушивают
фильтровальной бумагой. Кислото-спирто-
Возбудитель туберкулёза – палочковидной формы, длина 1,5 – 5 мкм, диаметр 0,5 мкм. M. tuberculosis – тонкая, слегка изогнутая палочка, M. bovis – короткая и толстая, M. avium – мельче остальных видов, обладает полиморфизмом. Микобактерии туберкулёза неподвижные, спору и капсулу не образуют. Окрашиваются грамположительно. В мазках располагаются одиночно и небольшими скоплениями.
Данные по Алтайскому краю
1998 год – 2 неблагополучных пункта (поражение птицы);
1999 год – 1 неблагополучный пункт;
2002 год – 2 неблагополучных пункта;
2003 год – 1 неблагополучный пункт (Рубцовский район);
2006 год – 1 неблагополучный пункт;
2007 год – 1 неблагополучный пункт (Локтевской район);
2008 год – 1 неблагополучный пункт ( Чарыш).
Среди населения. В 2012 году в крае зарегистрировано 2745 новых случаев, в том числе у 108 детей и 25 подростков. Показатель первичной заболеваемости населения края уменьшился по сравнению с 2011 г. на 6,3% и составил 101,8 на 100 тыс. населения. Вместе с тем, более половины больных выявляется с распадом легочной ткани, каждый третий - с бактериовыделением
Культуральные и биохимические свойства
Микобактерии
являются облигатными аэробами и
растут при большом доступе воздуха.
Для выращивания требуется
Используемые среды:
- Среда Петрова. 250 г фарша телятины, 212 мл дистиллированной воды, 38 мл стерильного глицерина, 16-20 яиц, 6 мл 1% раствора генцианвиолета на спирте из расчёта на 100 мл среды;
- Среда Петраньяни. 150 мл молока, 6 г картофельного крахмала, 1 г пептона, одну картофелину величиной с яйцо, порезанную на мелкие кусочки, 4 яйца целиком, 1 желток, 12 мл глицерина, 10 мл 2% водного раствора малахитовой зелени;
- Среда Левенштейна-Иенсена. 600 мл дистиллированной воды, 12 мл глицерина, в них растворяют 3,6 г аспаргина, 2,4 г однозамещённого фосфорнокислого калия, 0,24 г сернокислой магнезии, 0,6 г лимоннокислой магнезии, 5 г картофельной муки, 0,4 г малахитовой зелени.
Рост: На среде Петрова при росте микобактерий на равномерно окрашенном фоне фиолетовой среды отчётливо видны белые и желтоватые колонии бактерий. На среде Левенштейна-Иенсена рост проявляется на 15-25 день после посева. M. tuberculosis на среде Петраньяни даёт серовато-жёлтые колонии, M. bovis – растёт в виде зеленоватых колоний, M. avium образует колонии золотистого цвета.
Антигенная структура и токсинообразование
Возбудитель содержит полисахаридо-белково-липидный комплекс. Среди атипичных Х форм различают общие и групповые антигены
Устойчивость возбудителя к факторам внешней среды
Устойчивость возбудителя
При температуре 60°С гибель наступает через час, при 65°С – через 15 минут, при 70-80°С – выдерживает не более 10 минут.
Патогенность и патогенез
Проникнув в организм с кормом или вдыхаемым воздухом, туберкулезные микобактерии попадают в легкие или другие органы лимфогенным и гематогенным путями. На месте локализации бактерий развивается воспалительный процесс с последующим образованием туберкулезных узелков - туберкулов величиной до чечевичного зерна, сероватого цвета, округлой формы. В центре туберкула отмершие клетки под действием токсинов микобактерии превращаются в творожистую массу. При доброкачественном течении болезни первичный очаг подвергается обызвествлению, окружается соединительной тканью и дальнейшее развитие инфекционного процесса прекращается. При понижении резистентности процесс инкапсуляции возбудителя в первичном очаге выражен слабо, происходит расплавление стенок туберкулезного узелка, микобактерии попадают в здоровую ткань, что приводит к образованию множества новых подобных туберкулезных узелков (милиарный туберкулез). Мелкие туберкулезные узелки могут сливаться между собой, образуя крупные туберкулезные фокусы.
Из таких туберкулезных
У крупного рогатого скота при туберкулезе чаще поражаются легкие, и туберкулезный процесс протекает хронически, у молодых животных - остро и подостро. Для туберкулеза легких характерен сильный сухой кашель, усиливающийся при вставании животного или вдыхании холодного воздуха; температура может повышаться до 39,5-40°С. Аппетит и продуктивность в начальном периоде не понижены. При прогрессировании болезни проявляются признаки воспаления легких и плевры. Кашель становится болезненным, дыхание затрудненное и сопровождается стонами. В грудной клетке прослушивают хрипы, при перкуссии - участки притупления.
Поражение молочной железы характеризуется
увеличением надвыменных
Туберкулез у свиней протекает бессимптомно. Иногда наблюдается увеличение нижнечелюстных и заглоточных лимфатических узлов. При обширных поражениях легких возникают кашель, рвота, затрудненное дыхание.
Овцы туберкулезом болеют очень редко, козы - несколько чаще, но те и другие бессимптомно. При сильно выраженном процессе клинические признаки у коз сходны с таковыми у крупного рогатого скота.
У лошадей заболевание регистрируется редко, преимущественно в хозяйствах, где крупный рогатый скот неблагополучен по туберкулезу. При поражении легких отмечаются слабый кашель, быстрая утомляемость; при кишечной форме - колики, диарея, сменяющаяся запорами, полиурия.
У птиц (чаще кур, гусей, уток, индеек) туберкулез протекает хронически с неясными клиническими признаками. Больные куры малоподвижны, быстро худеют. Гребень и сережки побледневшие, сморщенные, происходит атрофия грудных мышц. Возможна длительная изнуряющая диарея. Птицы погибают от истощения.
У пушных зверей (лисицы, норки, нутрии) туберкулезом чаще поражается молодняк. У больных отмечают слабость, истощение; при поражении легких - кашель, одышку; при кишечной форме - профузную диарею.
Клинические признаки болезни у собак и кошек малохарактерны, наблюдается исхудание, а при поражении легких - затрудненное дыхание, кашель. Смерть наступает вследствие полного истощения.
Диагностика (материалы, направляемые в лабораторию)
Диагноз устанавливают на основании
анализа эпизоотологических данных,
клинических признаков и
Патологический материал для бактериологического исследования направляют как при жизни животного (истечения из носа, бронхиальную слизь, молоко – особенно при увеличении надвыменных лимфоузлов, фекалии, реже мочу), так и посмертно (поражённые части органов и лимфоузлы – бронхиальные, заглоточные, средостенные, предлопаточные, надвыменные). Труп птицы направляют целиком – исследуют поражённые печень, селезёнку, лёгкие, яичники. Если нет возможности направить в лабораторию свежий материал, то патологический материал консервируют в 30-40% водном растворе глицерина или посылают его в замороженном состоянии.
Мокроту, слизь, гной заливают равным объёмом 10% раствора трёхзамещённого фосфата натрия, хорошо перемешивают и ставят в термостат на 24 ч. Затем центрифугируют 10-15 мин. Исследуют выпавший осадок.
Поражённые ткани нарезают мелкими
кусочками и растирают в
Иммунитет
При заболевании туберкулезом фагоцитоз имеет незавершенный характер, формируется нестерильный иммунитет, вследствие чего защитного значения он не имеет. Специфическая профилактика при помощи вакцины БЦЖ возможна, но в большинстве стран сельскохозяйственных животных против туберкулеза не вакцинируют.
Специфическая профилактика
Профилактику и меры борьбы с туберкулезом животных осуществляют согласно действующим Санитарным и ветеринарным правилам. В благополучных хозяйствах комплектование ферм проводят здоровыми животными из благополучных по туберкулезу хозяйств, корма приобретают только в благополучных хозяйствах.
Вновь поступивших животных в период 30-дневного карантина исследуют на туберкулез. Обрат, поступающий для выпойки молодняка, пастеризуют, а сборные пищевые отходы подвергают термической обработке. К обслуживанию животных не допускают больных туберкулезом людей. Периодически проводят дезинфекцию животноводческих помещений, уничтожают грызунов и клещей, улучшают кормление и условия содержания животных.
С профилактической целью ежегодно проводят плановые диагностические исследования животных на туберкулез. Коров и быков-производителей обследуют 2 раза в год: весной, перед выгоном на пастбище, и осенью, перед постановкой скота на зимнее содержание, а молодняк крупного рогатого скота (начиная с 2-месячного возраста) и откормочные группы - 1 раз в год; лошадей, мулов, ослов, овец и коз - в зависимости от эпизоотической ситуации; всех взрослых свиноматок и молодняк после отъема во всех племенных хозяйствах, птицеводческих станциях - 1 раз в год. Животных, принадлежащих гражданам, исследуют на туберкулез одновременно с проведением этой работы на фермах.
Биопроба
Для дифференциации отдельных видов
микобактерий ставят биопробу на морских
свинках, кроликах, а при необходимости
– на курах, предварительно проверенных
аллергическим методом (туберкулинизацией)
для исключения спонтанного туберкулёза.
Для заражения применяют либо
культуру, либо присланный в лабораторию
материал, который предварительно обрабатывают
серной кислотой, как указывалось
выше, растирая в стерильной ступке.
К осадку после центрифугирования
добавляют 15% раствор двууглекислой
соды, оставляют на 10-15 мин и вновь
центрифугируют 5 мин. Образовавшийся
осадок дважды промывают стерильным
физраствором с последующим
Надосадочную жидкость вводят по 1-2 мл морским свинкам в паховую область, кроликам – внутривенно. У морских свинок в положительных случаях через 2-3 недели на месте введения образуется уплотнение, потом язва с одновременным увеличением региональных лимфоузлов. Этим свинкам через 2-3 недели подкожно инъецируют туберкулин, что приводит к бурной генерализации процесса и гибели животных.
Биопрепараты
В ветеринарной практике для диагностики туберкулёза широко применяется аллергический метод, который основан на выявлении повышенной чувствительности заражённых туберкулёзом животных к введению туберкулина. У поражённых туберкулёзом животных и птиц на месте инъекции туберкулина развивается воспаление, образуется отёчная припухлость, утолщается складка кожи (бородавка). Туберкулодиагностика позволяет выявлять до 80-93 % больных животных, 40-60 % птиц, поражённых туберкулёзом.
Аллергены для исследования на туберкулёз.
Альттуберкулин. Он содержит продукты жизнедеятельности туберкулёзных палочек, а по внешнему виду – это прозрачная, маслянистая, тёмно-коричневая жидкость. Он готовится из бычьего и человеческого видов палочек путём выращивания их в течение 2 месяцев на МПБ. Культуру автоклавируют, выпаривают до 1/10 первоначального объёма, фильтруют и стерилизуют. Аналогичным образом готовят туберкулин и для птиц.
Сухой очищенный туберкулин (СОТ) готовят, выращивая культуры микобактерий на синтетической питательной среде. В фильтрат 3-недельной культуры добавляют трихлоруксусную кислоту для осаждения протеинов. Настаивают 10ч в холодильнике при температуре 35 °С. Надосадочную жидкость сливают, а осадок центрифугируют и трижды промывают 1% раствором трихлоруксусной кислоты и ацетоном путём центрифугирования. Полученную массу подвергают лиофилизации. Применяется также, как и альттуберкулин, для внутрикожной пробы по 0,2 мл, реакцию читают через 72ч. При наличии воспаления и утолщения кожной складки на 3 мм и более – реакция положительная, а животное считается больным.
Сухой туберкулопротеин. Готовят, как и сухой очищенный туберкулин, но после фильтрации жидкость отстаивают 1ч при температуре 4-5°С, а затем суперцентрифугируют при 18-20 тыс. об/мин. Скопившийся на барабане центрифуги осадок и есть туберкулопротеин. Применяется аналогично.
Вакцина БЦЖ. Вакцину готовят из ослабленного бычьего вида микобактерий из посевного материала на глицериновом картофеле с желчью, а затем в жидких синтетических средах. Плёнку снимают, отмывают и гомогенизируют, разводят 1:5 раствора глутамата натрия. Вакцину разливают в ампулы и лиофилизируют. В ампулах содержится 1 мг культуры БЦЖ, что составляет 20 доз по 0,05 мг. Растворяют физиологическим раствором. Срок годности вакцины 1 год.
Возбудитель паратуберкулёза
Историческая справка
В 1895 г. X. Ионе и Г. Фротингем обнаружили возбудитель болезни в мазках из подвздошной кишки больной коровы и описали его. Б. Банг (1906) экспериментально воспроизвел болезнь у телят.
В нашей стране паратуберкулез крупного рогатого скота впервые установлен И. И. Гордзялковским в 1911 г. в бывшей Воронежской губернии, паратуберкулез овец — П. П. Вишневским и П. Г. Прохоровым в 1937 г.
Над изучением заболевания, совершенствованием диагностики и мер борьбы работали такие отечественные ученые, как П. П. Вишневский, К. А. Дорофеев, Е. П. Посохни, Т. В. Пашов, В. Д. Штанько, А. К- Строгое, О. А. Полякова, Н. М. Нуралиев и др.
Паратуберкулез у крупного рогатого скота встречается спорадически во многих странах Европы, Азии, Африки, Америки, также в Австралии и Новой Зеландии. Отдельные эпизоотические вспышки и спорадические случаи болезни регистрируются и в Нечерноземной зоне России. Экономический ущерб из-за ограниченного распространения невысок.
Характеристика заболевания
Паратуберкулез (лат. — Paratuberculosis, Enteritis paratuberculosa; болезнь Ионе, паратуберкулезный энтерит) — хроническая бактериальная болезнь жвачных, преимущественно крупного рогатого скота и овец, реже буйволов, верблюдов и очень редко коз, оленей, яков, характеризующаяся медленно развивающимся продуктивным энтеритом, периодической диареей, прогрессирующим истощением и гибелью животных.
Морфология возбудителя
Возбудитель паратуберкулеза Mycobacterium paratuberculosis — тонкая
короткая полиморфная грамположительная
палочка, аэробная, кислото-спирто-
Культуральные и биохимические свойства
Для паратуберкулезных бактерий характерно расположение в мазках из патологического материала в виде кучек (по 2—4 и более), гнезд, целых глыбок, состоящих из коротких палочек, мелких кокков, отдельных зерен, пылинок, диплококков и др. Выделение чистой культуры, а также культивирование вторых и третьих генераций связано со значительными трудностями. Растет возбудитель паратуберкулеза очень медленно (рост первичных культур наблюдается через 45—180 дней) и только на элективных питательных средах — среде Дюбо-Смита с добавлением фактора роста (экстракт из микобактерий Тимофеевой травы), среде Смита в прописи А. А. Аликаевой (экстракт микобактерий флеи), средах Дапкииа, Генли, Ренжера, Гона, Дарсэ, агаризированной среде Нуралиева. Оптимальная температура, необходимая для роста возбудителя,— 38°С. На твердых питательных средах бактерии паратуберкулеза вырастают в виде беловато-серых сморщенных сухих колоний с неровными краями, постепенно достигающих размеров 1—2 мм и принимающих бугристый вид. В мазках, окрашенных по Циль-Нильсену, обнаруживают более длинные и стройные палочки, чем в препаратах из исходного патологического материала, часто имеющих вид четок или бусинок, отграниченных неокрашенными промежутками. При окраске по методу Муха выявляют зернистость. Микобактерии паратуберкулеза не патогенны для лабораторных животных.
Устойчивость возбудителя к факторам внешней среды
Возбудитель паратуберкулеза обладает значительной устойчивостью к воздействию факторов окружающей среды и различных дезинфицирующих средств. Он сохраняется в почве, навозе, кормах и в воде непроточных водоемов до 8-10 месяцев, в моче 7 дней. Микроб погибает при 85 °С через 5 минут; в молоке, нагретом в закрытых сосудах до 63°С, — через 30 мин, а при 80-85°С — через 1-5 мин. Солнечный свет убивает его через 10 месяцев. Некоторые противотуберкулезные синтетические соединения, сульфаниламидные препараты и антибиотики in vitro только задерживают рост культур М. paratuberculosis. Лучшими дезинфицирующими средствами являются щелочной 3% раствор формальдегида и 3% раствор гидроксида натрия; 20% взвесь свежегашеной извести (гидроксид кальция), 5% эмульсия ксилонафта, 5% растворы формалина и лизола, феносмолина, фенолятов натрия.
Патогенность и патогенез
После алиментарного заражения паратуберкулезные микобактерии проникают через поврежденный эпителий в строму ворсинок стенки тонкой кишки и фагоцитируются ретикулярными клетками. В связи с наличием на поверхности микробной клетки и в ее оболочке стеариновых кислот и других воскоподобных веществ микобактерии при фагоцитозе не перевариваются (незавершенный фагоцитоз), а происходит их внутриклеточное размножение. Пораженные макрофаги объединяются в клеточные скопления и приобретают вид эпителиоидных клеток. Внутриклеточно размножающиеся микробы разрушают клетки, и освободившиеся микроорганизмы заново фагоцитируются. Возникают крупные скопления микробов и пораженных макрофагов вначале в ворсинках, позднее в глубоких слоях кишечной стенки и в брыжеечных лимфатических узлах, вызывая в них атрофию и характерное пролиферативное воспаление. Нарушаются ферментативная, секреторная и всасывающая функции кишечника, а также минеральный, солевой и водный обмены. Все это приводит к интоксикации и истощению организма. Иногда (чаще у молодняка) возникает бактериемия; при этом возбудитель болезни проникает в лимфатические узлы, паренхиматозные органы, матку, плод, вымя.
Патологоанатомические изменения. Характерные поражения обнаруживают в тощей и подвздошной кишках — на отдельных их участках видны утолщения слизистой оболочки в 4—10 раз, плотные продольные и поперечные складки бледного цвета, напоминающие извилины головного мозга, точечные и полосчатые кровоизлияния. Серозная оболочка и брыжейка отечны, субсерозные лимфатические сосуды утолщены, имеют вид толстых извивающихся тяжей. Мезентеральные лимфоузлы увеличены, размягчены, иногда с серовато-белыми саркомоподобными очажками. У овец и коз утолщение и складчатость слизистой оболочки кишечника выражены слабее, а в увеличенных лимфоузлах и слизистой кишечника иногда встречают обезызвествленные и инкапсулированные очажки некроза. Часто наблюдают асцит. В латентной стадии болезни изменения обнаруживают только в брыжеечных лимфоузлах.
У верблюдов отмечают очаговую дистрофию тонких кишок, утолщение и складчатость толстых кишок, резкое увеличение брыжеечных, подчелюстных, заглоточных лимфоузлов, поражение печени, селезенки, почек.
Диагностика (материалы, направляемые в лабораторию)
Первичный диагноз на паратуберкулез
крупного рогатого скота ставят на
основании анализа

- Возбудитель туляремии
- Возбудитель чумы
- Возбуждение гражданского дела в суде
- Возбуждение дела об административном правонарушении
- Возбуждение дела об административном правонарушении
- Возбуждение дела об административном правонарушении
- Возбуждение дела об административном правонарушении
- Возбудитель рожи свиней
- Возбудитель рожи свиней
- Возбудитель рожи свиней
- Возбудитель Сапа
- Возбудитель сибирской язвы
- Возбудитель сибирской язвы
- Возбудитель туберкулеза