Ирина Эланс

Автор который поможет с любыми образовательными и учебными заданиями

Возбудитель пастереллеза птиц

ФГОУ ВПО «Вятская государственная сельскохозяйственная академия»

Факультет ветеринарной медицины

Кафедра морфологии и микробиологии

КУРСОВАЯ РАБОТА

по теме: «Возбудитель пастереллеза птиц»

Выполнила студентка 3 курса

факультета ветеринарной медицины

по специальности «Ветеринария»

очной формы обучения

группы ВВ-322

Русинова Диана Юрьевна

Киров 2012

Содержание

Краткая характеристика заболевания..................................................3 стр.
Историческая справка изучения болезни и возбудителя заболевания............................................................................................5 стр.
Систематическое положение возбудителя..........................................6 стр.
Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя............7 стр.
Культуральные свойства.......................................................................8 стр.
Биохимические свойства.....................................................................10 стр.
Патогенные свойства...........................................................................11 стр.
Устойчивость к действию факторов внешней среды.......................12 стр.
Антигенная структура.........................................................................13 стр.
Бактериологическая диагностика......................................................15 стр.
Серологическая диагностика.............................................................20 стр.
Аллергическая диагностика...............................................................21 стр.
Специфическая профилактика заболевания....................................22 стр.
Специфическая терапия больных животных...................................24 стр.
Заключение......................................................................................... 25 стр.
Список использованной литературы................................................26 стр.

Краткая характеристика заболевания

Пастереллез птиц ( Pasteurellosis, геморрагическая септицемия, холера птиц) – инфекционная контагиозная болезнь, поражающая птиц всех видов и возрастов, характеризующаяся явлениями септицемии, воспалительно-геморрагическим диатезом и высокой смертностью. Распространяется холера больной и переболевшей птицей, инфицированными предметами ухода, кормом, водой и обслуживающим персоналом.

Пастереллез широко распространен во всех странах мира. Заболевание проходит в острой форме, редко подостро и хронически.

При остром развитии прослеживают цианоз гребня и бородок, крупозную плевропневмонию; геморрагический диатез с многочисленными кровоизлияниями в органах, особенно под эпикардом и эндокардом (сердце, как бы обрызгано кровью); серозно-фибринозный перикардит; зернистую дистрофию и очаговые некрозы в печени и миокарде; острый катаральный или геморрагический дуоденит (стенки утолщены, гиперемированы, с кровоизлияниями, содержимое с кровью); селезенка в некоторых случаях увеличена.

Инфицированная птица угнетена, отличается сонливостью; из открытого клюва истекает тягучая слизь, нередко с примесью крови.

Присущий признак - жидкий помет зеленого цвета с примесью крови. Температура тела у животного до 43 С.

Длительность заболевания от нескольких часов до 3-4 суток. Исход - летальный, при использовании медикаментозных средств заболевание принимает хроническое течение.

Подострое течение сопровождается теми же симптомами, что и острое, однако менее выраженными. Длительность заболевания до 5-10 суток.

При хронической форме трупы павших птиц истощены, гребни темно-синие. Пораженные бородки и гребень увеличены в 2 – 3 раза, припухшие, при разрезе сочные, между листками студневидный желтоватый экссудат. Если заболевание протекает более длительный срок, то бородки и гребень плотные, деформированы, с некротическими участками, при разрезе вытекает жидкость грязного цвета с примесью хлопьев, напоминающих свернувшийся белок, или беловато-серая творожистая масса. Наблюдается анемичность слизистых оболочек, отек подкожной клетчатки головы. У птиц с поражением глаз и дыхательных путей обнаруживают корочки засохшего экссудата вокруг глаз и носовых отверстий, желтоватые казеозные массы в подглазничных синусах, покраснение коньюктивы, слизистых носовой полости. В носовой полости обнаруживают значительное количество слизистого или серозно-гнойного экссудата. Аналогичные изменения наблюдаются в гортани, трахее и даже легких (катаральная бронхопневмония). Пораженные суставы набухшие, увеличены, деформированы, в суставных полостях фибринозно-некротические казеозные массы. Наблюдаются кровоизлияния на сердце и серозных покровах, и очень часто на слизистой кишечника, сильнейший геморрагический энтерит, особенно в двенадцатиперстной кишке; некротические очаги в печени. В отдельных случаях патологоанатомические изменения могут быть только в кишечнике (энтерит).

Встречаются поражения верхних дыхательных путей и воздухоносных мешков. Их стенки утолщены, не прозрачны, покрыты пленками фибрина. Воздухоносные мешки заполнены серозным экссудатом.

Селезенка иногда увеличена, темно-красного цвета, дряблая, иногда имеются беловато-желтовато-серые очажки некроза.

Хронический пастереллез может протекать как самостоятельно так и совместно с другими бактериальными инфекциями (чаще всего в комплексе с коллибактериозом или листериозом).

Историческая справка изучения болезни и возбудителя заболевания

Болезнь начали изучать во Франции в 1782 г., под названием “холера птиц” она описана в научной литературе в 1831 г.

Впервые возбудителя холеры кур выделили Е.М. Земмер и Л.Пастер в 1878 -1880 гг. В эти годы Пастер провел первые опыты по ослаблению культур бактерий и осуществил иммунизацию птиц. В 1910 г. в честь его заслуг в микробиологии этот возбудитель был назван Pasteurella, а вызываемое им заболевание – пастереллезом.

В науке долгое время имел место зоологический подход к классификации пастерелл, и считалось, что у каждого вида птиц болезнь вызывает самостоятельный вид микроба. Лишь в 1939 г. Розенбушу и Мерганту удалось доказать несостоятельность такого взгляда и описать возбудителя болезни как самостоятельный вид – Pasteurella multocida.

В изучение болезни и разработку специфических средств защиты большой вклад внесли П. В. Сизов, В. П. Шаматава, М. К. Ганиев, Н. М. Никифорова, А. В. Лукьянченко, А. Н. Борисенкова и др.

Систематическое положение возбудителя

Царство: Procariota

Отдел: Firmicutes.

Секция: 5

Семейство: Pasteurellaceae

Род: Pasteurella (включает в себя 6 видов)

Вид: Pasteurella multocida

Встречаются в литературе и другие наименования этого микроба: Pasteurella septika ( Топлей и Вильсон, 1936), B. cholere gallinarum (Р. А. Цион, 1948), Pasteurella avis (М. С. Ганнушкин, 1958), B. bipolare septicus (Я. Е. Коляков, 1965) и т.д., но большинство исследователей в настоящее время называют возбудителя этой болезни Pasteurella multocida.

Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя

P. multocida в мазках-отпечатках из крови и органов представляют собой неподвижные, короткие, овальной или яйцевидной формы бактерии, эндоспоры не образуют. Длина составляет 0,4...1,2 мкм, ширина - 0,3...0,4мкм.

В мазках из культур пастереллы имеют вид коккоовоидных палочек, которые располагаются одиночно, попарно, реже в виде коротких цепочек, спор не образуют, образуют слизистые капсулы. Обладают полиморфизмом.

При наличии в питательных средах суббактерицидных доз пенициллина и стрептомицина пастереллы растут в виде относительно крупных палочек, теряющих способность к биполярному окрашиванию.

Пастереллы окрашиваются хорошо всеми растворами основных анилиновых красок, они грамотрицательны. Характерным для этого микроба является биполярное окрашивание анилиновыми красками в мазках из крови или органов птиц, а также в свежевыделенных культурах на полужидких средах. Биполярность пастерелл хорошо видна при окраске лефлеровской метиленовой синькой, карболфуксином, по Романовскому-Гимзе, Мурамцеву.

Капсулу у капсульных вариантов пастерелл можно выявить окраской водным раствором сафранина с подогреванием (способ Ольта). Но наиболее отчетливо ее видно при изготовлении мазков по Бурри с дополнительной окраской по способу Ребирга.

Культуральные свойства

Pasteurella multocida является факультативным анаэробом, температура ее жизнедеятельности 22-42ºс, оптимум температуры 37-38ºс. Оптимальное значение рН среды 7,2-7,4.

Растут на обычных питательных средах - МПА и МПБ, но лучше, при внесении к ним сыворотки крови, на средах Хоттингера или Мартена.

Рост на жидких питательных средах.

МПБ в первые сутки роста пастерелл слегка мутнеет, причем помутнение равномерное. На дне пробирки образуется слизистый осадок, который поднимается при встряхивании в виде косички (муаровые волны). Затем помутнение несколько усиливается, а через 4-8 дней роста бульон в пробирке светлеет, на дне более выраженный слизистый осадок. Пленка и пристеночное кольцо, как правило, не образуются.

На бульоне Мартена и Хотнатовой пастереллы дают более интенсивный рост, чем на обычных средах.

Имеются М- и R-формы. М-формы растут более интенсивно и дают более выраженный слизистый осадок. R-формы образуют хлопьевидный или зернистый осадок.

Рост на плотных питательных средах.

На МПА:

S-формы образуют мелкие, выпуклые, прозрачные, округлой формы колонии серого цвета. Они в косо проходящем свете флюоресцируют, что связано с капсулообразованием, сильно вирулентны;

M-формы - более крупные слизистой консистенции с непрозрачным центром, серовато-белые, с ровными краями, имеют капсулу, средней степени вирулентны;

R-формы - шероховатые непрозрачны колонии, капсул не имеют, авирулентны.

На МПЖ при посеве уколом пастереллы растут в виде отдельных колоний, а затем беловатого стержня, никаких отростков, а также разжижения желатины не наблюдается, так как эти бактерии лишены протеолитической активности.

Рост на куриных эмбрионах. Пастереллы могут расти на развивающихся куриных эмбрионах. Картер (1950) даже получил и испытывал эмбрион-вакцину против пастереллеза.

Биохимические свойства

Pasteurella muitocida относится к числу малоактивных бактерий. Образует индол на мартеновском бульоне, реакция на каталазу положительна, ферментирует глюкозу, сахарозу, манит, сорбит, неактивен в отношении лактозы, мальтозы, арабинозы, дульцита, раффинозы, салицина, рамнозы, декстрина. Не разжижают желатин.

Возбудитель восстанавливает нитраты в нитриты. Сероводород культура пастерелл либо не образует, либо образует в небольшом количестве.

Молоко не свертывает, гемолиза на кровяном агаре не вызывают, не растут в бычьей желчи и лизируются в ней. Это свойство используется для дифференциации пастерелл от коли-тифозных бактерий.

Патогенные свойства

Патогенные и вирулентные свойства пастерелл варьируют и наиболее сильно выражены при выделении их у птиц. Эпизоотические штаммы высоковирулентны для белых мышей и кроликов. Установлена корреляция между вирулентностью, капсуло- и токсинообразованием. Наибольшей вирулентностью обладают свежевыделенные культуры. В лабораторных условиях при хранении культур вирулентность пастерелл резко снижается.

При остром течении болезни пастереллы быстро размножаются, проникают в кровеносную и лимфатическую системы, вызывая септицемию. За счет образования эндотоксинов и других агрессивных субстанций повреждаются стенки сосудов, они становятся проницаемы для плазмы, клеточных элементов, развивается геморрагический диатез, появляются отеки подкожной и межмышечной клетчатки. В результате нарушения кровообращения наступает некроз тканей.

Устойчивость к действию факторов внешней среды

Устойчивость во внешней среде невысокая. При нагревании до 60ºС погибают через 20 минут, до 70 - 80ºС - через 5 -10 минут, при 90ºС - за 10 минут. Солнечные лучи убивают их в течение нескольких минут. При высушивании на открытом воздухе гибнут за 2-3 суток. Выдерживают замораживание до -70ºС.

В трупах, воде, навозе и почве сохраняется 1-3 месяца, иногда до года. Дезинфицирующие вещества (3%-ный раствор медного купороса, 13%-ный раствор перекиси водорода, 3%-ный раствор карболовой кислоты) убивают возбудителя за несколько минут.

Антигенная структура

Возбудители пастереллезов характеризуются наличием многих антигенов. Антигенными свойствами обладают компоненты клетки: липополисахаридный комплекс, свободный эндотоксин, полисахарид.

Основными антигенами являются соматический термостабильный протективный, общий для рода пастерелл, и капсульный полисахаридный термолабильный специфический, в зависимости от которых пастереллы делятся на несколько групп.

Четыре капсульных типа Pasteurella multocida обозначены через А, В, D и Е. Серовару соответствует арабская цифра, указывающая на соматический, или О, тип.

Ни одна из существующих систем идентификации соматических антигенов полностью не удовлетворяет специалистов, особенно в отношении количества и разновидностей антигенных детерминант, ассоциированных с эндотоксином.

Pasteurella multocida состоит более чем из 16 сероваров, некоторые из них ассоциированы с определенными видами животных и птиц и симптомами болезни. Серовары А:1 и А:3 являются возбудителями пастереллеза птиц.

Точная природа антигенов Pasteurella multocida полностью не изучена. Современные представления об основных компонентах, ассоциированных с капсульным веществом, можно резюмировать так:

1) β-антиген - типоспецифический полисахарид, адсорбируется на эритроцитах в реакции непрямой гемагглютинации; встречается в микроорганизмах, которые дают флуоресцирующие и мукоидные варианты;

2) d-комплекс - вероятно, полисахаридно-белковый, тесно прикрепляющийся к клеточной стенке, иммуногенный, видимо, в некоторой степени лабильный;

3) γ-антиген - липополисахарид, встречающийся в микроорганизмах всех вариантов, составляет клеточную стенку; у каждого одна или более антигенных детерминант, ответственных за различные О-, или соматические, серовары.

Следует отметить, что исследования морфологии, цитологии, биохимии, физиологии пастерелл многочисленны и неоднозначны. В дальнейшем изучать иммуногенные и физико-биохимические особенности микроорганизма целесообразно комплексно, поскольку такой подход дает возможность определить критерии оценки культуры in vitro, что важно при создании вакцинно-сывороточных препаратов.

Бактериологическая диагностика

Прижизненная бактериологическая диагностика пастереллеза не имеет большого значения, чаще исследуют материал от павших птиц. Результаты лабораторного исследования этого материала дают возможность уточнить первоначальный диагноз.

Бактериологическое исследование состоит из следующих моментов:1) микроскопия мазков из крови или мазков-отпечатков из пораженных органов; 2) выделение культуры возбудителя путем посева крови сердца, суспензии из органов костного мозга на питательные среды; 3) выделение культуры пастерелл путем заражения лабораторных животных и птиц; идентификация выделенной культуры и изучение ее вирулентности, которое особенно необходимо при выделении культуры пастерелл от птиц болеющих хроническим пастереллезом, и бактерионосителей.

Биологическую пробу на пастереллез ставят на белых мышах, либо на голубях, или на курах. Кролики также очень восприимчивы к пастереллам, но ставить биопробу на них вряд ли целесообразно, так как они часто являются спонтанными пастереллоносителями.

Лабораторных животных и птиц заражают суспензией из паренхиматозных органов подкожно или внутримышечно в дозе 0,2-0,5 мл.

В мазках из патологического материала и особенно крови (ценно для дифференциации от тифа, чумы и других болезней) при пастереллезе находят короткие с закругленными краями овоидные палочки с выраженной биполярностью. Обнаружение в мазках биполярных овоидов - ценный диагностический признак, но, кроме пастерелл, биполярную окраску могут давать и другие бактерии (E. Coli и д.р.), в то же время в некоторых случаях пастереллы не дают четкой биполярности при окраске. Необходимо также строго соблюдать технику окраски.

Учет результатов биопробы проводят в срок до двух-трех дней предварительный и окончательный не позже 5 дней после гибели опытных животных (птиц). Отрицательный ответ - после 10-дневного наблюдения за подопытными животными (птицами). Важно правильно оценить рост культуры на МПА, так как это позволяет судить об антигенных и вирулентных свойствах изучаемой культуры еще до проведения точных исследований. Морфологию колоний целесообразно учитывать так, как указано выше (S-формы, M-формы, R-формы).

Гибель животных, зараженных суспензией патологического материала из паренхиматозных органов или чистой культурой возбудителя, в зависимости от вирулентности штамма наступает в разные сроки. Достаточно вирулентные штаммы вызывают гибель голубей, кур, белых мышей чаще в течении первых суток, редко- двух суток.

Павших подопытных животных и птиц вскрывают, делают посевы из крови сердца, паренхиматозных органов на простые среды, готовят и окрашивают мазки, микроскопируют их с последующей идентификацией культуры.

У подопытных животных и птиц при патологоанатомическом исследовании обнаруживают типичные для пастереллеза признаки, особенно у птиц; у белых мышей - воспалительный очаг на месте инъекции, отечности подкожной клетчатки и мускулатуры, кровоизлияний на эпикарде, увеличенные и отечные лимфатические узлы.

Изолированные и идентифицированные культуры пастерелл необходимо проверять на патогенность и вирулентность, которая у различных штаммов неодинакова.

Особенно важно вирулентность выделенных штаммов установить у птиц-пастереллоносителей, имеющих большое эпизоотическое значение. С этой целью подопытных птиц или белых мышей заражают подкожно или внутримышечно разными дозами изучаемого штамма и в результате определяют среднюю летальную дозу, при которой погибает 50% птиц или белых мышей, взятых в опыт (LD50), при разных способах заражения. Голубей или цыплят целесообразнее заражать внутримышечно, а белых мышей подкожно, различными разведениями пастереллезных культур.

Дифференциальная диагностика

Важное значение имеет правильная идентификация выделенной культуры и дифференциация ее от сходных микроорганизмов, главным образом от возбудителя пуллороза, листериоза.

Таблица 1

Возбудитель	Подвиж- ность	Капсула	Сероводород	Индол	Редукция нитратов
Пастереллеза	----------	Есть у свеже-выделенных вирулентных штаммов	Образует небольшое количество	+	Положи-тельная
Пуллороза	----------	----------------	Образуют не все штаммы	---	Отсутствует
Листериоза	Подвижен только в молодых культурах	----------------	----------------	---	Отсутствует

Продолжение таблицы 1.

Возбудитель	Проба на каталазу	Патогенность для лаб-ных животных (птиц)	РА с позитивной сывороткой
Пастереллеза	Положит.	Белые мыши+, голуби+, морские свинки+ (при внутри- брюшинном заражении)	Имеет очень малое значение ввиду отсутствия стандартных сывороток
Пуллороза	Отрицат.	Белые мыши+, голуби и морские свинки непостоянно	Положительная с пуллорной сывороткой
Листериоза	Положит.	Белые мыши+, морские свинки+, голуби-	С листериозной сывороткой положительная

При постановке диагноза необходимо пастереллез птиц дифференцировать от других заболеваний. Таких как спирохетоз, , стрептококкоз. При заболевании водоплавающей птицы пастереллез дифференцируют от инфлюэнцы.

Надежная дифференциация пастереллеза от других болезней возможна лишь при оценке комплекса данных по эпизоотологии, клинической и особенно патологоморфологической картине, бактериологическому и другим лабораторным методам исследования.

Спирохетоз птиц отличается от пастереллеза тем, что при исследовании мазков крови под микроскопом при спирохетозе находят спирохеты, а при пастереллезе биполярно окрашенные овоиды. Различны также результаты бактериологического исследования, биопроб. При спирохетозе не находят картину сепсиса на вскрытии. Распространение этой болезни ограниченно (в зоне с теплым климатом).

Инфлюэнца. У утят и гусят острый пастереллез нужно дифференцировать от инфлюэнцы, которая часто поражает гусят. У павших гусей обнаруживают серозно-фибринозный перикардит, фиброзный перитонит и перигепатит, увеличение селезенки, а иногда и аэросаккулиты. В отличии от пастерелл возбудитель инфлюэнцы в первых генерациях не растет или очень плохо растет на простых питательных средах. Кролики и мыши не восприимчивы к инфлюэнце.

Стрептококкоз. Острый стрептококкоз может протекать по типу геморрагической септицемии, а хронический - с поражением бородавок и подошв. Эти признаки сходны с таковыми при пастереллезе. Выделение при бактериологическом исследовании стрептококков и проверка их вирулентности на цыплятах позволяют уточнить диагноз.

Дифференциальная диагностика хронического пастереллеза и его локализованных форм (ринит, артрит, конъюнктивит и т.п.) от аналогичных незаразных болезней не вызывает трудностей.

Серологическая диагностика

Применяется реакция агглютинации (РА).

Ценные данные реакции агглютинации получают при идентификации пастерелл и установлении их различных серотипов, в особенности если в реакции используют высокоактивные сыворотки, полученные гипериммунизацией кроликов или крупного рогатого скота штаммами пастерелл, выделенными от птиц.

РА ставят по общепринятой методике в пробирках на формалинизированном фосфатном буфере с разведением сывороток 1:10, 1:20 и т.д. дозировка компонентов для реакции такова: 0.5 мл сыворотки + 1 мл взвеси антигена.

Реакцию учитывают после инкубирования в течение 18 часов при 370 С и выдерживания в термостате в течение 4-5 часов при комнатной температуре.

Контролями антигена служат буферный раствор и нормальная кроличья сыворотка. Антиген считается непригодным для реакции, если в одном из контролей наблюдают агглютинацию.

Аллергическая диагностика

Для прижизненной диагностики хронически протекающего пастереллеза птиц микробоносительства этого микроба некоторыми авторами были испытаны аллергические препараты, но положительных результатов в производственных условиях не было получено.

В последнее время вопросы аллергической диагностики пастереллеза птиц не изучаются, и в связи с ежегодной заменой поголовья маточных стад вновь выращенным молодняком вряд ли в этом есть необходимость.

Специфическая профилактика заболевания

Иммунопрофилактика пастереллезов занимает одно из основных мест в системе противоэпизотологических мероприятий. В нашей стране против пастереллеза птиц выпускают следующие:

- инактивированные вакцины против пастереллеза птиц:

* инактивированная сорбированная вакцина против пастереллеза птиц

* эмульсинвакцина против пастереллеза птиц;

- сухая живая вакцина против пастереллеза водоплавающих птиц из штамма «К» Краснодарской НИВС;

- сухая живая вакцина против пастереллеза птиц из штамма «АВ»

Краснодарской НИВС;

- сухую вакцину против пастереллеза птиц из пастеровского штамма.

Инактивированная вакцина. Представляет капельную фракцию пастерелл. Препарат обладает выраженным противоэпизоотическим эффектом в течении 10 месяцев после вакцинации.

Чаще всего для инактивирования пастерелл используют формалин в концентрации 0,1-0,3%. Наряду с формалином испытаны мертиолят, бетапропилактат, неомицин, глутаральдегид, азид натрия, спирт, йод, красители.

Применение инактивированных вакцин безвредно, обеспечивает создание иммунитета у птиц, однако не всегда достаточно напряженного.

Живые вакцины. В результате селекции был отобран авирулентный штамм, который использовали в качестве вакцины в виде нативной полужидкой культуры, выращенной глубинным способом в реакторе. Опытным путем установили, что этот штамм формирует у кур иммунитет продолжительностью до 3 месяцев. Из данного штамма изготовили вакцину для практического применения с ограниченным сроком годности (45 дней).

Был разработан глубинный метод культивирования пастерелл в реакторах в питательной среде на основе перевара Хоттингера с периодическим добавлением источников питания, последующей концентрацией бактериальной суспензии и лиофилизацией. Получили сухую авирулентную вакцину против пастереллеза со сроком годности 10 месяцев.

Имеются сведенья о получении формолвакцины против пастереллеза птиц. При культивировании штаммов приготавливали разные комбинации ферментативных (панкреатических) гидролизатов - казеина (ПГК), рыбной муки(ПГРМ) и крови крупного рогатого скота (ПГКр) с солевыми добавками. Об эффективности питательных сред судили по наращиванию биомассы через определенные отрезки времени. Посевы каждого штамма делали после соответствующего контроля на МПА.

Также в 2005 году Таджикский НИВИ разработал и изготовил новый синтезированный препарат САП-2 - смесь S(7-метил-5-оксо-5Н-1,3,4-тиадизоло [3,2-а] пиримидин-2-ил) - изотиурон гидробромида с сахарозой (1:1), обладающий антибактериальной активностью.

Изучение профилактической эффективности САП-2 при пастереллезе показало, что применение САП-2 и норфосульфазола способствовало улучшению общего состояния цыплят, повышению аппетита, нормализации температуры тела.

Специфическая терапия больных животных

Специфическая терапия при пастереллезе птиц не разработана

У переболевших птиц образуется нестерильный иммунитет. После вакцинации птицы могут оставаться пастереллоносителями.

Заключение

Вспышки пастереллезов наносят огромный экономический ущерб птицефабрикам. Благодаря исследованиям последних лет выделенные микроорганизмы могут быть достоверно охарактеризованы по наличию антигенов. Борьба с пастереллезом эффективна лишь при лечебно-профилактических мероприятиях по уничтожению возбудителя болезни во внешней среде и повышению общей и специфической резистентности птиц.

Возбудитель пастереллеза птиц 📙 Курсовая → 🆔 55857