Амебная дизентерия

Новосибирский государственный  аграрный университет

Факультет ветеринарной медицины

Кафедра ветеринарно-санитарной экспертизы и паразитологии

 

 

 

 

 

 

Реферат на тему:

Амебная дизентерия

 

 

 

 

Выполнила:

студентка 6405 группы,

Изосимова Я.А.

Проверила:

к.в.н., доцент,

Борцова М.С.

 

 

 

 

Новосибирск 2012

Содержание

Введение 3

1. Морфология  и жизненный цикл возбудителя 5

2. Распространенность 8

3. Патогенез  и иммунитет 8

4. Клинические  проявления 11

5. Клиническая  и лабораторная диагностика 13

6. Дифференциальная  диагностика E.histolytica от E.coli: 16

7. Лечение 18

8. Эпидемиология 19

9. Профилактика 20

Заключение 21

Библиографический список 22

 

 

 

 

Введение

Амебиаз (амебная дизентерия E.histolytica).

Описание клиники амебной дизентерии встречается уже в трудах великого древнегреческого целителя Гиппократа; в средние века Авиценна в своем “Каноне” приводит клиническую характеристику заболевания, сопровождающегося кровавым поносом и язвенным поражением толстого кишечника - заболевания, неизменно сопутствующего всем войнам, известным в истории человечества. Вероятнее всего, этим можно объяснить тот факт, что честь открытия возбудителя амебиаза принадлежит военному врачу, приват-доценту Военно-медицинской академии в Петербурге, русскому ученому Федору Александровичу Лешу. В 1873 г. он обнаружил амебу (работа опубликована в 1875 г.) у страдающего бактериальной дизентерией и амебиазом больного Маркова, крестьянина из Архангельской области, работающего грузчиком С.-Петербургского порта. Ф.А.Леш впервые дал морфологическое описание вегетативной стадии амебы с фагоцитированными эритроцитами, подробно описал патологоанатомические изменения кишечника при амебиазе. Для доказательства патогенной роли амебы он впервые произвел экспериментальное заражение собак, описал развитие у них клиники острого амебиаза и обнаружил в испражнениях паразитов, по строению и поведению аналогичных амебам, найденных им у больного.

Кроме того Леш впервые  предложил важнейшие методы лабораторной диагностики амебной дизентерии, актуальные и в настоящее время. Найденного им возбудителя Ф.А.Леш  назвал кишечной амебой - Amoeba coli. В 1903 г.

Ф.Шаудин присвоил дизентерийной  амебе название Entamoeba histolytica, с этого  времени Entamoeba coli называют непатогенную амебу, обитающую в кишечнике. Долгое время существовала так называемая “унитарная” теория происхождения вида E. histolytica. Ее создатели утверждали, что все встречающиеся у человека амебы с 4-х ядерными цистами относятся к виду E.histolytica и всегда патогенны для своего хозяина. В дальнейшем накапливалось все больше данных об отсутствии во многих случаях паразитирования E.histolytica патологических изменений в кишечнике. Попытка объяснить это явление была сделана в 1925 г. E.Brumpt, выдвинувшим так называемую “дуалистическую” теорию.

 По мнению французского  паразитолога вид E.histolytica является  сборным и включает в себя  два самостоятельных, но морфологически  тождественных вида, один из которых  - патогенный - он назвал E.dysenteria и  другой - непатогенный - E.dispar. Первый  широко распространен в странах  с тропическим климатом, второй - в средних широтах и на севере. В настоящее время на основании  изучения паразитарных изоэнзимов, полученных в результате электрофореза,  выделяют морфологически сходные,  но различающиеся по патогенности  виды амеб: непатогенную E.dispar, обнаруживаемую  у бессимптомных носителей и  патогенную E.histolytica, обусловливающую различные клинические проявления.  
   
   
   

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1. Морфология и жизненный цикл возбудителя 

Возбудитель амебиаза- E.histolytica относится к подцарству Protozoa, типу Sarcomastigophora, классу Lobosea, отряду Amoebida, семейству Entamoebidae, роду Entamoeba. 

В жизненном цикле E.histolytica различают две стадии: вегетативную стадию или трофозоит - активную, подвижную, размножающуюся и стадиюцисты - неподвижную, не размножающуюся, неспособную к захвату пищевых частиц. Заражение амебами происходит при заглатывании цист, чаще всего с контаминированной водой или пищей. Цисты устойчивы к пребыванию во внешней среде, могут находиться вне организма неделями и даже месяцами, являясь таким образом пропагативной стадией. Эксцистирование происходит в самом начале толстого кишечника, т.е. в слепой кишке, в результате деления ядра и цитоплазмы из одной проглоченной 4-х ядерной цисты образуется 8 трофозоитов. Трофозоиты обитают в проксимальных отделах толстого кишечника, питаясь бактериями и клеточным детритом, размножаясь путем двойного деления. При некоторых неблагоприятных условиях (изменениях пищевого режима, в частности употреблении острой раздражающей пищи, резких температурных колебаниях, изменении состояния микрофлоры кишечника, нарушениях слизистого барьера кишечника, изменении секреторной деятельности пищеварительных органов, авитаминозах, инфекционных и неинфекционных заболеваниях кишечника и других, еще недостаточно изученных факторах) трофозоиты могут внедряться в стенку толстого кишечника, вызывая язвенное поражение и приобретают при этом способность заглатывать эритроциты, превращаясь в гематофаги. Гематофаги выделяются во время острого колита, при нормализации характера стула они инцистируются.

Вегетативная  стадия - гематофаг (тканевая форма) - обнаруживается в свежевыделенных фекалиях больного в острой фазе амебной дизентерии. Гематофаги находят среди одиночно разбросанных эритроцитов, лейкоцитов, а также макрофагов, грибов в виде больших, сильно преломляющих свет образований, имеющих размеры 18-45 мкм, которые при движении могут вытягиваться в длину до 60 мкм и приобретать причудливые очертания. Цитоплазма разделена на внутреннюю зернистую, темную и мутную часть - эндоплазму и наружную, светлую, прозрачную, неравномерной толщины - эктоплазму. В эндоплазме, в пищеварительных вакуолях, находят фагоцитированные эритроциты, часто в таких больших количествах, что придают ей красно-бурый цвет. В зависимости от стадии переваривания эритроциты бывают различных размеров - от величины нормального эритроцита до очень небольших (эритроциты при переваривании как бы тают, не теряя округлую форму).  
При температуре 20° С и выше амебы обладают прогрессивно-поступательным движением, псевдоподии образуются в результате выпячивания эктоплазмы, их возникновение происходит быстро, "взрывом" или толчком. Возникшая псевдоподия увеличивается, в нее переливается эндоплазма и амеба перемещается в направлении образовавшейся псевдоподии. При охлаждении препаратов подвижность амеб сначала замедляется, а затем тело их округляется и все они становятся неподвижными.  
           Ядро микроорганизма находится в эндоплазме. У живых амеб в свежих, неокрашенных препаратах его не видно. При окраске ядро выявляется в виде колечка, образованного мелкими глыбками хроматина, лежащими на внутренней оболочке ядра. 

Просветная форма- имеет размер от 7 до 24 мкм ( в среднем - 13 мкм), форма ее круглая или овальная, деление на два слоя еле заметно, обычно заметно лишь при образовании псевдоподий, формирующихся медленнее, чем у тканевых форм. В эндоплазме имеется большое число вакуолей, содержащих бактерии и детрит, но никогда не содержащих фагоцитированные эритроциты, даже если они есть в кишечном содержимом. Ядро без окраски не видно. Обычно эти формы обнаруживают в небольшом количестве у здоровых носителей при приеме ими слабительных или при развитии диареи, обусловленной иными причинами, так как в оформленных фекалиях просветные формы успевают инцистироваться. Обнаружение просветных форм у пациентов в значительном количестве может свидетельствовать либо о начальной стадии амебной дизентерии, либо о перенесенном в недавнем прошлом обострении хронического амебиаза. В этих случаях, как и при острой амебной дизентерии, наряду с амебами, могут обнаруживаться кристаллы Шарко-Лейдена, имеющие вытянутую ромбовидную форму и разнообразную величину. 

Цисты обнаруживают в оформленных испражнениях у здоровых лиц или у лиц, страдающих рецидивирующим колитом и находящихся в стадии реконвалесценции. Форма цист в большинстве круглая, сферическая, иногда овальная. Диаметр цист - от 8 до 15 мкм, наиболее часто - 11-12 мкм. Мелкозернистая цитоплазма цист окружена хорошо выраженной двухслойной оболочкой, состоящей из хитина и предохраняющей их от некоторых воздействий внешней среды. В цитоплазме цист не находят переваренных частиц, но выявляют гликоген, занимающий ее центральную часть, хроматоидные тела (рибосомы) в виде блестящих палочек с закругленными концами или хорошо преломляющих свет брусочков с закругленными концами. Число их в отдельных цистах колеблется от одного до нескольких штук. Процент цист с хроматоидными телами зависит от степени зрелости цист и времени, прошедшего с момента их выделения из организма. Наиболее часто хроматоидные тела обнаруживаются в свежевыделенных одно- и двуядерных цистах. В зависимости от зрелости в цистах имеется разное число ядер - от 1 до 4-х.

Ядра выявляются в виде колечка, образованного мелкими  глыбками хроматина, лежащими на внутренней оболочке ядра. В центре ядра находится  центральная кариосома в виде яркой блестящей точки.  
   

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

2. Распространенность  

Амебиаз - убиквитарная инфекция, в результате многих наблюдений было установлено, что около 10% мировой популяции инфицировано амебами. Ежегодная заболеваемость кишечным амебиазом составляет около 50 млн. случаев, летальность достигает 100000 случаев, т.е. 0,2% от выявленных случаев. Внекишечный амебиаз составляет лишь около 10% от всех случаев выявленного амебиаза. До 50% всех случаев этой инфекции приходится на развивающиеся страны. Наиболее распространена инфекция в Индии, в Южной Африке, в Западной Африке (Нигерия, Гана, Бенин, Берег Слоновой Кости ), в Корее и Китае, в Южной и Центральной Америке (в Мексике за последние 9-10 лет заболеваемость резко возросла, около 9% населения инфицировано E.histolytica). Широкому распространению там амебиаза способствуют низкий уровень санитарных условий, невысокий социально-экономический статус, скученность жителей, некоторые особенности культурных традиций.

В России случаи амебиаза встречаются  гораздо реже, в основном спорадически, хотя некоторые районы являются эндемичными  очагами амебной инфекции, где  нередко могут встречаться больные  и с внекишечным амебиазом.   

3. Патогенез и иммунитет

 
          Название E.histolytica напрямую связано с литическим действием дизентерийной амебы на ткани. Ее прикрепление (адгезия) к слизистой кишечника происходит за счет паразитарного галактоз-ингибирующего-адгезивного лектина - пептида, который образует поры в слизистой и, таким образом, воздействует на защитную слизь кишечника,. Паразитарный галактоз-ингибирующий-адгезивный лектин содержит поверхностный белок, состоящий из тяжелой (170 КД) и легкой (35 КД) субъединиц. Существует резистентность дизентерийной амебы к комплементу за счет того, что антигенные детерминанты субъединицы 170 КД сходны с таковыми у C8 и C9 системы комплемента. На субъединице 170 КД существует не менее 5 эпитопов, некоторые из них при исследовании с помощью моноклональных антител обнаруживаются только у E.histolytica и не обнаруживаются у E.dispar, что свидетельствует о возможности дифференцировать патогенные и непатогенные виды между собой. Помимо галактоз-ингибирующего-адгезивного лектина у E.histolytica найдено множество гемолизинов, переваривающих эритроциты и протеаз, разрушающих ткань кишечной стенки. У некоторых штаммов E.histolytica обнаружили гиалуронидазу, способствующую проникновению амеб в ткани. Некоторые штаммы продуцируют энтеротоксины, однако их образование прямо не коррелирует с вирулентностью E.histolytica. Трофозоиты дизентерийной амебы обладают способностью осуществлять контактный лизис нейтрофилов, при разрушении которых выделяются монооксиданты, усиливающие начавшееся расплавление тканей хозяина. 

При проникновении E.histolytica в  подслизистый слой происходит интенсивное  размножение паразитов, образуется первичный очаг в виде микроабсцесса, который вскрывается в полость  кишки. Таким образом, сначала возникает  язва небольших размеров. Размножающиеся амебы распространяются по периферии  язвы и проникают вглубь, достигая мышечной стенки. Небольшие язвы, расположенные  вблизи друг от друга, могут сливаться, в результате образуются обширные поражения, имеющие в диаметре несколько  сантиметров. На слизистой кишечника  при остром амебиазе могут обнаруживаться язвы разной величины и формы: от очень  маленьких, еле заметных до обширных фляжкоподобных с неровными подрытыми  краями. Дно язв покрыто некротическими массами. При неосложненном течении  амебиаза слизистая оболочка между  язвами сохраняет обычный вид. Наиболее часто язвенный процесс захватывает  слепую кишку и прилегающую к  ней восходящую часть толстой  кишки. На втором месте по частоте  локализации находятся сигмовидная  и прямая кишка. Нередко процесс  распространяется и на червеобразный  отросток. При тяжелом течении  заболевания амебные поражения  располагаются на всем протяжении толстого кишечника. 

Характерным для амебного процесса является отсутствие синхронности в степени развития язв. На слизистой  кишечника могут быть обнаружены одновременно мелкие эрозии, небольшие  язвы, обширные поражения - до нескольких сантиметров в диаметре ("цветущие язвы"), заживающие язвы и рубцы  после заживших язв. 

При эрозии сосудов слизистой  толстого кишечника трофозоиты E.histolytica попадают в портальную венозную систему, вызывая генерализацию инфекции с наиболее частым поражением печени (правой доли) и легких, реже других органов, где могут развиваться амебные абсцессы. 
        Инфицирование организма E.histolytica сопровождается выработкой специфических Ат. Сыворотки от больных амебиазом и инфицированных E.histolytica лиц, имеющих высокие титры специфических Ат, тормозят адгезию амеб к клеткам и лизируют трофозоиты in vitro, за счет активации системы комплемента по классическому и альтернативному пути. Секреторный противоамебный IgA обнаруживают при инвазивном амебиазе и в слюне, и в грудном молоке пациентов. Несмотря на раннее появление специфических Ат (при амебном абсцессе печени высокие титры Ат обнаруживаются уже на 17 день болезни) и длительное (до 10 лет) персистирование их в организме, патологический процесс, сопровождающий развитие амебного абсцесса печени, неуклонно прогрессирует. Возможно, это объясняется тем, что имеющийся у трофозоитов амеб протеазный ингибитор - паразитарная цистеинпротеаза, быстро снижает количество сывороточных и секреторных Ig. Тем не менее значение специфических противоамебных антител нельзя умалять полностью: в опытах на животных было показано, что иммунизация специфическими Ат, содержащимися в сыворотке больных людей с амебным абсцессом печени, существенно ограничивала развитие амебного абсцесса печени у экспериментальных животных.

Последний факт вселяет надежду  на возможное получение вакцины  против E.histolytica. 

В ограничении распространенности патологического процесса при инвазивном амебиазе немаловажная роль принадлежит  клеточным механизмам иммунной защиты. Амебоцидная активность макрофагов стимулируется (-интерфероном; фактор некроза опухолей (ФНО) усиливает  амебоцидную активность нейтрофилов. В опытах in vitro было обнаружено цитотоксическое  действие CD8+лимфоцитов на трофозоиты E.histolytica при их совместной инкубации. Однако, как было установлено, при  развитии острого инвазивного амебиаза активность Т-клеточного звена иммунной защиты снижается за счет выработки  специфического сывороточного фактора, индуцированного паразитом. Все  же клеточный иммунитет имеет  определенное значение в сдерживании  амебной инфекции, о чем косвенно может свидетельствовать тяжелое  течение амебной инфекции на фоне лечения кортикостероидами, приводящее к депрессии клеточного иммунитета. В пользу этого же положения могут  служить случаи молниеносного течения  амебиаза у недоношеннных детей  и беременных женщин, страдающих в  первую очередь от клеточного иммунодефицита.  
             В целом, как отмечает большинство исследователей, приобретенный в результате болезни иммунитет при амебиазе является нестойким и нестерильным, не предотвращая пациентов ни от рецидивов, ни от реинфекции.  

 

 

 

4. Клинические проявления  

Общепринятой классификации амебиаза до настоящего времени не имеется. Большинство предложенных не охватывает всего многообразия клинических форм или отличается громоздкостью. Наиболее удовлетворяющей всех схемой является деление амебиаза на кишечный и внекишечный амебиаз.  
           Кишечный амебиаз в свою очередь подразделяется на следующие формы:  
1. асимптомная инфекция;

2. амебная дизентерия;

3. молниеносный колит  с перфорацией кишечника; 

4. токсический мегаколон; 

5.хронический амебный колит;

6.амебома;

7.перианальное.

 Внекишечный амебиаз подразделяется на: 1.амебный абсцесс печени; 2. амебный абсцесс печени в сочетании с перитонитом; 3. амебный абсцесс печени, осложненный эмпиемой плевры; 4.амебный абсцесс печени, осложненный перикардитом; 5. амебный абсцесс легкого; 6. амебный абсцесс мозга; 7. мочеполовой амебиаз.         

В странах, где амебиаз  представляет собой важную проблему здравоохранения (страны с эндемичным распространением инфекции) большинство (приблизительно 90%) населения, зараженного E.histolytica, являются носителями, т.е. не имеют  практически никаких признаков  кишечной инфекции, тогда как остальные 10% страдают от инвазивного кишечного  амебиаза. 

Продолжительность инкубационного периода при остром кишечном амебиазе от нескольких дней до нескольких месяцев. Действительную продолжительность  инкубационного периода установить в естественных условиях трудно, а  зачастую невозможно. Продромальный  период выражен неотчетливо. За несколько  дней до заболевания больные отмечают увеличивающееся недомогание, снижение аппетита, боли в животе разлитого  характера. Болезнь начинается постепенно. Появляется учащенный стул, обычно не больше 3-5 раз в сутки, редко  до 10-15 раз в сутки. Фекалии сначала  носят каловый характер, полуоформленные  или жидкие, потом к ним примешивается  слизь, количество которой день ото  дня увеличивается. Затем появляются прожилки крови, которые пропитывают  слизь, придавая ей характерный при  амебной дизентерии вид "малинового желе". При развитии язвенного  процесса больные жалуются на тенезмы, носящие порой мучительный характер; при пальпации живота отмечается вздутие и спастические сокращения слепой и толстой кишки, болезненность  по ходу толстого кишечника. Для острой амебной дизентерии не характерна высокая  лихорадка, температура, как правило, нормальная или повышается до субфебрильных  цифр. Зачастую амебная дизентерия протекает стерто, с малой выраженностью  клинических проявлений, вызывая  серьезные затруднения у клиницистов  в плане дифференциального диагноза ее с другими заболеваниями.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

5. Клиническая и лабораторная диагностика  

В подавляющем большинстве случаев инвазивного амебиаза с локализацией поражений в толстой кишке наиболее надежными диагностическими процедурами представляются ректороманоскопия с немедленным микроскопическим исследованием ректальных мазков (эффективно для постановки диагноза в случаях, когда поражения слизистой находятся в нижних отделах толстого кишечника - прямая и сигмовидная кишка) и/или свежих проб фекалий на наличие подвижных трофозоитов E.histolytica гематофагов. Паразитологический диагноз должен выполняться лаборантами, хорошо квалифицированными в этой области.  
Основными методами являются исследование нативного неокрашенного мазка и свежего мазка, окрашенного йодом. Промежуток времени от момента выделения фекалий до исследования не должен превышать 15-20 мин. Под термином "теплые фекалии" следует понимать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но не подогретые искусственно. Если препараты фекалий не могут быть просмотрены немедленно, материал следует заключить в поливиниловый спирт или заморозить, так как при комнатной температуре трофозоиты разрушаются через 30 мин. Исследуемый материал должен собираться в чистую сухую посуду, стерилизованную кипячением, так как вегетативные формы амеб весьма чувствительны к химическим веществам (дезсредствам). Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При осмотре отмечают консистенцию, наличие крови и слизи. В первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии со слизью и кровью, так как в них есть основание предполагать наличие вегетативных форм амеб. Практически у всех больных с острым амебным колитом реакция на скрытую кровь положительна. Учитывая, что проведение этого теста несложное, его следует рекомендовать в тех случаях, когда вероятность диагноза амебной дизентерии высока, а в фекалиях больного макроскопически прожилки крови не определяются. Жидкие кровянисто-слизистые фекалии могут быть исследованы без добавления физиологического раствора. В оформленных фекалиях обнаруживают только цисты, в таких случаях мазок приготавливают с добавлением физиологического раствора.

Наиболее часто применяют  метод отстаивания или метод  центрифугирования (формалин-эфирного осаждения). Характеристика вегетативных форм и цист E.histolytica в нативных мазках приведена в разделе "Морфология". В свежих, окрашенных раствором Люголя, препаратах вегетативные формы теряют подвижность, приобретая круглую форму. Цитоплазма окрашивается в коричневый цвет. Если ядро располагается близко к поверхности, его можно заметить в виде кольца, окрашенного в более светлый цвет, чем цитоплазма. В центре маленькая кариосома в виде блестящей точки. 

В препаратах, окрашенных раствором  Люголя, цисты правильной круглой  формы, иногда овальные, с гладкой  оболочкой желтого со светло-коричневым оттенком цвета. Размеры цист 10-15 мкм. Мелкозернистая цитоплазма окрашивается в равномерный золотисто-коричневый цвет, видны ядра: одно или два  в незрелых цистах и четыре - в  зрелых. Для правильного подсчета ядер необходимо непрерывно вращать  микровинтом, так как ядра редко  лежат в одной плоскости. Ядра правильной круглой формы с тонким ободком и точечной кариосомой в  центре. Гликогеновая вакуоль окрашивается в светло-бурый цвет, она имеет  расплывчатые контуры и не резко  отграничена от цитоплазмы. В молодых  цистах гликогена много. Хроматоидные тела представлены в виде бесцветных и блестящих глыбок и брусочков  с тупыми закругленными концами. 

Исследование свежих препаратов (нативный препарат и окрашенный раствором  Люголя) должно применяться при каждом анализе на простейшие кишечника. В некоторых случаях для уточнения морфологических признаков обнаруженных амеб пользуются методом исследования постоянных, окрашенных железным гематоксилином по Гайденгайну, препаратов.  
Вегетативные формы дизентерийной амебы в препаратах, окрашенных по Гайденгайну, хорошо выделяются на фоне многочисленных эритроцитов, отдельных лейкоцитов и бактерий. Размеры трофозоитов варьируют от 12-25 до 22-45 мкм в диаметре, в среднем около 23 мкм. Форма амеб вытянутая, часто округлая, в большинстве случаев хорошо обнаруживается светло-серая гомогенная эктоплазма и мелкозернистая темно-серая эндоплазма. Ядро круглое, пузырьковидное, с темной оболочкой, под которой в один слой располагаются мелкие, одинаковой величины, правильной формы зернышки периферического хроматина. В центре ядра находится точечная кариосома. В препаратах могут встречаться амебы на различных стадиях дегенерации. Цитоплазма грубо вакуолизирована, ядро уплотнено (пикнотическое), темно-окрашенное.  
           В мелких просветных формах дизентерийной амебы при окраске по Гайденгайну, зерна периферического хроматина нередко образуют серповидное скопление под ядерной оболочкой, что отличает его от ядра тканевой формы. Цисты при окраске железным гематоксилином имеют общий вид и размеры такие же, как и окрашенные раствором Люголя. В одном и том же препарате могут быть обнаружены незрелые одно- и двуядерные цисты и зрелые четырехядерные. Размеры ядер в цистах различной степени зрелости неодинаковые: в одноядерных цистах ядро крупное (3-5 мкм), в двуядерных ядра средней величины (2-4 мкм), в четырехядерных - самые мелкие (2-3 мкм). Как и в ядрах тканевых форм зерна периферического хроматина также располагаются под ядерной оболочкой тонким равномерным слоем. В цитоплазме многих цист обнаруживаются хроматоидные тела в виде коротких толстых палочек с закругленными концами.

В наибольшем количестве они  содержатся в одноядерных цистах, в наименьшем - в четырехядерных. Можно производить окраску препаратов фекалий ускоренным методом по Гурвичу: на фиксированный мазок наливают 3% раствор железоаммиачных квасцов и подогревают до появления паров, споласкивают в дистиллированной воде , наливают на стекло гематоксилин и также нагревают до появления паров, снова споласкивают в дистиллированной воде и дифференцируют обычным методом в 1,5-2% железоаммиачных квасцах, затем промывают в проточной воде, проводят через спирты, ксилол, заключают в канадский бальзам.

Приготовленные таким  образом препараты кишечных простейших исследуют с иммерсионной системой. В ряде случаев дизентерийную  амебу необходимо дифференцировать от непатогенных амеб, в основном от кишечной амебы.  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

6. Дифференциальная диагностика E.histolytica от E.coli:  

1. В цитоплазме вегетативной  формы E.coli вакуоли заполнены большим  количеством бактерий, пищевого  детрита и грибов. Цитоплазма  грубоячеистая, разграничение ее  на эктоплазму и эндоплазму  обычно незаметное. Движение кишечных  амеб крайне вялое, почти незаметное. В неокрашенных препаратах у  кишечных амеб в отличие от E.histolytica обнаруживаются ядра пузырьковидной  формы. Под оболочкой ядра в  виде отдельных глыбок неодинаковой  величины и различной формы  располагаются зерна периферического  хроматина. Кариосома круглая,  крупнее, чем у E.histolytica, располагается  экцентрично. 

2. Цисты E.coli по форме  не отличаются от цист дизентерийной  амебы, однако овальные среди  них встречаются гораздо чаще. Размеры цист более крупные  - 10-30 мкм (в среднем 18 мкм), незрелые  цисты обычно двуядерные, зрелые - восьмиядерные. Ядра круглые,  реже овальные, крупноточечная кариосома  располагается в них эксцентрично. При окраске с раствором Люголя  в незрелых цистах обнаруживается  резко контурированная темно-бурая  гликогеновая вакуоль, оттесняющая  цитоплазму и ядра на периферию.  Хроматоидные тела имеют вид  относительно длинных тонких  темных палочек, с заостренными  или оскольчатыми концами.

В связи с установленными недавно двумя видами дизентерийной  амебы обнаружение в препарате  фекалий только цист и/или просветных вегетативных форм (при отсутствии гематофагов) не является основанием для  диагноза "амебная дизентерия" - это вероятнее всего недифференцированный "амебиаз" или цистоносительство (лабораторный диагноз: E.histolytica/E.dispar). 

Применение рентгенологических методов исследования кишечника, особенно с использованием бария для диагностики  инвазивного амебного колита не рекомендуется  из-за риска перфорации кишечника  и неспецифичности признаков, обнаруженных в случае "амебом". Очень точным методом верификации диагноза амебного колита является колоноскопия с биопсией язвенных поражений. Особенно эффективно исследование биоптатов с обнаружением гематофагов при локализации  поражений в восходящих отделах  кишечника, в то время как микроскопия  фекалий в таких случаях, как  правило, бывает безуспешна.  
Серологические тесты на противоамебные антитела дают положительные результаты приблизительно в 75% случаев инвазивного амебиаза с локализацией в толстой кишке. Серологическая диагностика весьма информативна для дифференцирования E.dispar от E.histolytica: при инфекции E.dispar специфические антитела не образуются, в отличие от инфекции, вызванной E.histolytica, при которой даже асимптомные носители являются серопозитивными. К наиболее распространенным методам серологической диагностики относятся РНГА, РЭМА, РНИФ, ВИЭ и РИД.

Среди последних современных  методов диагностики амебного колита применяют выявление Аг E.histolytica в  фекалиях или в сыворотке с  помощью моноклональных антител; обнаружение  паразитарной ДНК при помощи ПЦР. Определение разницы в эпитопах при выделении галактоз-ингибирующего-адгезивного  лектина позволяет отдифференцировать морфологические сходные между  собой E.histolytica от E.dispar.  
В случае внекишечного амебиаза исследование фекалий, как правило, дает отрицательный результат. Для постановки диагноза необходимо комплексное инструментальное обследование с учетом специфической локализации поражения, обусловленного E.histolytica. К сожалению, пункция и дренирование полости абсцесса с целью получения материала для исследования, как правило, малоинформативна, так как в таком материале обычно не находят возбудителя амебиаза. 

Дифференциальный  диагностический алгоритм для больных  с предполагаемым амебным абсцессом печени при наличии эпидемиологических предпосылок и характерной клиники заключается в следующем: 

1. Обязательное проведение  УЗИ брюшной полости. При получении  отрицательного ответа - желательна  КТ или сцинтиграфия печени. Если  результат отрицателен - предполагать  другой диагноз. 

2. В случае получения  положительного результата от  инструментальных методов диагностики  - дополнительно серологическое  исследование на наличие специфических  антител. Противоамебные антитела  удается выявить в сыворотках 95% больных с амебным абсцессом  печени.  
Выявление специфических антител позволяет назначать специфическую амебоцидную терапию.