Энзимодиагностика функционального состояния печени

1. Об энзимодиагностике

Энзимодиагностика (энзим[ы] + греч. diagnostikos способный распознавать) методы диагностики болезней, патологических состояний и процессов, основанные на определении активности энзимов (ферментов) в биологических жидкостях. В особую группу выделяются иммуноферментные диагностические методы, состоящие в применении антител, химически связанных с каким-либо ферментом, для определения в жидкостях веществ, образующих с данными антителами комплексы антиген-антитело.

Использование энзимных тестов является важным критерием в распознавании врожденных энзимопатий, характеризующихся специфическими нарушениями обмена веществ и жизнедеятельности в связи с отсутствием или недостатком того или иного фермента.

Энзимодиагностика заключается в  постановке диагноза заболевания (или синдрома) на основе определения активности ферментов в биологических жидкостях человека. Принципы энзимодиагностики основаны на следующих позициях:

• при повреждении клеток в крови или других биологических жидкостях (например, в моче) увеличивается концентрация внутриклеточных ферментов повреждённых клеток;
• количество высвобождаемого фермента достаточно для его обнаружения;
• активность ферментов в биологических жидкостях, обнаруживаемых при повреждении клеток, стабильна в течение достаточно длительного времени И отличается от нормальных значений;
• ряд ферментов имеет преимущественную или абсолютную локализацию в определённых органах (органоспецифичность);
• существуют различия во внутриклеточной локализации ряда ферментов.

Ферменты представляют собой специфические высокомолекулярные белковые молекулы, являющиеся биологическими катализаторами, то есть ускоряющими химические реакции, протекающие в живых организмах. Проникновение ферментов из клеток во внеклеточную жидкость, а затем в кровь, в мочу или другие биологические жидкости служит чрезвычайно чувствительным показателем повреждения плазматических мембран или повышения их проницаемости (например, вследствие гипоксии, гипогликемии, воздействия некоторых фармакологических веществ, инфекционных агентов, токсинов). Это обстоятельство лежит в основе диагностики повреждения клеток органов и тканей по феномену сопровождающей его гиперферментемии, причем выявляемое повышение активности фермента или его изоформы может иметь разную степень специфичности для поврежденного органа. Успехи биохимии, физики, молекулярной биологии и других наук, связанные с разработкой высокочувствительных методов разделения белков, позволили установить существование в организме множественных форм ферментов, катализирующих одну и ту же реакцию, в результате чего стала очевидной необходимость классификации ферментов по специально разработанной для этого биохимической номенклатуре. Для вариантов ферментов, катализирующих одну и ту же реакцию, но различаюшихся физико-химическими свойствами, предложено два основных термина – «изоферменты» и «множественные формы ферментов». Термином «изоферменты» принято обозначать только те разновидности ферментов, различия в первичной структуре которых определены генетически. Понятием «множественные формы ферментов» обозначают молекулы, различия в структуре которых обусловлены уже посттрансляционными изменениями.

В соответствии с природой катализируемых энзимами реакций выделяют 6 основных типов ферментов:

• Оксидоредуктазы, то есть энзимы, катализирующие окислительно-восстановительные реакции. Представителями их являются лактатдегидрогеназа (ЛДГ), каталаза, глутаматдегидрогеназа.
• Трансферазы, обеспечивающие реакции межмолекулярного переноса химических групп: аспартатаминотрансфераза (АсТ), аланинаминотрансфераза (АлТ), гамма-глутамилтранспептидаза (ГГТП), креатинкиназа (КК) и др.

• Гидролазы, вызывающие гидролитическое расщепление внутримолекулярных связей: альфа-амилаза, липаза, холинэстераза (ХЭ), щелочная и кислая фосфатазы (ЩФ, КФ), лейцинаминопептидаза (ЛАП), пепсин, трипсин и др.

• Лиазы, катализирующие отрыв и присоединение химических групп по месту локализации двойных связей: фруктозо-1-фосфат-альдолаза (Ф-I-Ф-А), или фруктозомонофосфат-альдолаза (ФМФ-А), фруктозо-l,6-дисфосфат-альдолаза (ФДФ-А) и др.

• Изомеразы, обеспечивающие ферментативные процессы изомеризации.

• Лигазы (синтетазы), ускоряющие реакции синтеза, т. е. соединения двух молекул субстрата.

Распределение отдельных  изоферментов в тканях более специфично для определенной ткани, чем суммарная ферментативная активность, поэтому исследование некоторых изоферментов приобрело важное значение для ранней диагностики поражения отдельных органов и тканей. Так, например, широко используется определение активности в крови изоферментов креатинфосфокиназы для диагностики острого инфаркта миокарда, лактатдегидрогеназы – для диагностики поражений печени и сердца, кислой фосфатазы – при распознавании рака предстательной железы.

Все ферменты плазмы делят  на универсально распространенные (АсТ, АлТ, ЛДГ и др.) и орагноспецифические, или тканеспецифические (КК, ФМФ-А и др.). В печени содержатся в основном АлТ, АсТ, ЛДГ, ЛАП, ЩФ.

Диагностическая ценность энзимных тестов достаточно высока; она  зависит как от специфичности  данного вида гиперферментемии для определенных болезней, так и от степени чувствительности теста, то есть кратности возрастания активности фермента при данном заболевании относительно нормальных значений. Однако большое значение имеет время постановки теста, так как появление и продолжительность гиперферментемии после повреждения органа различны и определяются соотношением скорости поступления фермента в кровоток и скорости его инактивации.

При отдельных заболеваниях надежность их диагностики может  быть повышена исследованием не одного, а нескольких изоферментов. Так, например, достоверность диагноза острого инфаркта миокарда возрастает, если в определенные сроки отмечено повышение активности креатинфосфокиназы, лактатдегидрогеназы и аспарагиновой аминотрансферазы. Степень выявляемой гиперферментемии объективно отражает тяжесть и распространенность повреждения органа, что позволяет прогнозировать течение заболевания.

2. Заболевания печени

Невозможно найти такое  звено обмена веществ в организме, которое так или иначе не было бы связано с процессами, протекающими в печени.

Важнейшее значение печени в обмене веществ во многом определяется её связующей ролью между портальным и общим кругом кровообращения. Большая  часть веществ, абсорбирующихся  в кишечнике, проходит через печень. Однако следует заметить, что, хотя нейтральные жиры и поступают в печень непосредственно по системе воротной вены, всё же транспорт большинства липидов, в основном, осуществляется через лимфатическую систему с дальнейшим поступлением их в кровяное русло.

Одной из многочисленных функций печени является первичная регуляция содержания в крови веществ, поступающих в организм с пищей. Несмотря на то, что всасывание питательных веществ из кишечника в кровь происходит прерывисто, непостоянно (и потому в портальном круге кровообращения могут наблюдаться изменения концентрации ряда веществ: глюкозы, аминокислот и др.), в общем же круге кровообращения изменения в концентрации указанных соединений незначительны, благодаря важной роли печени в поддержании постоянства внутренней среды организма. Печень выполняет также крайне важную экскреторную функцию, теснейшим образом связанную с ее участием в детоксикационных процессах.

Многообразие функций  печени находит отражение в обилии лабораторных исследований, предложенных для оценки функционального состояния этого органа. Необходимо подчеркнуть, что ни в одном органе разграничение нормы и патологии не представляет таких трудностей, с какими приходится сталкиваться при исследовании функции печени. Следует иметь в виду очень большую регенерирующую способность печени, позволяющую ей длительное время компенсировать патологический процесс. Не всегда при том или ином патологическом процессе изменены все функции печени, нарушение может касаться лишь одной или некоторых из них.

Основная часть клеточного состава печени образована печеночными или полигональными клетками (гепатоцитами). Около трети всех клеток печени приходится на долю клеток ретикулоэндотелиальной системы – купферовских клеток. Эти клетки захватывают из протекаюшей через печень крови чужеродные вещества; в них также происходит разрушение эритроцитов.

Наряду с печеночными  и купферовскими клетками в печени имеется и небольшое количество соединительнотканной стромы. Она состоит, главным образом, из коллагена. При некоторых патологических процессах (циррозы) относительное содержание в печени соединительной ткани значительно увеличивается, что оказывает прессорный эффект на кровеносные сосуды и нарушает отток желчи; особенно сильно при этом страдает портальное кровообращение.

Около 70% массы печени составляет вода, содержание которой подвержено значительным колебаниям как в норме, так и особенно при патологических процессах, что указывает на активное участие печени в регуляции водно-солевого гомеостаза. При отеках количество воды может составлять до 80% массы органа; при избыточном отложении жира в печени количество воды может существенно снижаться.

Около половины сухого остатка  ткани печени приходится на белки, причем из них большую часть составляют глобулины. Остальные белки представлены альбуминами, нуклеопротеидами и коллагеном. Из белков, специфических для печени, а также для селезенки и костного мозга, следует отметить хромопротеид ферритин, содержащий железо.

Печень очень богата различными ферментными белками. Наряду с ферментами, имеющимися и в других органах, печень содержит ферменты, присущие только ей. К их числу, в частности, относятся ферменты, вызывающие распад цистеина и гистидина, а также катализирующие синтез мочевины, метилирование гуанидинуксусной кислоты, отщепление фосфорной кислоты от глюкозо-6-фосфата, образование эфиров глюкуроновой кислоты. Повышенная активность некоторых ферментов в крови новорожденных может быть обусловлена повышенной проницаемостью клеточных мембран, и по мере снижения проницаемости активность таких ферментов приближается к нормативам взрослых. Так, в частности, это установлено для аспартатаминотрансферазы (АсТ) и фруктозодифосфатальдолазы. Снижение активности этих ферментов в крови отмечается у здоровых детей после 6 мес. жизни, хотя в печени она остаётся высокой.

Печень является депо для полисахарида гликогена. При  тяжелых паренхиматозных поражениях количество гликогена в печеночных клетках резко снижается. И, наоборот, при различных типах гликогеновой болезни (гликогенозы) оно увеличивается, доходя до 20% и более от массы печени.

В химическом составе  печени определенное место занимают липиды: нейтральные жиры (триглицериды), фосфолипиды, липоид холестерин и др. При выраженном ожирении содержание липидов может достигать 20 % от массы  органа, а при жировом перерождении печени количество липидов в этом органе может составлять 50% от его сырой массы. При некоторых патологических процессах в печени возрастает содержание продуктов обмена жиров и липоидов. Так, при болезни Нимана-Пика происходит отложение в печени, а также в селезенке сфингомиелина, при болезни Гоше – накопление цереброзида керазина.

Печень чрезвычайно  богата различными витаминами, особенно это касается витаминов А, С, РР, пантотеновой кислоты, в меньшей степени – витаминов В₆, Е и В₂. Важнейшую роль играет печень в образовании метаболита витамина D₃ – его транспортной формы 25-гидроксихолекальциферола (25-ОН-D3).

Разнообразен и минеральный  состав печени. В ней содержатся Nа, К, Са, Mg и ряд микроэлементов: Fe, Zn, Cu, Mn, Аs и др. Количество железа, меди, марганца и мышьяка превышает содержание этих элементов в других органах. При ряде патологических процессов содержание отдельных элементов может значительно изменяться.

Печень играет ключевую роль в обмене белков. В этом направлении она выполняет следующие основные функции: синтез специфических белков плазмы; образование мочевины и мочевой кислоты; синтез холина и креатина; трансаминирование и дезаминирование аминокислот, что весьма важно для взаимных превращений аминокислот, а также для процесса глюконеогенеза и образования кетоновых тел. Все альбумины плазмы, 75 – 90% a-глобулинов и 50% b-глобулинов синтезируются гепатоцитами. Лишь g-глобулины продуцируются не гепатоцитами, а звездчатыми ретикулоэндотелиоцитами печени (клетками Купфера). Следует, однако, подчеркнуть, что в большинстве своём g-глобулины образуются вообще вне печени.

Печень является единственным органом, где синтезируются такие  важные для организма белки, как  протромбин, фибриноген, проконвертин и проакцелерин. Нарушение синтеза ряда белковых факторов системы свертывания крови при тяжелых заболеваниях печени может приводить к геморрагическим явлениям.

При поражениях печени нарушается процесс дезаминирования аминокислот, что приводит к увеличению их концентрации в крови и моче. Так, если в норме содержание азота аминокислот в сыворотке крови составляет примерно 2,9-4,3 ммоль/л, то при тяжелых заболеваниях печени (атрофические процессы) эта величина возрастает до 21 ммоль/л, что обусловливает выраженную аминоацидурию. К примеру, при острой атрофии печени содержание тирозина в суточной моче может достигать 2 г (при норме 0,02 – 0,05 г/сут).

Кроме дезаминирования, аминокислоты подвергаются в печени переаминированию. Процесс переаминирования (трансаминирования) не является специфическим для печени, он происходит и в других органах, но в печени интенсивность этих ферментативных реакций весьма значительна. В крови повышение активности трансаминаз (АлТ – аланинаминотрансферазы, АсТ – аспартатаминотрансферазы) наблюдается при различных деструктивных изменениях, например при инфарктах миокарда и при гепатитах. Очень важна специфичность данной энзимодиагностики: с помощью этих ферментативных реакций можно с высокой степенью достоверности судить о поражении указанных органов. При некротических изменениях в сердечной мышце в крови резко повышается активность АсТ, в то время как при гепатите отмечается возрастание активности АлТ. Причем весьма важным является то, что определение активности трансаминаз позволяет обнаружить патологию печени ещё в дожелтушный период.

Не менее ценным для  органоспецифической энзимодиагностики  поражения печени имеют исследования изоферментного спектра лактатдегидрогеназы (ЛДГ) сыворотки крови: так, увеличение активности пятой фракции ЛДГ (ЛДГ-5) в изоэнзимном спектре с достоверностью свидетельствует о деструктивных процессах в печеночной ткани, а нарастание активности ЛДГ-1 – о повреждении миокарда. Но существуют различия и в субклеточном распределении изоферментов ЛДГ, которое зависит от специфичности функций органелл клетки. Так, митохондрии гепатоцитов, где, в основном, происходят энергетические процессы в печени и высок уровень кислорода, богаты ЛДГ-1 и ЛДГ-2, тогда как ЛДГ-4, ЛДГ-5, в основном, сосредоточены в цитоплазматической фракции гепатоцитов.

Большая часть мочевой кислоты также образуется в печени, где много фермента ксантиноксидазы, при участии которого оксипурины (гипоксантин и ксантин) превращаются в мочевую кислоту. Важна роль печени и в синтезе креатина. Синтезированный в печени креатин с током крови поступает в мышечную ткань; здесь креатин, фосфорилируясь, превращается в креатинфосфат, а последний далее преобразуется в креатинин.

Ферментные системы  печени участвуют в подавляющем  большинстве реакций метаболизма  липидов. Эти реакции обеспечивают течение таких процессов, как синтез жирных кислот, триглицеридов, фосфолипидов, холестерина (относящегося к липоидам) и его эфиров, а также липолиз триглицеридов, окисление жирных кислот, образование ацетоновых (кетоновых) тел, синтез плазменных липопротеидов. С 6-го месяца внутриутробной жизни жировая ткань плода начинает собственный синтез жирных кислот; он более интенсивен, чем у матери, и снижается после рождения, особенно в печени.

Считается, что при  недостатке в пище липотропных веществ, наряду с накоплением в печени нейтральных жиров, количество гликогена уменьшается. Наступает диффузный фиброз, ведущий к тяжелым функциональным расстройствам. На ранних стадиях заболевания, когда фиброз еще не развился, жировая инфильтрация может подвергнуться обратному развитию при достаточном поступлении в организм липотропных веществ.

Жировая инфильтрация печени может быть вызвана усиленным  транспортом жиров из жировых  депо в печень в связи с энергетическими  нуждами организма в тех случаях, когда организм не может получать энергию за счет распада углеводов. Таков механизм жировой инфильтрации имеет место при голодании. Этот же компенсаторный механизм действует при сахарном диабете и при некоторых других патологических процессах.

Кроме того, жировая инфильтрация печени может наблюдаться при усилении синтеза жиров из углеводов, что имеет место при избыточном содержании углеводов в пище. При ряде патологических состоянии (например, при алкоголизме) жировое перерождение печени может быть обусловлено поражением клеток паренхимы печени.

Расстройства печени так же многочисленны, как и ее функции. При заболеваниях печени сам  орган может быть поврежден, так  как нагрузка на него сильно повышается. Можно выделить основные заболевания печени: гепатит острый и хронический, вирусный, аутоиммунный и лекарственный, цирроз печени, рак печени.

Гепатит – воспаление печени. Существует несколько форм этого заболевания: вирусный гепатит А, вирусный гепатит В, С, Д, гепатит острый, хронический, аутоиммунный гепатит, лекарственный гепатит.

Вирусные гепатиты:

• Вирус гепатита А проникает в кишечник, а оттуда в печень. Этой инфекционной болезнью, заразится может любой, кто находится в контакте с уже больным гепатитом А человеком. Профилактика распространения болезни – карантин и индивидуальные предметы домашнего обихода, посуда, полотенца и так далее. Инкубационный период гепатита А может длится до 50-ти дней.
• Вирус гепатитов В, С и Д проникают в организм через кровь и прочие выделения организма, такие как сперма, слюна и тому подобное. Инкубационный период в данном случае может длиться до полугода. Классические симптомы любого из вирусных гепатитов: желтуха – то есть окраска кожи и белков глаз в желтый цвет, более светлый цвет кала, быстрая утомляемость, повышенная температура.

Перед этим могут наблюдаться ощущения, сходные с теми, которые испытывают при простудных заболеваниях, боли в суставах, проблемы с пищеварением. Лечение гепатита медикаментозное. При этом от острого гепатита А излечивают практически всегда, а вот гепатиты В, С и Д чаще всего становятся хроническими заболеваниями. Последние могут как проявляться в тяжелой форме, так и не проявляться вообще.

Хронический гепатит  приводит к серьезным нарушениям в работе печени. Он ведет также  к перестройке нормального клеточного строения печени, из-за чего формируются узлы, которые сдавливают кровеносные сосуды и желчевыводящие пути, находящиеся внутри самой печени. Все это, что еще более ухудшает работу органа, называется циррозом печени.

Самая лучшая профилактика гепатита для людей, чьи профессии отнесены к повышенной группе риска (врачи, средний медперсонал), это прививка от гепатита. Существуют вакцины от гепатата А и В, стопроцентно гарантирующие невозможность заражения. Наиболее важно вакцинироваться от гепатита В.

Аутоиммунный гепатит – постоянно прогрессирующее воспаление ткани печени, причина которого – аутоиммунные нарушения. Этиология аутоиммунного гепатита пока не понятна. На нынешний день, диагноз помогает установить обнаружение в сыворотке крови таких антител, как ANA, SMA, LKM, SLA, LMA.

Аутоиммунный гепатит постоянно  прогрессирует, и может поражать не только печень, но и другие органы. Способы профилактики неизвестны. Лечение как медикаментозное, так и иное.

Лекарственный гепатит является результатом  лечения медикаментами. Он развивается вследствие токсического воздействия лекарственного препарата на печеночную клетку. Сейчас известно больше тысячи лекарств, которые могут вызвать лекарственные гепатиты. В таких случаях проявления гепатита поначалу незаметны из-за основного заболевания, которое и лечится лекарствами. Профилактики не существует, а лечением является отмена медикаментов, вызвавших лекарственный гепатит.

Цирроз печени. Это хроническое  заболевание, являющееся результатом  прогрессирующего поражения печени, вследствие чего перестраивается полностью ее ткань, и нарушаются все функции. Причиной цирроза печени зачастую являются вирусный гепатит и хронически алкоголизм. Лечится либо диетой, либо медикаментами.

Рак печени заболевание довольно редкое. От всех случаев рака составляет примерно 0,3%. Его появлению способствует вирусный гепатит и цирроз печени, неблагоприятная экологическая обстановка, вредные привычки. Профилактика рака печени это вакцинация от гепатита и отказ от курения и алкоголя. Лечат рак печени посредством оперативного вмешательства, химиотерапии, лучевой терапии и лекарств.

3. Методы энзимодиагностики заболеваний печени

Органоспецифическими ферментами для печени являются:

• аланинаминотрансфераза (АлТ);
• аспартатаминотрансфераза (АсТ);
• лактатдегидрогеназа (ЛДГ);
• лейцинаминопепитдаза (ЛАП);
• щелочная фосфотаза (ЩФ).

Для исследования активности ферментов чаще всего используются плазма или сыворотка крови. В  процессе свертывания крови и  последующей ретракции сгустка  высвобождаются содержащиеся в тромбоцитах  биологически активные вещества, под влиянием которых возрастает активность многих энзимов. Происходящее при этом разрушение форменных элементов (эритроцитов и др.) крови обусловливает дальнейшее увеличение ферментативной активности, оказывающейся, как правило, в сыворотке более высокой, чем в плазме. Этим, в частности, объясняется известное предостережение не допускать гемолиза, например, при исследовании активности лактатдегидрогеназы крови.

Хранение сыворотки, как правило, сопровождается снижением активности ферментов. Для большинства из них активность не изменяется при комнатной температуре в течение 6-8 ч, около недели – при 40 ⁰С и на протяжении одного месяца – в замороженном состоянии. Следует учитывать, что многие антикоагулянты способны ингибировать (иногда, напротив, усиливать) деятельность ферментов. Известно, например, что оксалаты подавляют активность ЛДГ, в то время как салицилаты повышают активность аминотрансфераз.

Используемые в клинико-диагностических лабораториях методы определения активности ферментов могут быть разделены на две основные группы:

а) состоящие в определении  конечного продукта, образовавшегося  после известного периода инкубации  ферментного препарата (обычно сыворотки) с субстратом в соответствующем буфере;

б) методы, с помощью  которых в ходе ферментативной реакции  непрерывно или периодически определяют потребление субстрата, кофермента либо образование метаболита. Методы этой группы называются кинетическими, или методами непрерывной регистрации.

В зависимости от особенностей принципа исследования, положенного  в основу определения активности энзимов, способы их осуществления  подразделяются на несколько групп:

1. Без использования  НАД и НАД-Н2 (пиридинкоферментов).

Среди них различают колориметрические, титриметрические, газометрические, электрохимические, флюориметрические, изотопные, с использованием инфракрасной спектроскопии, электронного парамагнитного резонанса.

Наиболее распространены колориметрические каталитические методы (определение активности щелочной и кислой фосфатаз, липазы, холинэстеразы, лейцинаминопептидазы, гамма-глутамилтранспептидазы). В последнее время широко применяются методы исследования с использованием хромогенных субстратов (определение фибриногена и др.).

Флюориметрические методы обычно в 100-1000 раз чувствительнее колориметрических и поэтому прежде всего годятся для ультрамикроанализа ферментов в микроскопических биоптатах (кусках) ткани.

Из титриметрических методов известны способы определения активности липазы и холинэстеразы (с помощью pH-электрода).

Среди электрохимических  методов чрезвычайно распространены те, при которых продукт ферментативной активности непосредственно определяется стеклянным селективным электродом.

Таким способом можно  устанавливать активность холинэстеразы (с использованием селективного на ацетилхолин электрода), гуаназы (селективным на аммиак электродом), оксидазы (селективным на кислород электродом) и так далее.

2. Каталитические методы, базирующиеся на применении пиридинкоферментов (НАД, НАД-Н2).

Из этой rpуппы чаще всего используют методы, основывающиеся на оптическом тесте Варбурга. Сопряжение реакции образования коферментов с превращением формазана позволяет учитывать ход реакции в видимой области спектра. По такой технологии анализируется активность свыше 100 ферментов.

3. Некаталитические методы, позволяющие непосредственно определять  концентрацию фермента, независимо  от его каталитической активности. С помощью их выявляется содержание  многих апоферментов. Концентрацию энзимов устанавливают чаще всего иммунологическими методами (например, определение МВ-изофермента креатинкиназы).

Весьма перспективен способ аффинной хроматографии и  некоторые другие.

 Активность ферментов выражается количеством разрушенного субстрата или образованного в ходе реакции продукта (в моль, ммоль, мкмоль и т.д.) В пересчете на один литр сыворотки (плазмы) крови при температуре 37, 30, 25⁰С (SI) либо в международных единицах (Е/л, U Л), а также в кагалах (долях катала) на литр, например мккат/л (1 мккат = 60 U; 1 U = 16,67 • 10^-3 мккаг). Одна единица (U) какого-либо энзима – есть то его количество, которое катализирует трансформацию 1 мкмоль субстрата за 1 мин при определенных условиях.

 В настоящее время представляется актуальным исследование активности ферментов не только в плазме крови, но также в моче и других биологических жидкостях.

Определение активности аспартатаминотрансферазы (АсТ) и аланинаминотрансферазы (АлТ). При участии аминотрансфераз в организме человека осуществляются процессы межмолекулярного переноса аминогрупп с донорской гамма-аминокислоты на акцептор – альфакетокислоту без промежуточного образования аммония, то есть трансаминирование.

Трансаминирование играет ключевую роль в промежуточном обмене, так как обеспечивает синтез и разрушение отдельных аминокислот в организме. Три аминокислоты: глутаминовая, аспарагиновая и аланиновая – благодаря трансаминированию превращаются в соответствующие альфа-кетокислоты, являющиеся компонентами цикла трикарбоновых кислот. Окисляясь в нем, они служат источником энергии.

Практическое применение в медицине нашло определение активности аспартат- и аланинаминотрансферазы.

Простетической группой или коферментом обоих энзимов служит пиридоксальфосфат, осуществляющий перенос аминогруппы за счет способности образовывать пиридоксаминовые производные с аминокислотами. Оба фермента – аспартатаминотрнасфераза и аланинаминотрансфераза – широко распространены в тканях человеческого организма.

Аспартатаминотрансфераза – белок с молекулярной массой 110 000 Д. Наибольшее количество фермента аланинаминотрансферазы содержится в печени.

Аспартатаминотрансфераза представлена отдельными изоэнзимами, составляющими две основные формы фермента – митохондриальную и растворимую, содержащиеся как в митохондриях, так и в цитоплазме.